楊強強
·實驗研究·
不同濃度薯蕷丸在升高白細胞方面療效對比
楊強強
目的研究對比不同濃度薯蕷丸在升高白細胞(WBC)方面的療效。方法應用環磷酰胺(200 mg/kg)一次性腹腔注射, 誘導小鼠骨髓抑制引起的白細胞降低模型。取60只雄性昆明種小鼠, 體重(20±2)g, 按照隨機分組法分為五組并編號, A組(正常對照組);B組(病理模型組);C組(薯蕷丸低劑量組); D組(薯蕷丸中劑量組);E組(薯蕷丸高劑量組);每組12只。常規飼養, 除A、B組外, C、D、E組分別給低劑量薯蕷丸(1 g生藥/ml, 20 ml/kg)、中劑量薯蕷丸(2 g生藥/ml, 20 ml/kg)、高劑量薯蕷丸(4 g生藥/ml, 20 ml/kg), 1次/d, 連續10 d后除A組外, 其余各組一次性腹腔注射環磷酰胺(200 mg/ kg), 繼續給予相應中藥, 灌胃, 1次/d。腹腔注射環磷酰胺96 h后用電子天平測小鼠體重, 摘眼球取血,常規法測WBC。結果與A組比較, B組小鼠白細胞明顯減少, 差異有統計學意義(P<0.01)。與B組比較, C組可升高小鼠白細胞數量, 差異無統計學意義(P>0.05), D組、E組可不同程度升高小鼠白細胞數量, 差異有統計學意義(P<0.01)。薯蕷丸中劑量組、薯蕷丸高劑量組在升高白細胞方面差異無統計學意義(P>0.05)。結論不同濃度的薯蕷丸在升高白細胞方面療效明顯不同。
薯蕷丸;環磷酰胺;白細胞減少
白細胞減少是化療后的常見副作用, 現在已有的試驗和臨床研究多以四君子湯、四物湯、八珍湯、十全大補湯等傳統的補益氣血的方劑為主。而且臨床有效, 但很少研究濃度不同情況下療效的差異。
1.1 實驗動物 選用健康普通級昆明小鼠, 雄性, 4周齡,體重(20±2)g, 由鄭州大學醫學院實驗動物中心提供。
1.2 實驗用藥
1.2.1 薯蕷丸制備 薯蕷90 g, 當歸、桂枝、神曲、干地黃、大豆黃卷各10 g, 甘草84 g, 人參21 g, 川芎、芍藥、白術、麥門冬、杏仁各18 g, 柴胡、桔梗、茯苓各15 g, 阿膠21 g,干姜9 g, 白蘞6 g, 防風18 g, 大棗百枚為膏。以上方藥以常法熬制, 藥液終濃度為4 g生藥/ml。稀釋后配成薯蕷丸低劑量2 g生藥/ml。
1.2.2 試劑和儀器 環磷酰胺, 上海華聯制藥有限公司生產, 批號:020615, 規格:200 mg, 劑型:粉針劑, 臨用前用50 ml無菌生理鹽水配制成濃度為4 mg/ml的溶液供試, 可在4℃下保存6 d。生理鹽水。實驗儀器鑷子、離心管、試管、5 ml注射器、1 ml注射器、小鼠灌胃器、針頭、SPS601F電子天平、全自動血球計數儀、冰箱(4℃)。
1.3 實驗方法
1.3.1 造模方法以及分組 用剪尾法檢查基礎白細胞總數。根據小鼠基礎白細胞總數由高到低排序, 刪除兩極小鼠, 保留60只。然后將白細胞數接近的5只小鼠劃分為一個組區,共60個, 再將每個組區里的5只小鼠隨機分配到A、B、C、D、E組內, 每組12只, 分組:A組(正常對照組);B組(病理模型組);C組(薯蕷丸低劑量組); D組(薯蕷丸中劑量組);E組(薯蕷丸高劑量組)。正常飲食。(注:試驗過程中, 可能由于灌胃等因素會造成小鼠死亡, 故每試驗組均分12只小鼠, 檢測指標時每組取10只小鼠的樣本作為檢測對象。)
1.3.2 用藥情況 A組:生理鹽水20 ml/kg, 灌胃, 1次/d,連續10 d;B組:生理鹽水20 ml/kg, 灌胃, 1次/d, 連續10 d;C組:1 g生藥/ml, 20 ml/kg, 灌胃, 1次/d, 連續10 d;D組:2 g生藥/ml, 20 ml/kg, 灌胃, 1次/d, 連續10 d;E組:4 g生藥/ml, 20 ml/kg, 灌胃, 1次/d, 連續10 d。第30天除正常對照組外, 各組均腹腔注射環磷酰胺200 mg/kg, 同時C、D、E組給予相應中藥, 灌胃, 1次/d, 劑量同前。腹腔注射環磷酰胺連續96 h后, 各組摘眼球取血抗凝稀釋后, 于全自動血球計數儀上計數WBC。
1.4 統計學方法采用SPSS13.0 統計學軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗;計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。
與A組比較, B組小鼠白細胞明顯減少, 差異有統計學意義(P<0.01), 與文獻[1]報道相符合, 說明本實驗環磷酰胺造模是成功的;與B組比較, C組可升高小鼠白細胞數量, 差異無統計學意義(P>0.05), D組、E組可不同程度升高小鼠白細胞數量, 差異有統計學意義(P<0.01)。D組、E組在升高白細胞方面差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 五組小鼠外周血中白細胞數量的比較( x-±s, ×109/L)
化療是用來治療腫瘤患者, 而腫瘤患者原本就正氣虧虛,化療藥毒性極強, 在治療的同時, 又損傷了人體正氣。當屬中醫“虛勞”范疇, 現代研究補氣藥如人參、黃芪, 補血藥如當歸, 補氣方如四君子, 補血方如四物湯[2]均可升高白細胞, 還有八珍湯[3]以及十全大補湯[4]等氣血雙補的方劑。薯蕷丸也能升高白細胞。在實驗室研究或臨床研究中多以古方量作為標準, 但古方量大或量小并沒有人做過研究, 本研究通過不同濃度的療效對比, 可以發現當薯蕷丸用量達到2 g生藥/ml, 20 ml/kg時, 若再加大藥量對療效并無太大影響。相反, 用量減少到1 g生藥/ml, 20 ml/kg時, 基本無療效。由此引起臨床對藥物濃度的重視。
[1] 趙喜新, 閻杜海, 王和平, 等.環磷酰胺引致的小鼠白細胞減少模型及動力學分析.上海實驗動物科學, 1998, 18(1):12-14.
[2] 梁乾德, 路曉欽, 馬增春, 等.四物湯促進造血功能成分的初步研究.中國中藥雜志, 2004, 29(6):546-549.
[3] 趙弋清, 羅霞, 陳東輝, 等.八珍湯對60CO照射小鼠骨髓細胞及脾細胞凋亡研究.中國中藥雜志, 2004, 29(12):1165-1167.
[4] 鄭建軍, 吳新華, 張再躍, 等.十全大補湯對腫瘤患者放化療減毒作用的觀察, 山東中醫雜志, 2000, 19(7):395.
10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.25.204
2015-01-23]
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