干姜黃芩黃連人參湯飲片與煮散干預2型糖尿病SD大鼠的藥效學初步分析

彭智平張琳琳劉起華仝小林

干姜黃芩黃連人參湯飲片與煮散干預2型糖尿病SD大鼠的藥效學初步分析

彭智平1張琳琳2劉起華3仝小林3

目的 觀察干姜黃芩黃連人參湯飲片與煮散在2型糖尿病SD大鼠動物模型中的藥效學關系。方法 將造模成功的72只大鼠按血糖值分六組：模型組、西藥組、飲片組、煮散組、2/3飲片組、2/3煮散組，每組12只。另選12只作正常對照。模型組及正常組給予純凈水，西藥組給予二甲雙胍，飲片組、煮散組、2/3飲片組和2/3煮散組給予相應濃度的干姜黃芩黃連人參湯飲片和煮散劑。給藥12周，監測大鼠體質量、血糖等變化。結果 ①對大鼠體質量的影響：實驗組SD大鼠體質量較正常對照組明顯下降（P均＜0.01），各給藥組與模型組差異無統計學意義（P＞0.05）。②對大鼠血糖的影響：0、4、8周各給藥組之間差異無統計學意義（P＞0.05），12周時2/3煮散組血糖值顯著低于2/3飲片組 [（14.3±5.2比20.6±5.8）mmol/L，P＜0.01]，且與飲片組差異無統計學意義 [（14.3±5.2比14.9±6.5）mmol/L，P＞0.05]。結論 煮散可以節省約1/3的等量飲片。

大鼠；2型糖尿病；飲片；煮散；干姜黃芩黃連人參湯；藥效學分析

煮散即是將中藥飲片打成一定粒度的粗粉，經過煎煮濾過藥渣獲取藥液的方法。復方煮散的應用在漢代張仲景《傷寒雜病論》中即得到了廣泛的應用，如薏苡附子敗醬散、半夏干姜散等，至宋代以《太平惠民和劑局方》的問世使煮散的應用達到了鼎盛，縱觀其歷史原因以其能節省藥材、提高療效。本研究以復方干姜黃芩黃連人參湯加味為示范，以2型糖尿病大鼠為實驗模型，觀察干姜黃芩黃連人參湯加味方傳統飲片與煮散在2型糖尿病SD大鼠動物模型中的藥效學關系[1]。

1 實驗材料

1.1 動 物 選用健康4周齡雄性SPF級SD大鼠共112只，體質量（100±10）g，由北京華阜康生物科技股份有限公司提供，動物合格證號為SCXK（京）2009-0007。飼養于廣安門醫院實驗動物中心，環境溫度為20～25℃，濕度60%～80%，正常晝夜規律。實驗過程中對動物的處置符合動物倫理學標準。

1.2 飼 料 動物飼料由北京華阜康生物科技股份有限公司提供，分為普通飼料和高脂飼料，高脂飼料即普通飼料中加入20%的脂肪（50%豬油和50%蛋黃粉）和20%蔗糖。

1.3 藥 物 干姜黃芩黃連人參湯加味方：干姜9g，黃芩30g，黃連15g，知母30g，西洋參6g，以上藥物經過相應劑型處理后濃煎至一定濃度冷藏保存。西藥為二甲雙胍。

2 實驗方法

2.1 動物分組 按隨機分配原則選取SD大鼠112只，分為正常組12只，高脂組100只。高脂組中造模的大鼠成功72只按血糖值分為模型組、西藥組、飲片組、煮散組、2/3飲片組、2/3煮散組，共六組，每組12只。正常組自由攝食及飲水，高脂組給以高脂飼料。

2.2 模型制備 采用高脂飼料加小劑量STZ注射造模。高脂組大鼠在高脂飼料喂養4周后空腹腹腔注射低劑量STZ（35mg/kg，Sigma公司）1次，正常組腹腔注射等劑量檸檬酸緩沖液（STZ用0.1mmol/L檸檬酸配制稀釋為pH4.2），所有大鼠自由飲水進食。模型不達標者，2天后補注STZ（10mg/kg腹腔注射）。造模時STZ應新鮮配制，分組時各組動物按血糖值高低分層后隨機分組，各組血糖均值差異無統計學意義（P＞0.05），血糖值升高不符合要求的動物應剔除。糖尿病大鼠成模標準為STZ造模3d（72h）后取尾靜脈測血糖，以隨機血糖＞16.7mmol/L認為造模成功。

2.3 給 藥 西藥組配藥濃度為30mg（/mL·d）；飲片組配液濃度為1.8g飲片生藥/mL；2/3飲片組為1.2g飲片生藥/mL；煮散組配液濃度為1.8g煮散生藥/mL；2/3煮散組為1.2g煮散生藥/mL；模型組及正常組按體質量給予純凈水。每天分早晚2次灌胃給藥，觀察12周。

2.4 觀察指標與方法 每天記錄大鼠一般生存生活狀態，如進食、進水、排尿、大便、精神、活動度、皮、毛等變化；每7天測量1次大鼠體質量；給藥0W、4W、8W、12W測空腹血糖。

2.5 統計學方法 應用SPSS17.0統計軟件包進行數據分析，實驗數據均以均值±標準差（±s） 表示。采用重復測量的方差分析,當P＜0.05時差異有統計學意義。

3 實驗結果

3.1 各組大鼠體質量比較 實驗期間模型組、西藥組、飲片組、煮散組、2/3飲片組和2/3煮散組大鼠體質量較正常對照組明顯下降（P＜0.05或P＜0.01），但進食量、進水量卻較正常組明顯增多，且多數大鼠在4周左右開始出現多尿的情況。自給藥0～12周各給藥組體質量與模型組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）,提示各給藥組對血糖升高引起的體質量下降無明顯改善作用。見表1。

3.2 各組大鼠血糖比較 實驗過程中，各給藥組與模型組SD大鼠血糖維持在較高水平，明顯高于正常組大鼠（P均＜0.01），0～12周期間各給藥組、模型組與正常組比較始終存在顯著性差異。0、4周時，各給藥組之間差異無統計學意義（P＞0.05）；8周時，西藥組、飲片組、煮散組、2/3煮散組血糖有下降趨勢，2/3飲片組與模型組血糖仍處于較高水平；12周時，2/3煮散組優于2/3飲片組，且與飲片組差異無統計學意義（P＞0.05），提示煮散可以節省約1/3的等量飲片。見表2。

表1 各組大鼠體質量比較（g，±s）

表1 各組大鼠體質量比較（g，±s）

注：與正常組比較，#P＜0.05，##P＜0.01

組別正常組模型組西藥組飲片組煮散組2/3飲片組2/3煮散組只數12 12 12 12 12 12 12 0周480.8±40.1 460.4±36.0 461.9±38.1 462.1±53.8 448.5±24.3 453.8±39.4 472.5±49.2 2周510.5±42.8 472.8±35.0#455.1±44.1##454.0±43.2##450.6±29.3##451.2±47.3##456.0±38.1##4周547.1±45.7 450.6±56.3##445.4±58.8##450.0±68.3##445.2±43.0##420.2±48.5##438.0±34.5##6周580.0±49.1 458.4±67.2##455.7±66.0##455.3±85.7##451.7±54.9##431.8±79.4##445.5±42.6##8周603.3±52.9 433.5±82.5##436.1±75.6##455.3±95.0##447.0±64.6##414.5±86.8##414.2±56.8##10周564.5±93.6 464.3±99.0#439.8±76.1##441.2±107.2##441.7±79.1##424.8±100.0##437.8±49.6##12周614.0±45.7 437.8±112.5##448.5±74.6##428.7±121.6##451.4±83.6##428.0±104.2##424.4±59.0##

表2 各組大鼠0～12周血糖比較（mmol/L±s）

表2 各組大鼠0～12周血糖比較（mmol/L±s）

注：與正常組比較，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與西藥組比較，△P＜0.05；與飲片組比較，□P＜0.05；與煮散組比較，○P＜0.05；與2/3飲片組比較，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01

組別正常組模型組西藥組飲片組煮散組2/3飲片組2/3煮散組只數12 12 12 12 12 12 12 0周5.9±0.4 19.6±5.8##19.6±6.2##19.7±6.0##19.6±6.1##19.5±5.9##19.7±5.9##4周5.8±0.5 17.3±3.1##17.4±5.3##17.5±5.0##18.1±5.3##19.9±5.8##17.6±3.8##8周4.8±0.7 18.0±5.1##13.9±7.9##16.0±7.3##15.6±6.0##19.6±6.3##16.4±6.4##12周4.8±0.3 19.9±4.5##△12.8±6.0##**☆☆14.9±6.5##14.7±7.9##☆20.6±5.8##△□○14.3±5.2##*☆☆

4 討論

“丸散膏丹”不同劑型是傳統中醫藥的工藝形式，具有“減、便、廉、驗”的特點。特別是宋代因戰亂頻繁，藥材資源匱乏，從官方到民間都大力提倡“煮散”，當時官修方書《太平惠民和劑局方》記載了大量煮散的方劑[2]，煮散作為中藥傳統工藝之一，在宋代四百年間得到空前的發展。但隨著藥材資源的發展，人們又重新開始大力使用飲片，煮散又逐漸衰退下來，現今又面臨藥源緊缺的現狀，但關于煮散的很多工藝操作未能很好地繼承下來，以致現今大多人對煮散這一工藝形式還比較陌生，導致煮散的推行也存在一定難度。一些醫家開始認識到煮散的重要性，展開了一些研究，如梁少瑜等[3]研究干燥對煮散顆粒粉體學特性的影響、文謹等[4]研究黃芩煮散與傳統飲片有效成分的煎出效果比較、穆蘭澄等[5]研究復方煮散與傳統飲片湯劑煎出率的比較等等，雖然他們的研究獲得了一些成果，但總體而言研究仍相對較少，對煮散的疑惑還很多。

目前臨床常用中藥約400余味，究竟哪些中藥適合煮散，哪些中藥仍適合于飲片，甚至還有哪些藥物適用超微粉、服散、免煎顆粒等工藝，尚待進一步研究。就煮散而言，不同類別煮散制備工藝包括粉碎器械、方法、粒徑的選擇；煎煮工藝參數的選擇包括時間、加水量、次數的選擇；如何規范煎煮工藝以及如何建立煮散質量評價方法體系等。

盡管煮散還有很多地方需要不斷完善，但煮散工藝形式的推廣已成為時代的迫切要求，相信不久的將來煮散將為國家衛生醫藥事業做出重要貢獻。仝小林等[6]研究指出，煮散所具有的煎出率高，節省藥材，煎煮時間短，節省能源等優勢應得到不斷發掘，這一研究不僅對祖國醫學的傳承與發展有著重要的意義，也對解決中醫界目前面臨中藥材缺乏的重大問題，有著不可忽視的作用。

本實驗結果顯示，在降血糖方面，西藥組與模型組之間差異有統計學意義（P＜0.05），西藥組優于模型組，飲片組與煮散組差異無統計學意義（P＞0.05），但通過3個月（即0周、4周、8周）血糖的變化情況，煮散組差異具有優于飲片組的趨勢，2/3飲片組與2/ 3煮散組差異有統計學意義（P＜0.05），2/3煮散組優于2/3飲片組，表明在同等條件下煮散工藝優于飲片工藝，煮散能有效節省藥材。

［1］彭智平，劉起華，文謹.基于臨床療效探討傳統中藥服散與煮散的臨床推廣價值［J］.中醫雜志，2014，55（13）：1090-1093.

［2］劉起華，孫玉雯，劉鳳麟，等.淺析《太平惠民和劑局方》中“散”的運用［J］.遼寧中醫雜志，2015，42（2）：369-371.

［3］梁少瑜，曾永長，朱咸陽，等.干燥對煮散顆粒粉體學特性的影響［J］.中國實驗方劑學雜志，2014，20（13）：38-40.

［4］文謹，劉起華，彭智平，等.黃芩煮散與傳統飲片有效成分的煎出效果比較［J］.中國實驗方劑學雜志，2014，20（11）：34-36.

［5］穆蘭澄，牟稽征，何怡，等.復方煮散與傳統飲片湯劑煎出率的比較［J］.遼寧中醫藥大學學報，2012，14（3）：211-212.

［6］仝小林，張家成，穆蘭澄，等.恢復煮散節省藥材［J］.中國新藥雜志，2012，21（5）：470-474.

（收稿：2015-05-20 修回：2015-08-10）

Pharmacodynamics of Yinpian (Tablets)and Powder of Ganjiang Huangqin Huanglian Rensen Decoction in Type 2 Diabetic Mellitus in Rats

PENG Zhiping1,ZHANG Linlin2,LIU Qihua3,TONG Xiaolin3.1Department of Geriatrics,Hangzhou Traditional Chinese Medical Hospital,Hangzhou(310007),China;2 Zhejiang Institute for Food and Drug Control,Hangzhou(310052),China;3Department of Endocrinology,Guang'anmen Yiyuan,China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing(100053),China

Objective To investigate the pharmacodynamics of yinpian（tablets） and powder of Ganjiang Huangqin Huanglian Renshen Decoction in treatment of type 2 diabetics in rats.Methods Type 2 diabetics model was successfully established in 72 SD rats.Model rats were randomly divided into 6 groups:model groups,western medicine group,yinpian group,2/3 yinpian group,powder group,2/3 powder group,with 12 rats in each group.Another 12 rats served as control.Model group and control group were given still water,western group was given DMBG,yinpian group and 2/3 yinpian group were given crude drug 1.8 g/mL and 1.2 g/mL yinpian,respectively, and powder group and 2/3 powder group were given crude drug 1.8 g/mL and 1.2 g/mL,respectively.The treatment course was 12 weeks.The body weight and blood glucose of rats were monitored during the period.Results The body weight of rats in model group was significantly decreased compared with that in control group (P＜0.01);no significant difference was found between drug groups and model group(P＞0.05).At 0,4,and 8 weeks,the level of blood glucose in drug groups did not differ (P＞0.05);at 12 weeks,the level of blood glucose in 2/3 powder group was significantly lower than that of 2/3 yinpian group (14.3±5.2 mmol/L vs 20.6±5.8 mmol/L,P＜0.01)but similar to that of yinpian group (14.9±6.5 mmol/L,P＞0.05).Conclusion Powder of Ganjiang Huangqin Huanglian Renshen Decoction may save 1/3 usage of equivalent volume of yinpian to achieve the same therapeutic effect in treatment of type 2 diabetics.

rats;type 2 diabetics;yinpian（tablet）;powder;ganjiang huangqin huanglian renshen decoction; pharmacodynamic analysis

北京市科技計劃資助項目（No.Z121102001112010）

1杭州市中醫院老年病科（杭州 310007）；2浙江省食品藥品檢驗研究院（杭州 310052）；3中國中醫科學院廣安門醫院內分泌科（北京 100053）

仝小林，Tel：15306582205；E-mail:pengzhiping136826@126.com