血細胞分析儀測定不同放置時間的預稀標本結果觀察

蔣素珍 唐令學

（廣西桂林市靈川縣計劃生育服務站（婦幼保健院）檢驗科，廣西 桂林 541299）

血細胞分析儀測定不同放置時間的預稀標本結果觀察

蔣素珍 唐令學

（廣西桂林市靈川縣計劃生育服務站（婦幼保健院）檢驗科，廣西 桂林 541299）

目的 探討標本預稀釋后放置不同時間測定結果的變化情況，以利于實驗室的質量控制。方法 抽取靜脈血2 mL以EDTA-K2抗凝，充分混勻后吸取20 μL全血至180 μL的稀釋管中，每份標本制備7份稀釋標本，置室溫18～22 ℃，分別于3、10、20、30、60、120、180 min混勻后測定，每份預稀標本測定兩次，取其平均值，各組均值與3 min均值比較，并進行兩樣本均數的配對t檢驗。結果 WBC、RBC、HGB、MCH、PLT、RDW-CV測定值受放置時間影響不大（P＞0.05），而MCV及單核細胞隨放置時間延長逐漸下降，MCHC隨放置時間延長逐漸升高，在放置30 min時MCV、MCHC已有統計學意義（P＜0.05）；在放置60 min時，MCV、MCHC及單核細胞已有特別顯著變化（P＜0.01），其他參數如HCT、RDW-SD、MPV、PCT隨放置時間延長出現不同程度的變化。結論 預稀標本應在20 min內測定，如超過20 min后測定，只有WBC、RBC、HGB、MCH、PLT、RDW-CV可報告臨床，其他參數，特別是MCV、MCHC及白細胞分類不可發報告。

血細胞分析儀；放置時間；預稀標本

血細胞分析儀已廣泛應用于臨床，其檢驗結果對疾病的診斷或鑒別診斷具有一定的臨床參考價值，故檢測值的準確性對臨床疾病的診斷至關重要，現就血細胞分析儀測定不同放置時間的預稀標本結果報道如下。

1　材料與方法

1.1對象：健康人20例，均經體檢確認合格者，年齡20～38歲，男9例，女11例。

1.2儀器：深圳邁瑞BC-5380全自動血液細胞分析儀及配套試劑，一次性真空采血試管，機配離心管，一次性微量吸管。

1.3方法

1.3.1首先以儀器原配質控液檢驗儀器性能，各項指標重復性好，測定結果穩定可靠。

1.3.2抽取靜脈血2 mL以EDTA-K2抗凝，充分混勻后吸取20 μL全血至180 μL的稀釋管中，立即混勻，每份標本制備7份稀釋標本，置室溫18～22 ℃，分別于3、10、20、30、60、120、180 min混勻后測定，每份預稀標本測定兩次，取其平均值，各組均值與3 min均值比較，并進行兩樣本均數的配對t檢驗。

2　結果與討論

2.1結果見表1。預稀標本WBC、RBC、HGB、MCH、RDW-CV、PLT測定值受放置時間的影響不大（P＞0.05），而MCV及單核細胞隨放置時間延長逐漸下降，MCHC隨放置時間延長逐漸升高，在放置30 min時MCV、MCHC已有統計學意義（P＜0.05）；在放置60 min時，MCV、MCHC及單核細胞已有特別顯著變化（P＜0.01），其他參數如HCT、RDW-SD、MPV、PCT隨放置時間延長出現不同程度的變化，這可能是由于稀釋液略為高滲，細胞處在略高滲環境中逐漸發生皺縮，根據本機的工作原理：采用庫爾特原理檢測白細胞/嗜堿性粒細胞、紅細胞和血小板的數目以及體積分布；采用比色法測量血紅蛋白濃度；采用半導體激光流式細胞技術獲得白細胞的四分類統計計數；在此基礎之上，分析儀計算出其余參數的結果。雖然激光流式細胞技術是當細胞（或顆粒）通過激光束被照射時，因其本身的特性（如體積、染色程度、細胞內容物大小及含量、細胞核密度等），可阻擋或改變激光束的方向，產生與其特征相應的各種角度的散射光而達到分類的，但單核細胞胞質豐富，脫水皺縮后與大淋巴細胞相似，儀器誤把部分單核細胞歸為淋巴細胞是極有可能的，從表1中也可看出，淋巴細胞隨放置時間延長逐漸增多，只是無統計學意義（P＞0.05）。

表1　20例預稀標本不同放置時間（min）的測定值（）

表1　20例預稀標本不同放置時間（min）的測定值（）

注：*與對照組（3 min）比較P＜0.05，**P＜0.01

項目　3　10　20　30　60　120　180 WBC（×109）　6.71±1.84　6.83±1.89　7.19±2.02　6.74±1.96　6.74± 1.78　6.84± 1.87　6.74± 1.84 Neu（%）　60.31±6.36　60.28±5.97　60.31±6.61　59.60±6.36　61.08±6.34　61.07±6.16　61.13±6.77 Lym（%）　30.59±6.07　30.85±6.09　31.19±6.20　31.88±6.30　31.90±6.15　31.92±6.26　31.93±6.22 Mon（%）　5.80±1.87　5.49±2.03　5.13±2.01　4.99±2.08　3.79±2.15**　3.55± 2.18**　3.54 ±2.61** Eos（%）　2.80±1.23　2.91±1.30　2.85±1.56　3.05±1.36　2.76± 1.42　3.02± 1.28　2.88± 1.34 Bas（%）　0.48±0.16　0.48±0.22　0.53±0.20　0.48±0.19　0.45± 0.18　0.49± 0.25　0.53± 0.22 RBC（×1012）　4.67±0.33　4.69±0.32　4.63±0.32　4.65±0.33　4.54± 0.42　4.61± 0.40　4.58± 0.35 HGB（g/L）　145.85±12.42　147.00±12.33　145.90±11.47　144.7±11.9　142..00±14.92　144.10±14.93　143.00±13.23 MCV（fL）　88.63±3.2　87.34±3.12　86.49±2.89　86.1±2.44*　85.70±2.76**　84.88±2.76**　84.65±2.75** HCT（%）　41.18±3.10　41.05±2.88　40.38±2.62　40.07±2.99　38.88±3.86*　38.83±3.44*　38.75±2.94* MCH（pg）　31.20±1.25　31.29±1.20　31.50±1.19　31.12±1.09　31.29±1.40　31.25±1.30　31.22±1.33 MCHC（g/L）　354.10±10.54　357.90±10.31　359.30±10.86　361.00±9.48*　365.05±12.42**　368.05±11.22**　368.15±10.35** RDW-CV　12.07±0.41　11.99±0.42　12.03±0.45　12.03±0.37　12.03±0.41　12.00±0.43　12.05 ±0.4 RDW-SD　47.16±2.23　46.35±2.3　46.48±2.47　45.99±2.36　45.64±2.27*　45.16±2.20**　45.21±2.13** PLT（×109）　225.85±52.94　237.45±41.66　214.90±45.58　238.56±45.79　231.80±44.84　227.45±41.12　229.35±40.50 MPV（fl）　9.16±0.84　9.17±0.99　9.10±0.95　8.81±0.88　8.60±0.91*　8.32±0.95**　8.16±0.93** PDW　15.98±0.23　16.09±0.24　16.11±0.24　16.12±0.25　16.11±0.29　16.12±0.32　16.18±0.32* PCT（%）　0.21±0.04　0.22±0.04　0.21±0.04　0.21±0.04　0.20± 0.04　0.19±0.03*　0.19±0.03*

2.2預釋標本制備后靜置3 min而不立即測定，是因為末梢血采集后血小板容易聚集，如果立即測定，血細胞分析儀會把聚集的血小板誤認為白細胞而使血小板計數結果偏低、白細胞計數結果偏高，靜置3 min后，聚集的血小板就會散開。

2.3有報道：預稀標本超過20 min后測定，測定結果只有RBC、WBC和HGB幾項參數可報告臨床，而其他參數，尤其是白細胞分類和血小板計數結果不可發報告［1］；預稀標本2 min后至4 h內所測結果無明顯變化［2］；預稀后WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、PLT和RDW的結果可穩定于6 h內［3］；預稀末梢血后應立即測定，放置時間不應超過90 min，超過90 min之后的測定結果不可報告臨床，特別是WBC分類和PLT計數的值［4］。出現這種差異可能是由于不同廠家的儀器性能及試劑的成分和濃度有所不同而引起的，因此，各實驗室要對不同廠家不同型號的血細胞分析儀進行預稀標本放置時間的設定，建立相應的參考區間，這樣才能保證實驗結果的準確性。

2.4盡管專家已不斷呼吁在血細胞分析中應使用靜脈抗凝血標本全血模式測定，但在實際工作中仍有部分醫院在使用末梢血標本，特別是兒科，許多情況下是先準備好稀釋液去病房或門診采集末梢血，經過一段時間后才拿回實驗室進行測定，因此對某些測定結果產生了影響，出現一定的偏差，由此就會影響臨床醫師對某些疾病的診斷或者鑒別診斷，故筆者認為使用血細胞分析儀時盡量采用靜脈抗凝血全血模式測定（筆者已實驗證實本儀器對靜脈抗凝血標本全血模式測定至少在8 h內結果都穩定可靠），也有報道血細胞計數標本在常溫下24 h內檢測結果可靠［5］，如采用末梢血測定時，BC-5380全自動血液細胞分析儀測定稀釋標本放置時間不應超過20 min，如超過20 min后測定，只有WBC、RBC、HGB、MCH、PLT可報告臨床，其他參數，特別是MCV、MCHC及白細胞分類不可發報告。

［1］呂斌斌.預稀標本放置時間對血細胞分析儀測定結果的影響［J］.臨床檢驗雜志，1997，15（1）：32-33.

［2］張秀梅.時間放置對預稀法測定血常規結果的影響［J］.江西醫學檢驗，2004，22（6）：567-571.

［3］李丙成，趙晉寧，劉吉杰，等.時間和溫度對F-820血細胞分析儀檢測值的影響觀察［J］.臨床檢驗雜志，1996，14（6）：320.

［4］趙元青.預稀釋末梢血標本放置時間對血細胞分析儀測定結果的影響［J］.青海醫藥雜志，2001，31（12）：49-50.

［5］李清澤.血常規標本存放條件對血細胞計數的影響［J］.檢驗醫學與臨床，2011，8（18）：2179-2182.

R446.1

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1671-8194（2015）27-0165-02