組織聲學(xué)結(jié)構(gòu)定量技術(shù)評價恩替卡韋治療早期肝硬化的研究

姚　翀，鄭　慧，王　迪，李曉金，李朝密，萬　穎

組織聲學(xué)結(jié)構(gòu)定量技術(shù)評價恩替卡韋治療早期肝硬化的研究

姚翀，鄭慧，王迪，李曉金，李朝密，萬穎

摘要目的探討組織聲學(xué)結(jié)構(gòu)定量技術(shù)（ASQ）評價恩替卡韋治療早期肝硬化的臨床應(yīng)用價值。方法經(jīng)過肝臟穿刺活檢證實的早期肝硬化患者47例作為實驗組，口服恩替卡韋治療，療程1年；38例健康志愿者作為對照組。采用ASQ檢測對照組、實驗組治療前及治療后的肝臟，得到其X2直方圖及相關(guān)的參數(shù)，包括紅色及藍色曲線的均值、眾數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差及藍紅曲線下面積比值。結(jié)果恩替卡韋治療前，實驗組患者X2直方圖曲線較對照組明顯增寬、粗糙；藍色曲線的高度大幅度增加，曲線下的面積增大；紅藍曲線參數(shù)較對照組明顯增高（P＜0．01）。恩替卡韋治療后，實驗組患者曲線發(fā)生縮窄并趨向銳利和平滑，藍色曲線的高度降低，曲線下的面積減小；紅藍曲線的均值、眾數(shù)及藍紅曲線下面積比值較治療前降低（P＜0．05），但標(biāo)準(zhǔn)差較治療前無顯著變化。結(jié)論恩替卡韋能夠減輕早期肝硬化患者的肝纖維化程度，ASQ技術(shù)對評價恩替卡韋治療早期肝硬化有一定價值。

關(guān)鍵詞組織聲學(xué)結(jié)構(gòu)定量技術(shù)；早期肝硬化；恩替卡韋

肝硬化是許多慢性肝病常見的病理轉(zhuǎn)歸，主要表現(xiàn)為肝細胞外基質(zhì)的持續(xù)性、彌漫性的沉積，最終引起肝組織結(jié)構(gòu)的破壞及功能的障礙［1］。早期診斷及有效治療，部分早期肝硬化患者肝纖維化是可以減輕甚至逆轉(zhuǎn)的。恩替卡韋是一種新型的抗乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）藥物，具有強效與快速抑制HBV DNA復(fù)制的作用，但對于其針對早期肝硬化患者肝纖維化的療效，少有文獻報道。組織聲學(xué)結(jié)構(gòu)定量技術(shù)（acoustic structure quantification，ASQ）基于超聲系統(tǒng)回波原始信號統(tǒng)計學(xué)分析，具有無創(chuàng)、客觀、可重復(fù)性高等優(yōu)點，是近些年發(fā)展起來的超聲成像新技術(shù)，可以對肝實質(zhì)回聲信號進行定量分析。該研究旨在運用此技術(shù)評估恩替卡韋對肝纖維化的治療作用，為臨床提供有意義的參數(shù)指標(biāo)。

1　材料與方法

1．1病例資料

選取于安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院住院并經(jīng)過肝臟穿刺活檢證實的早期肝硬化患者47例為實驗組，男27例，女20例；年齡20～61 （47．0±12．5）歲。依據(jù)《病毒性肝炎防治方案》慢性肝炎纖維化分期標(biāo)準(zhǔn)進行病理學(xué)診斷S4期為早期肝硬化，即肝實質(zhì)廣泛破壞，彌漫性纖維增生，被分隔的肝細胞團呈不同程度的再生及假小葉形成，與肝硬化不同的是其纖維間隔寬大疏松，改建尚不充分。對照組為健康志愿者，共38例，其中男21例，女17例，年齡23～64（45．0±10．7）歲。對照組無肝臟病史和肝病臨床表現(xiàn)，肝功能正常，病毒標(biāo)志物陰性。

1．2儀器

采用Aplio 500彩色多普勒超聲診斷儀（日本東芝公司），內(nèi)置ASQ成像及定量分析軟件，凸陣探頭，頻率為5．0 MHz。

1．3方法

實驗組口服恩替卡韋片0．5 mg，1次／d，療程為1年。采用ASQ檢測對照組、實驗組治療前及治療后肝臟的X2直方圖及ASQ相關(guān)參數(shù)：眾數(shù)、均值、標(biāo)準(zhǔn)差及藍紅曲線下面積比值。受檢者處于左側(cè)臥位或者平臥位，囑其手抱頭拉開肋間隙，從而充分地暴露肝區(qū)。首先使用常規(guī)二維超聲觀察肝臟包膜的光滑度及肝內(nèi)實質(zhì)回聲的均勻度，凍結(jié)并存儲二維圖像；而后啟動ASQ檢測的功能，在受檢者右側(cè)7～8肋間對肝臟進行掃查，選取顯示較大肝實質(zhì)面積的切面用來測量，盡量避開肝內(nèi)血管、膽管和腹腔內(nèi)氣體，囑受檢者屏住呼吸持續(xù)4 s，凍結(jié)存儲并導(dǎo)出圖像。最后應(yīng)用ASQ分析軟件脫機分析圖像：將感興趣區(qū)（region of interest，ROI）置于肝臟包膜下4～6 cm處，取樣框≥2．0 cm×3．0 cm，焦點定于4．0 cm，分析獲得藍色及紅色曲線的X2直方圖及相關(guān)參數(shù)值，即藍色及紅色曲線的均值（ROI內(nèi)所有取樣點X2值的均值）、眾數(shù)（ROI內(nèi)出現(xiàn)次數(shù)最多的X2值）、標(biāo)準(zhǔn)差（ROI內(nèi)取樣點的離散度）及藍紅曲線下的面積比值。同一受檢者選取3處ROI進行定量分析，最終取3次結(jié)果的平均值行統(tǒng)計分析。采用全自動生化儀于治療前后檢測患者血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素含量，采用熒光定量多聚酶鏈?zhǔn)?/p>

2015－06－29接收

1．4統(tǒng)計學(xué)處理

2　結(jié)果

2.1實驗組恩替卡韋治療前與對照組ASQ結(jié)果比較

實驗組患者藍色及紅色的曲線相比對照組的曲線明顯增寬、粗糙；藍色曲線的高度大幅度增加，曲線下的面積增大，藍色曲線峰值明顯向右偏離100 cm2位置，藍色曲線下面積增大。見圖1。紅色和藍色曲線的均數(shù)、眾數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差及藍紅曲線下的面積比值較對照組也明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．01）。見表1。

2.2實驗組恩替卡韋治療后與治療前ASQ結(jié)果比較

實驗組患者藍色及紅色的曲線發(fā)生縮窄，并趨向銳利和平滑，藍色曲線的高度降低，峰值接近100 cm2位置，藍色曲線下的面積減小；藍紅曲線下面積比值較治療前明顯減小（P＜0．01）。藍色和紅色曲線的均值及眾數(shù)均較治療前降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．05）。相比治療前，實驗組患者紅色和藍色曲線的標(biāo)準(zhǔn)差變化較治療前差異無統(tǒng)計學(xué)意義。見表2。

2.3實驗組恩替卡韋治療后與治療前化驗結(jié)果比較

患者接受恩替卡韋治療后，肝功能明顯好轉(zhuǎn)：血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶由（103．29±37．83）U／L降至（20．31 ±12．58）U／L（t＝49．12，P＜0．01）；血清總膽紅素由（47．25±13．61）μmol／L降至（14．45±5．59）μmol／L（t＝21．64，P＜0．01）。病毒復(fù)制得到明顯抑制：HBV DNA含量由（35 645±4 473）copy／ml降至（2 631±535）copy／m l（t＝110．83，P＜0．01）。

表1　對照組與實驗組治療前　ASQ參數(shù)對比（±s）

表1　對照組與實驗組治療前　ASQ參數(shù)對比（±s）

與對照組比較：*P＜0．01

項目　　對照組　　實驗組治療前　t值紅線眾數(shù)　114．2±6．0　121．2±6．2**－5．25紅線均值　116．9±5．9　124．4±5．5**　　－6．05紅線標(biāo)準(zhǔn)差　14．3±1．5　17．4±2．4**　　－3．94藍線眾數(shù)　124．4±7．2　132．4±8．4**　　－5．65藍線均值　129．4±6．5　139．8±7．1**　　－5．97藍線標(biāo)準(zhǔn)差　19．4±5．5　22．9±5．0**　　－4．07藍紅曲線下面積比　0．5±0．2　1．2±0．5**－8．11

表2　實驗組治療后與實驗組治療前ASQ參數(shù)對比（±s）

與治療前比較：*P＜0．05，**P＜0．01

項目　　實驗組治療后　實驗組治療前　t值紅線眾數(shù)　117．2±5．4*121．2±6．2　　－2．56紅線均值　118．2±14．9*　124．4±5．5　　－2．63紅線標(biāo)準(zhǔn)差　16．1±1．8　17．4±2．4　　－1．77藍線眾數(shù)　128．1±6．2*　132．4±8．4　　－2．33藍線均值　132．9±5．9*　139．8±7．1　　－2．51藍線標(biāo)準(zhǔn)差　21．2±3．6　22．9±5．0　　－1．35藍紅曲線下面積比　0．8±0．4**1．2±0．5　　－4．31

3　討論

肝細胞外基質(zhì)的過度增多和異常沉積是導(dǎo)致肝硬化的原因，HBV復(fù)制的持久抑制可減輕肝臟匯管區(qū)及其周圍炎癥，減少細胞外基質(zhì)的增生和沉積［2］。長期持續(xù)抑制HBV DNA復(fù)制，延緩疾病進展是治療早期肝硬化的基本目標(biāo)，恩替卡韋是最新的抗乙肝病毒核苷類藥物之一，作用于HBV DNA復(fù)制的3個不同階段［3］。對于初次接受治療的患者，恩替卡韋治療兩年的HBV DNA陰轉(zhuǎn)率高達90%，只有3%發(fā)生了病毒學(xué)的反彈，可見具有強效低耐藥的抗病毒活性［4］。本研究中患者在接受恩替卡韋治療后，病毒復(fù)制明顯減弱，實驗結(jié)果顯示HBV DNA含量較治療前顯著下降，患者肝功能也得到了明顯的好轉(zhuǎn)，谷丙轉(zhuǎn)氨酶及總膽紅素含量較治療前降低。說明恩替卡韋對早期肝硬化患者具有很強的抗病毒及改善肝功能的作用。

ASQ技術(shù)是近年發(fā)展起來的超聲成像新技術(shù)，可對肝實質(zhì)回聲信號進行定量分析。其運用統(tǒng)計學(xué)的方法分析肝組織原始回聲信號，能夠定量檢測肝纖維化的程度。系統(tǒng)內(nèi)置了正常肝組織即相對均勻組織的回聲信號原始數(shù)據(jù)，對采集到的肝組織感興趣區(qū)的回聲信號進行多次X2檢驗，檢驗其與正常肝組織回聲信號的差異。系統(tǒng)根據(jù)檢測結(jié)果給出紅藍兩色的X2直方圖曲線，橫軸表示X2值，縱軸表示每個X2值出現(xiàn)的次數(shù)。X2值越大，差異性越大，表明肝組織的均勻性越差。Toyoda etal［5］提出運用ASQ技術(shù)評價肝纖維化程度，通過對148例慢性丙肝患者cm2頻數(shù)直方圖的分析，發(fā)現(xiàn)cm2值與肝組織活檢的纖維化等級有較好的相關(guān)性，能反映肝組織的均勻性。對77例慢性乙肝及丙肝患者研究結(jié)果表明ASQ技術(shù)診斷肝纖維化的曲線下面積是0．71，診斷肝硬化的曲線下面積是0．77；ASQ技術(shù)在區(qū)別患者有無纖維化和診斷肝硬化方面有一定價值［6］。

本研究ASQ參數(shù)結(jié)果顯示，實驗組恩替卡韋治療前后紅色及藍色曲線眾數(shù)及均值比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，說明經(jīng)恩替卡韋治療前后肝臟的回聲強度有差別，肝組織回聲信號分布趨向均勻，高回聲信號減少。紅藍曲線參數(shù)中的標(biāo)準(zhǔn)差在治療前后比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，可能是由于各個小的ROI區(qū)域內(nèi)的取樣回聲信號不均勻，同時又包含了過多的高強度隨機樣本，這樣肝臟回聲信號的強度差異就減小了。與以上參數(shù)相比，藍紅曲線下面積比值在治療前后比較中差異有統(tǒng)計學(xué)意義，能更好地分析原始回聲信號粗糙程度的差異。可能因為是一個比值，藍紅曲線下面積比值能減少不同受試對象取樣及呼吸等因素的影響，更加具有客觀性和準(zhǔn)確性。本研究中的同一患者選取不同位置的ROI時，分析的結(jié)果會有很大的差異，可能是由于ASQ技術(shù)容易受到受檢者腸道內(nèi)的氣體、肝內(nèi)血管及膽管的影響，不可避免圈中這些區(qū)域，影響到了最終的數(shù)據(jù)。故在進行ASQ檢測肝臟時，應(yīng)該盡量的避開肝內(nèi)大的血管及膽管，從而增加結(jié)果的準(zhǔn)確性。

參考文獻

［1］Bravo A A，Sheth SG，Chopra S．Liver biopsy［J］．N Engl JMed，2001，344（7）：495－500．

［2］Ratziu V，Charlotte F，Heurtier A，et al．Sampling variability of liver biopsy in nonalcoholic fatty liver disease［J］．Gastroenterology，2005，128（7）：1898－906．

［3］朱宇佳．恩替卡韋對拉米夫定耐藥慢性乙型肝炎患者的治療效果［J］．實用醫(yī)學(xué)雜志，2009，25（11）：1882－3．

［4］Colonno R J，Rose R，Baldick C J，etal．Entecavir resistance is rare in nucleoside naive patients with hepatitis B［J］．Hepatology，2006，44（6）：1656－65．

［5］Toyoda H，Kumada T，Kamiyama N，et al．B-mode ultrasound with algorithm based on statistical analysis of signals：evaluation of liver fibrosis in patients with chronic hepatitis C［J］．AJR Am JRoentgenol，2009，193（4）：1037－43．

［6］Ricci P，Marigliano C，Cantisani V，et al．Ultrasound evaluation of liver fibrosis：preliminary experiencewith acoustic structure quantification（ASQ）software［J］．Radiol Med，2013，118（6）：995－1010．

中圖分類號R 512．6；R 445．1

文獻標(biāo)志碼A

文章編號1000－1492（2015）10－1507－03

基金項目：安徽省高校自然科學(xué)基金重點項目（編號：KJ2013A166）

作者單位：安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院超聲科，合肥230022

作者簡介：姚翀，男，碩士研究生；鄭慧，女，教授，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，責(zé)任作者，E-mail：zhenghuiayfycsk＠163．com反應(yīng)測定血清中HBV DNA含量。

Evaluating the value of entecavir to the early cirrhosis by acoustic structure quantitative technology

Yao Chong，Zheng Hui，Wang Di，et al
（Dept of Medical Ultrasonics，The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University，Hefei230022）

AbstractObjectiveTo evaluate the value of entecavir for the patients with early cirrhosis using acoustic structure quantitative technology．MethodsThirty-eighthealthy volunteers（controlgroup）and forty-seven patientswith histologically proved early cirrhosis（experimental group）were examined by ASQ before the oral treatment of entecavir and one year after．The original ultrasonic echo signal of the liver parenchyma was analyzed．The chi-square histogram and relevant parameters（Red Mode，Red Ave，Red SD，Blue Mode，Blue Ave，Blue SD and BR ratio）were recorded and comparatively analyzed．ResultsBefore the treatment，the red and blue curves of the experimental group patientswere obviously rougher and broader than the control group，careasunder the blue curves of the experimental group were langer too．Statistically significant differences in the parameters were found between the control group and the experimentalgroup（P＜0．01）．After the treatment，the red and blue curves of the experimental group patients tended to be smooth and sharp，and the area under the blue curve became smaller．The Red Mode，Red Ave，Blue Mode，Blue Ave，and BR ratio were smaller（P＜0．05），but not in the Red SD and Blue SD．

ConclusionEntecavir can reduce the degree of fibrosis of the early liver cirrhosis．ASQ technique has a certain value for evaluation of entecavir to treat early liver cirrhosis．

Key wordsacoustic structure quantification technology；early cirrhosis；entecavir