豬O型口蹄疫母源抗體的變化規律及應用

南文金，黃健強，胡鴻惠，吳靜波，龔中貴，彭國良，于文濤

（1.韶關學院 動物疫病實驗室,廣東 韶關512005；2.廣東省粵北生豬生產及疫病防控協同中心,廣東 韶關512005；3.韶關市動物衛生防疫監督所,廣東韶關512026）

豬O型口蹄疫母源抗體的變化規律及應用

南文金1，2，黃健強1，2，胡鴻惠1，2，吳靜波1，2，龔中貴2，3，彭國良2，于文濤1，2

（1.韶關學院 動物疫病實驗室,廣東 韶關512005；2.廣東省粵北生豬生產及疫病防控協同中心,廣東 韶關512005；3.韶關市動物衛生防疫監督所,廣東韶關512026）

摘要：O型口蹄疫是豬場疫病防控的重點之一.對豬群進行科學免疫是豬場防控O型口蹄疫病毒感染的重要途徑,為確定某豬場仔豬O型口蹄疫的首免時間,以該場經O型口蹄疫滅活疫苗免疫的母豬所產的仔豬為研究對象,利用口蹄疫O型正向間接血凝抗體檢測試劑盒對不同日齡段仔豬群母源抗體進行檢測.結果表明,37～44日齡時,仔豬的母源抗體效價合格率為70%；45～51日齡時,仔豬的母源抗體效價迅速下降,合格率僅為40%左右.檢測結果說明該豬場仔豬O型口蹄疫首次免疫最佳時間在45～50日齡比較適宜.

關鍵詞：仔豬；O型口蹄疫；母源抗體

豬口蹄疫（Food-and-Mouth,FMD）是由口蹄疫病毒（Food-and-Mouth Virus,FMDV）引起的偶蹄動物的一種急性高度傳染性疫病,被世界動物衛生組織（OIE）列為必須通報的動物疫病,我國將其列為一類動物傳染病［1］.口蹄疫血清型復雜,目前發現的有7個血清型.根據近幾年相關報道及農業部疫情通報,我國豬口蹄疫流行還以O型為主,偶有A型豬口蹄疫發生［2］.

口蹄疫病毒主要傳染途徑是直接接觸傳播和氣源性傳播.直接接觸帶毒的動物、動物產品、運輸車輛等都可以引起疫情傳播,本病同時也可以發生遠距離氣源性傳播,隨口鼻呼出的氣溶膠病毒可隨風傳播數百公里［3］.豬口蹄疫病毒母源抗體能保護仔豬早期免遭病原感染,但隨著仔豬日齡增加,母源抗體水平會不斷降低,需要及時通過接種疫苗提高抗體水平.首免時間對疫苗免疫成敗有重要影響,若首次免疫時間過早,可能受到母源抗體的干擾導致免疫失敗；若免疫時間過晚,母源抗體水平過低,免疫空白期較長,增加了感染和發病風險［4］.本試驗通過正向間接血凝試驗試驗對某豬場不同日齡仔豬的O型口蹄疫母源抗體水平檢測,通過母源抗體消長規律確定最佳首免時間,為豬場提高O型口蹄疫苗免疫效果提供科學依據.

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1血清來源

試驗豬的血樣采集自粵北某規模化養豬場,該場采用分區飼養,全進全出的飼養模式.

1.1.2實驗器材和試劑

臺式高速離心機（美國THERMO）,微量移液器（芬蘭百德公司生產）；96孔110°V型血凝板；口蹄疫O型間接血凝抗體檢測試劑盒（中國農業科學院蘭州獸醫研究所,批號∶2014120504）.

1.2方法

1.2.1抗體檢測

根據該場生產流程,選擇沒有接種O型口蹄疫滅活疫苗,按生產批次飼養在不同豬舍的出生6～8、15～17、20～23天產房仔豬,出生28～34、37～44、45～51、52～60天保育舍仔豬和出生61～69、70～82天育肥前期豬,每個日齡段隨機選擇20頭仔豬,前腔靜脈采血5 mL左右,實驗室離心制備血清,按口蹄疫O型間接血凝抗體檢測試劑盒操作說明進行母源抗體檢測.另外分別采集了20頭豬出生83～90天,經O型口蹄疫滅活疫苗首次免疫后15天的的生長育肥豬和產前1個月的懷孕母豬血液樣本進行了O型口蹄疫抗體水平檢測.

1.2.2抗體水平判定標準

按試劑盒說明,以呈現“＋＋”血凝反應的血清最高稀釋度作為該血清的間接血凝抗體效價.當陽性對照血清抗體效價≥1∶256、陰性對照血清抗體效價≤1∶16、稀釋液對照孔無自凝現象時,試驗成立.豬口蹄疫O型抗體效價≥1∶128為免疫合格.

2　結果

2.1豬O型口蹄疫抗體效價檢測結果

表1的檢測結果顯示,出生6～8天仔豬O型口蹄疫母源抗體效價合格率為80%；出生15～17、20～22、28～34天的仔豬O型口蹄疫母源抗體效價合格率均為90%；出生37～44日齡段仔豬的O型口蹄疫母源抗體水平開始下降,但合格率仍能達到70%；出生45天之后的仔豬O型口蹄疫母源抗體迅速下降,在采集的出生45～51、52～60、65～69、70～82天的仔豬樣品中,O型口蹄疫母源抗體效價合格率在0%～40%.隨機采集的產前1個月母豬O型口蹄疫抗體效價合格率達到100%,其中19頭母豬抗體效價≥1：256,僅一頭為1：128（文中為列數據）.經O型口蹄疫滅活疫苗首次免疫后15天的的生長育肥豬抗體效價合格率為40%.

表1　不同日齡豬O型口蹄疫抗體效價檢測結果

2.2仔豬O型口蹄疫母源抗體變化規律

未進行豬O型口蹄疫疫苗免疫的仔豬母源抗體效價變化規律（圖1）顯示,該場仔豬O型口蹄疫母源抗體在2周齡左右達到最高水平,高水平母源抗體可以維持到5周齡；采集的出生37～44天仔豬群母源抗體水平開始下降,但抗體效價合格率仍然可以達到70%；出生45～51天,即約7周齡左右的仔豬群仔豬母源抗體下降迅速,抗體效價合理率為40%；7周齡之后仔豬母源抗體水平很低,在分階段采集的3個不同日齡段的豬群中,僅在出生65～69日齡的豬群中檢測到20%的樣品為抗體水平合格.

圖1　豬O型口蹄疫母原抗體消長規律

3　討論

規模養豬是以群體免疫而不是個體免疫的理念進行疫苗免疫,在進行抗體監測時的抽樣要根據豬場具體生產模式、檢測目的設計合理的采樣方案,獲得的檢測數據代表一個群體的免疫狀態.試驗豬場是按“周”為生產周期設計豬欄（舍）數量,嚴格執行全進全出和分區飼養,豬群轉入下一個生產區時也是按同一欄或同一棟（間）豬轉入相應的欄舍飼養,豬的疫苗免疫也是按欄或棟（間）為單位進行免疫,因此,本研究采樣方案設計是按豬場實際生產流程,采集的每一日齡階段樣品即為免疫時間為同一天的同一批豬,所以出生時間有相應的跨度,按此采樣方式檢測的數據代表了該批次豬群整體抗體水平和變化規律,得到的檢測結果更符合規模化豬場生產流程和免疫接種操作方案,對免疫程序的制定有更現實的指導意義.

豬在胎兒時期不能從母體獲得母源抗體,新生仔豬通過吮吸初乳經消化道吸收獲得母源抗體,母源抗體保護初生仔豬免受病原侵襲,提高仔豬抗病力和成活率方面發揮重要作用.本研究O型口蹄疫抗體水平檢測結果表明該場絕大多數母豬O型口蹄疫抗體效價均≥1∶256,這就為仔豬獲得較高水平的母源抗體提供了保障.但根據從表1數據統計可知,在不同日齡階段的哺乳仔豬群體中母源抗體合格率最高為90%,并沒有達到100%抗體合格率.在呂立新等利用液相阻斷ELISA對仔豬O型口蹄疫母源抗體消長規律的研究中,也有部分哺乳期仔豬母源抗體水平較低,不同日齡仔豬母源抗體最高保護率為80%［5］.出現個別哺乳仔豬母源抗體較低或呈陰分析最主要原因可能是出生2小時內沒有吮吸到足夠的初乳.

根據圖1結果可知,隨著仔豬日齡增加,母源抗體效價維持一段時間后開始下降.該場仔豬出生2周左右后母源抗體水平達到最高,且維持在一個較高水平至大約5周齡.在6～7周齡間,豬O型口蹄疫母源抗體的效價開始下降到70%.在約7周齡之后采集的各個階段的樣品母源抗體效價迅速下降,抗體合格率都比較低或全部樣品為陰性,該場O型口蹄疫母源抗體消長規律和呂立新的報道結果相一致［5］,科學的首免日齡應該選擇在45～50日齡進行.余瓊等的報道中［6］,21日齡仔豬O型口蹄疫母源抗體合格率為66.67%,28日齡時有三分之一的仔豬母源抗體水平還能提供保護,35日齡仔豬母源抗體水平保護率僅有6.6%,顯然其監測的豬場仔豬O型口蹄疫母源抗體下降速度比較快,首免日齡應該選擇在25日齡左右.

首免時間合理對豬口蹄疫免疫免疫成敗至關重要,但免疫效果研究表明豬口蹄疫疫苗僅僅一次免疫對豬群的保護率較低,必須進行加強免疫才能使豬群整體抗體水平較高［6-8］.本試驗采集了O型口蹄疫滅活疫苗首免后15天的生長育肥豬血液樣品20份（出生83～90天豬群）,根據該場豬口蹄疫母源抗體消長規律可知此批生長育肥豬進行O型口蹄疫首免時母源抗體效價已經很低,但首免后15天抗體效價合格率僅為40%,.在母源抗體水平極低情況下接種疫苗,首免后15天抗體水平仍然很低,因此在口蹄疫疫苗免疫必須在首免疫后3～4周加強免疫一次.

母源抗體在保護仔豬早期免遭病原感染的同時又通過清除抗原物質、中和弱毒疫苗抗原和對機體免疫系統特異性抗原位點的封閉而對疫苗免疫發揮干擾作用［9］.母源抗體消長規律和母豬群抗體水平以及豬群健康狀態密切相關,針對不同豬場開展的口蹄疫母源抗體消長規律研究得到的結果不盡相同,根據相關報道［5-6,10］,不同豬場O型口蹄疫最佳首免日齡不同,最早的有21日齡首免,最晚的有50日齡進行首免,因此在生產中豬場要根據口蹄疫O型母源抗體水平決定最佳首免疫日齡.

參考文獻：

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［4］項科順,張娟,孫紅祥.豬口蹄疫的疫情現狀及防控措施的最新研究進展［J］.浙江畜牧獸醫,2015,40（2）∶9-12.

［5］呂立新,何孔旺,倪艷秀,等.規模化豬場不同日齡仔豬O型口蹄疫母源抗體規律及免疫試驗［J］.江蘇農業科學,2011,39 （5）∶304-306.

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［9］Zinkernage1R M.Materna1antibodies,chi1dhood infections,and autoimmune diseases［J］.New Eng1and Journa1of Medicine, 2001,345（18）：1331-1335.

［10］楊先富,王開功,李毅,等.仔豬口蹄疫母源抗體消長規律監測［J］.山地農業生物學報,2007,26（1）∶26-29.

（責任編輯∶閆文龍）

中圖分類號：Q95-331

文獻標識碼：A

文章編號：1007-5348（2015）10-0049-07

［收稿日期］2015-06-26

［基金項目］韶關市科技計劃項目（2013CX/N09）.

［作者簡介］南文金（1981-）,男,河南靈寶人,韶關學院動物疫病實驗室助理研究員,碩士；研究方向∶動物疫病檢測技術與防控技術.

The Change Regularlty and APPllcatlon of
Sw lne TyPe-O Foot-and-m outh M aternal Antlbody

NANWen-jin1,2,HUANG Jian-qiang1,2,HU Hong-hui1,2,WU Jing-bo2, GONG Zhong-gui3,PENG Guo-1iang2,YUWen-tao1,2（1.Laboratory of Anima1Disease,Shaoguan University,Shaoguan 512005,Guangdong,China；
2.North Guangdong Co11aborative Innovation and Deve1oPment Center of Pig Farming and Disease Contro1, Shaoguan 512005,Guangdong,China；3.Shaoguan Institute of Anima1Hea1th SuPervision, Shaoguan 512026,Guangdong,China）

Abstract:The tyPe-O Foot-and-mouth（FMD）is one of the imPortant diseaseswhich needed to be contro11ed. Scientific immunization is themain way to contro1and Prevention Pig PoPu1ation infected with the tyPe-O Footand-mouth virus（FMDV）.In order to determine the date of first immunization of FMD vaccine in a Pig farm, some b1ood samP1eswere co11ected from different days-o1d Pig1etswhich born from sows immunization of inactivated tyPe-O FMDV vaccine.The samP1esmaterna1antibody was tested by tyPe-O FMD indirect hemagg1utination antibody detection reagent kit.The resu1ts showed that the Pig1ets between 37 to 44 days,which qua1ified rate ofmaterna1antibody 1eve1sti11can reach 70%,but between 45 to 51 days o1d,thematerna1antibody titer Percent of Pass raPid1y decrease to 40%.There data revea1ed that tyPe-O FMDV vaccine first immune date of Pig1ets between 45 to 50 days o1d can be use in the Pig farm.

Key words∶Pig1et；tyPe-O Foot-and-mouth；materna1antibody