Bcl－2、Bax在胃癌與癌前病變組織中的表達

陳忠其，陸 玲，馮建洪，童亞群

（佛岡縣人民醫院病理科，廣東 佛岡 511600）

胃癌的發病率極高，在我國惡性腫瘤發病比例中排在第一位，其早期臨床癥狀不甚明顯，極少患者出現惡心或者是類似潰瘍性疾病癥狀。在進展期，此病癥最常見的表現即為疼痛以及體重下降［1－2］。患者大多會表現出較為明顯的上消化道病癥，例如上腹部出現不適或者是用餐后易出現腹脹。隨著病情不斷發展，患者腹部疼痛癥狀會日益嚴重，食欲逐漸降低并且出現乏力癥狀，對患者的身心健康造成極大的影響［3－4］。本文通過對 Bcl－2以及 Bax在胃癌與癌前病變組織中的表達情況進行研究，旨在為臨床更加深入地認識胃癌提供一些理論數據支持，報告如下。

1 資料和方法

1.1 臨床資料

選擇2012年2月至2014年2月佛岡縣人民醫院病理科胃黏膜活檢以及手術標本130例作為研究對象，50例為胃癌患者標本（胃癌組）；10例為表現正常的胃黏膜標本（正常組）；50例為表現為慢性萎縮性的胃炎并伴有腸化生癥狀標本（腸化生組）；20例表現為異型增生標本（異型增生組）。將130例實驗所需標本用10%的福爾馬林進行固定，用石蠟將其行包埋處理，并作出4μm的切片。實驗所需抗體分別為兔抗人Bcl－2多克隆抗體以及兔抗人Bax多克隆抗體，試劑盒為免疫組化試劑盒，DAB顯色試劑盒以及TUNEL凋亡試劑盒。均購自于武漢博士德生物有限公司。

1.2 研究方法

使用免疫化學SP方式對Bcl－2以及Bax蛋白質表達情況進行檢測。將準備好的石蠟切片進行脫蠟處理，之后將3%的過氧化氫在室溫下放置10min，將其含有的內源性酶進行滅活。通過微波操作使得抗原得到修復，再向其中加入封閉液在室溫中放置10min。向其中加入一抗以及生物素化的二抗，DAB顯色，使用蘇木精對其進行復染，行脫水以及封片處理。使用TUNEL方式對細胞凋亡情況進行檢測。將石蠟切片給予脫蠟處理，使用蛋白酶K將其消化處理10min，加入封閉液在室溫下放置30min，再加入TUNEL放置1h。DAB顯色以及封色之后，在光學顯微鏡下觀察實驗結果，棕黃色物質為細胞核。在顯微鏡視野中選擇5個高倍視野進行計數，記錄各個觀察視野下每100個細胞中凋亡細胞的數目。細胞凋亡指數AI值＝（凋亡數／總數）×100%。

1.3 觀察指標

胃癌以及癌變前病變組織中的Bcl－2以及Bax蛋白質的表達情況。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 胃癌以及癌變前病變組織中Bcl－2與Bax蛋白質的表達

癌變前的Bcl－2陽性率明顯低于胃癌組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。Bax陽性率明顯高于胃癌組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 胃癌以及癌變前病變組織中Bcl－2與Bax蛋白質的表達

2.2 胃癌以及癌變前Bcl－2蛋白表達情況和細胞凋亡的關系

Bcl－2蛋白在胃癌以及癌變前陽性率明顯低于陰性率，差異具有統計學意義（P＜0.05）。經過分析，Bcl－2蛋白陽性率和細胞凋亡情況呈負相關（r＝－0.786，P＝0.000）。見表2。

表2 胃癌以及癌變前Bcl－2蛋白表達情況和細胞凋亡的關系

表2 胃癌以及癌變前Bcl－2蛋白表達情況和細胞凋亡的關系

組別 n Bcl－2陽性組 Bcl－2陰性組例數 AI例數 AI t P腸化生組50 14 6.34±0.95 36 9.96±1.44 8.672 0.000異型增生組 20 8 4.98±1.02 12 6.85±2.26 2.182 0.043胃癌組50 30 1.08±1.04 20 3.96±2.12 6.397 0.000

2.3 胃癌以及癌變前Bax蛋白表達情況和細胞凋亡的關系

Bax蛋白在胃癌以及癌變前陽性率明顯高于陰性率，差異具有統計學意義（P＜0.05）。經過分析，Bax蛋白陽性率和細胞凋亡情況呈正相關（r＝0.835，P＝0.000）。見表3。

表3 胃癌以及癌變前Bax蛋白表達情況和細胞凋亡的關系

表3 胃癌以及癌變前Bax蛋白表達情況和細胞凋亡的關系

組別 n Bax陽性組 Bax 陰性組例數 AI例數 AI t P腸化生組50 28 10.76±1.18 22 7.17±2.25 7.277 0.000異型增生組 20 4 7.75±1.76 16 3.84±0.71 7.228 0.000胃癌組50 7 4.63±2.17 43 1.52±1.23 5.518 0.000

3 討論

Bcl－2因子作為在細胞發生凋亡過程中具有重要意義的因子，具有對細胞凋亡過程進行抑制的作用。Bax和Bcl－2因子在人體細胞中聯合成為二聚體，Bax過表達能夠對Bcl－2的保護機制產生拮抗作用，進而使細胞發生凋亡，因此，Bax對細胞凋亡具有一定的誘導作用。胃黏膜發生癌變之前，常有較為活躍的細胞增殖以及凋亡現象共同發生的情況，在推進過程中，胃黏膜內是以細胞增生為主要反應，細胞凋亡反應較少［5－6］。這一現象成為胃癌病癥產生的重要基礎。而在胃黏膜由正常轉為癌前病變直至胃癌的過程中，Bcl－2對于細胞的凋亡過程具有負調節功能，Bax與Bcl－2因子使得細胞產生凋亡的作用受到抑制。這兩種因子的含量決定了細胞是否發生凋亡。本文研究結果顯示:癌變前的Bcl－2陽性率明顯低于胃癌組情況。Bax陽性率明顯高于胃癌組。同時，Bcl－2蛋白在胃癌以及癌變前陽性率明顯低于陰性率，經過分析，Bcl－2蛋白陽性率和細胞凋亡情況呈負相關。Bax蛋白在胃癌以及癌變前陽性率明顯高于陰性率，經過分析，Bax蛋白陽性率和細胞凋亡情況呈正相關。這說明Bcl－2蛋白具有對細胞凋亡過程進行抑制的功能，其含量的增加以及Bax蛋白含量的下降可能和胃癌病癥中細胞凋亡過程受到阻礙有關，而胃癌發病機制可能是細胞的正常凋亡過程受到阻礙。另外，Bax蛋白表達的陽性率和細胞凋亡數值有正相關關系，說明Bax蛋白對細胞凋亡的過程有促進功能，胃黏膜的上皮細胞正常的數值比例失調，極大可能是最后只是胃癌病癥產生的分子性基礎。

綜上所述，Bcl－2蛋白具有對細胞凋亡過程進行抑制的功能，Bax蛋白對細胞凋亡的過程有促進功能。兩者含量的比例決定細胞凋亡是否產生，進而決定胃癌的發展程度。這兩者對于胃癌的產生具有重要意義，對于胃癌病癥的預防以及診治價值較高。

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