高效液相色譜分析三類保健食品中常見違禁藥物的方法研究

蔡葦

【摘要】在人們生活水平不斷提升的過程中保健食品受到的關注面越來越大，一方面保健食品確實能夠從一定程度上補充人體所需營養使受眾的健康水平得以提升，另一方面市場上部分商家受到利益驅使而在保健食品中添加相關違禁藥物，這給受眾的健康同時也帶來了威脅。高效液相色譜法是一類常見的化學檢測方法，在樣品檢測中具有較好的效果，本文對高效液相色譜分析三類保健食品中常見違禁藥物的方法進行了分析并提出了相關觀點，供以參考。

【關鍵詞】高效液相色譜；保健食品；違禁藥物

【中圖分類號】TQ460.72 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2015）02-0276-01

0.引言

目前市場上保健食品主要以補益類、減肥類以及控血糖類食品居多，在這些食品中化學成分較為復雜，部分商家為了節約成本以獲取非法利益存在以次充好的情況，而所加入的違禁藥物不僅僅會使藥物質量降低，同時會直接影響到服用者的健康情況，若服用周期較長甚至可能使受眾的生命安全受到威脅，因此需要通過有效的檢出手段對保健食品進行檢測，確保保健食品的質量達到標準[1]。

1高效液相色譜概述

高效液相色譜技術是最為常見的檢測分離技術，細分又涵蓋了吸附色譜、分配色譜離子、交換色譜以及凝膠色譜。該技術具有分離純度高、靈敏度高、高效性等特點，但相對成本也偏高[2]。一般情況下高效液相色譜分離遵循以下流程：先對樣品情況進行大致掌握并確定分離目的，然后對樣品進行預處理及特殊處理再篩選合適的檢測儀器并對檢測參數進行調控[3]，對色譜進行有效篩選并進行預實驗同時評估最佳分離條件，優化分離條件，對分離過程中出現的問題進行分析并進行定量校正。

2相關實驗分析

以補益類藥品為例進行具體實驗分析，如下所示：

2.1實驗儀器及試劑

西力士標準品，伐地那非標準品、新陽堿、還陽堿、甲醇、乙醇、磷酸、蒸餾水等；高效液相色譜儀、檢測器、超聲波清洗器、去離子水制備系統、相關工作站等。

2.2實驗步驟

對他達那非、伐地那非等對照品進行準確稱量，質量為0.0500g。將所取5份樣品分別置于50ml量瓶中，向瓶中置入甲醇（40ml）溶解，溶解時間為5min，冷卻后進行稀釋，獲取濃度為1mg/ml的對照品液，于4℃條件下進行保存。之后配置標準液，用甲醇液對對照品進行稀釋，得到梯度濃度溶液（4.0ug/ml，10.0ug/ml，20.0ug/ml，40.0ug/ml，100.0ug/ml，200.0ug/ml）作為工作液。

色譜柱規格為250mm*4.6mm，5um，柱溫設定為30℃，樣品溫度為室溫，每次進樣20ul，色譜柱流速為1.0ml/min。流動相取乙腈：磷酸緩沖液（0.02%）=1：3。

取相關膠囊內容物研磨充分，精確稱取0.10g，將其置于50ml容量瓶中，添加甲醇進行溶解，利用超聲波提取，冷卻，繼續加甲醇定容，利用微孔濾膜過濾作為固體樣品溶液。在上述色譜條件下對他達那非、伐地那非、新陽堿、還陽堿等樣品及標準品提取液進行測定。

2.3討論

經過光譜分析發現甲磺酸西地那非與新陽堿在波長為225nm處存在最大吸收，他達那非在波長為199nm出存在最大吸收，伐地那非在波長為215nm條件下存在最大吸收，還陽堿在波長為280nm下存在最大吸收。由于在225nm處還陽堿吸收能力較強，可選225nm作為檢測波長對上述樣品進行實際分析。在色譜柱篩選方面通過橫向比較發現不同流動相以及不同色譜柱條件下樣品出峰順序、保留時間以及峰形包括響應值等都存在較大差異，經綜合研判發現安捷倫C18柱效果最優，柱規格為250mm*4.6mm，5um。流動相方面選取乙腈：磷酸緩沖液（0.02%）摒棄了緩沖液調節pH操作，并且不會受到揮發性影響。柱溫30℃可保證樣品波峰清晰分離，不會出現重疊情況并延長了波峰保留時間。流速方面采取1.0ml/min進行過柱操作，可保證波峰清晰分離，具有較為理想的分離度。經過線性回歸處理得到上述化合物的線性回歸方程分別為：

伐地那非（A=6.38*10^4C-11.4*10^4，r2=0.9991，線性范圍為4.0-200.0ug/ml）；

還陽堿（A=3.57*10^4C-7.56*10^4，r2=0.9994，線性范圍為4.0-200.0ug/ml）；

甲磺酸西地那非（A=6.56*10^4C-8.97*10^4，r2=0.9993，線性范圍為4.0-200.0ug/ml）；

新陽堿（A=5.99*10^4C-1.51*10^4，r2=0.9997，線性范圍為4.0-200.0ug/ml）；

他達那非（A=10.4*10^4C+2.85*10^4，r2=0.9995，線性范圍為4.0-200.0ug/ml）。

通過上述處理可使得相關檢測物質達到基線分離目的，同時對色譜條件進行優化，控制柱溫與pH來獲取理想分離效果，在分離過程中通過對樣品液進行適當稀釋可更好的對樣品進行定性與定量測定，在PDA檢測器基礎上可提升容錯率，特別是對復雜樣品測定提供了有力的支持。

3結語

HPLC（High Performance Liquid Chromatography）高效液相色譜法在保健食品檢測過程中承載了十分重要的作用，利用該方法可準確捕捉到保健食品中的違禁藥物含量，為食品安全提供了重要保障

參考文獻

[1] 嚴愛花，李賢良. 液相色譜-串級質譜法同時檢測中成藥及保健食品中非法添加的22種苯二氮卓類藥物[J]. 分析化學. 2013（04）

[2] 葛寶坤，張群謙，趙孔祥. 高效液相色譜法同時測定減肥類保健食品中鹽酸西布曲明和酚酞[J]. 藥物分析雜志. 2012（11）

[3] 朱小紅，馬鵬飛，徐翔. 氣相色譜-質譜聯用定性檢測保健食品和中成藥中非法添加的鎮靜催眠類藥物[J]. 中國藥業. 2012（19）