包煥平
摘 要:隨著科技的迅速發展,化學發光免疫技術已被廣泛應用到臨床醫學和基礎醫學的各個領域,是繼熒光免疫、繼酶免疫以及發射免疫等測定后的一種免疫技術。在臨床檢驗中應用化學發光免疫技術,為臨床檢驗提供診斷依據,提高檢驗的準確度。本文主要探討發光免疫技術的概況,并對臨床檢驗中應用化學發光免疫技術進行分析。
關鍵詞:臨床檢驗;應用;化學發光;免疫技術
化學發光免疫技術具有標本用量較少、穩定性較高、標記物制備較容易、不污染環境、操作簡便以及便于實現自動化等優點,主要將免疫分析與化學反光分析相結合,被廣泛應用到臨床醫學和基礎醫學中?;瘜W發光免疫技術是繼酶免疫、發射免疫以及熒光免疫測定之后的免疫技術,在臨床檢驗中經常需要檢測和分析表征性物質,以判斷疾病以及身體病理特征。通過在臨床檢驗中應用化學發光免疫技術,快速分析各種物質,能夠提高檢測的靈敏度與準確度。
1 化學發光免疫技術的概況
化學發光免疫技術主要包括化學發光分析和免疫分析系統,用于抗原、抗體、酶、激素、維生素以及脂肪酸等檢測分析技術?;瘜W發光分析是根據免疫反應情況,待免疫反應完之后加入酶或氧化劑等發光底物,發光底物經過氧化會形成處于激發狀態的中間體,通過發射光子來釋放能量,以達到穩定狀態。而免疫分析是在抗體或抗原之上利用標記物進行直接的標記,標記物為化學物質或酶,待抗體或抗原發生反應后,會產生帶有抗體免疫的復合物。
化學發光免疫技術的原理是以化學發光劑對抗體或抗原進行直接標記,待磁顆粒性、抗體或抗原發生反應之后,在磁場的作用下,分離處于游離狀態和結合狀態的化學發光劑,將發光促進劑加入到結合狀態的部分,使其進行快速的發光反應,并以定性或定量的方式檢測處于結合狀態的發光強度?;瘜W發光免疫技術系統具有操作較為簡單,結果較為準確可靠,且自動化程度較高以及試劑儲存的時間較長等優點,可根據激發態分子能量的來源,將化學發光的過程分為生物發光、光照發光和化學發光。
2 化學發光免疫技術在臨床檢驗中應用的類別
化學發光免疫技術在臨床檢驗中,主要分為酶催化化學發光的免疫分析、直接標記發光物質的免疫分析以及電化學發光的免疫分析。酶催化化學發光的免疫分析是通過抗體或抗原在標本中發生反應之時,采用發光的酶作為標記物。直接標記發光物質的免疫分析是采用吖啶酯對體或抗原進行直接標記,待抗體或抗原發生免疫反應后會產生一種復合物,加入氫氧化鈉和帶有雙氧水的氧化劑后呈堿性,出現發光、分解等現象。而電化學發光的免疫分析過程包括化學反光和電化學,將三丙胺作為電子供體,對抗體或抗原用三聯吡啶釕進行標記,在電場的作用下,通過電子轉移而產生發光反應。
3 在臨床檢驗中應用化學發光免疫技術的分析
3.1 應用化學發光免疫技術分析傳染性疾病
乙型肝炎病毒是血清學的標志物,是治療和評價機體免疫功能的重要指標。診斷乙型肝炎病毒中的抗體或抗原的表面部分是否受到感染,這樣的診斷為常規酶法,但常規酶法會使低病毒含量的攜帶者出現漏檢的情況。化學發光免疫技術和以前的常規酶法相比,具有線性范圍寬和高靈敏度等特點,在臨床檢驗中應用化學發光免疫技術對傳染性疾病進行分析,如對于已感染免疫病毒的兒童,應對其體內的甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒以及單純皰疹病毒以Bowser等進行測定,檢測出的靈敏度較高。
3.2 應用化學發光免疫技術分析腫瘤標志物
腫瘤標志物指腫瘤腫瘤在發生與增殖的過程中,通過腫瘤細胞進行合成、釋放或者是機體與腫瘤細胞發生反應,產生酶、激素、白質以及癌基因產物等物質?;颊叩募毎?、血液以及組織中都會有腫瘤標志物,利用化學發光免疫技術能夠快速的尋找到難以發現的腫瘤標志物。通過對患者進行體外的輔助診斷以及術后監測,能夠緩解患者的病痛。采用Mac等診斷和監測食管癌患者的病情,如對血清中的癌胚抗原濃度、鱗狀細胞癌的抗原濃度等進行檢測。以Raslan和Shabin對健康孕婦德陰道液和胎膜早破中的人絨毛膜促線性激素和AFP標志物進行比較,AFP的特異性和敏感度較高。
3.3 應用化學發光免疫技術分析心臟疾病
在臨床檢驗中,經常以同丁酶對心臟疾病患者進行定量測定。心肌損傷的標志物包括肌酸激酶、肌紅蛋白和肌鈣蛋白T,應用化學發光免疫技術分析心臟疾病的標記物,能夠提高檢測的準確度。通過采用Dutra等將肌鈣蛋白T(cTnT)的受體分子制成免疫傳感器,應用于早期心肌梗死的臨床檢測,其方法較好,具有相關性,可以應用到臨床中對標本進行檢測。
3.4 應用化學發光免疫技術分析激素
激素是細胞和細胞間進行信息傳遞的媒介,主要指散在內分泌細胞中或內分泌腺所分泌出來的高效能的活性物質。在臨床檢測中應用化學發光免疫技術分析和測定性激素、甲狀腺激素等激素,能夠為臨床診斷和治療提供比較可靠、準確的實驗室數據,提高檢測的靈敏度和特異性。通過以Vutyavanich等對血清中的促黃體生成素、睪丸素、促卵泡生成素以及催乳素等進行檢測,以Karlsson對患者甲狀旁腺進行檢測,以Gayk和Schmidt對骨代謝標志物中的降鈣素進行測量,并和放射免疫法相比,其精密度和準確度較高。
3.5 應用化學發光免疫技術分析其他物質
在臨床檢驗中,應用化學發光免疫技術還可以分析細菌、維生素、免疫球蛋白、細胞因子、酶以及基因等。通過Dasgupta等對血清中高辛含量進行檢測,以Quan等對食物中含有的鹽曲霉毒素B1進行檢測。
綜上所述,化學發光免疫技術具有不污染環境、操作簡便以及便于實現自動化等優點,被廣泛應用到臨床醫學和基礎醫學中。在臨床檢驗中應用化學發光免疫技術,能夠為臨床檢驗提供數據依據,提高檢測的精密度和準確度。
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