大豆磷脂對腦梗死患者炎性因子水平、調(diào)控因子活性和血液流變學(xué)的影響

趙　磊　李春霞　牟　麗　(濰坊市益都中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)二科，山東　濰坊　262500)

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大豆磷脂對腦梗死患者炎性因子水平、調(diào)控因子活性和血液流變學(xué)的影響

趙磊李春霞牟麗(濰坊市益都中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)二科，山東濰坊262500)

〔摘要〕目的探討大豆磷脂對腦梗死患者炎性因子水平、調(diào)控因子活性和血液流變學(xué)影響。方法選取該院神經(jīng)內(nèi)科收治的腦梗死患者60例，隨機分為兩組，其中對照組30例，予常規(guī)尤瑞克林0. 15 PNA靜滴，1次/d，應(yīng)用2 w，治療組30例，予大豆磷脂散15 g口服，1次/d沖服，4 w為1個療程，治療1個療程。正常組30例，選取健康成年人，不予任何治療手段。治療結(jié)束后，對比兩組患者調(diào)控因子核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB、腫瘤壞死因子(TNF)-α、紅細胞黏附促進因子(RFER)、炎性因子高敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、白細胞介素(IL)-6、IL-8及血液流變學(xué)水平變化情況，并通過PCR逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測各組調(diào)控因子TNF-α及炎性因子hs-CRP基因表達水平。結(jié)果試驗后，治療組和對照組患者調(diào)控及炎性因子水平均不同程度降低，且治療組NF-κB、TNF-α、hs-CRP、IL-6水平較對照組明顯降低(P＜0. 05);兩組患者血流動力學(xué)水平均不同程度改善，治療組全血低切黏度、全血高切黏度、血漿黏稠度、纖維蛋白原較對照組明顯改善(P＜0. 05);兩組炎性及調(diào)控因子蛋白基因電泳結(jié)果均不同程度表達，治療組PCR、hs-CRP、TNF-α較對照組明顯改善。結(jié)論大豆磷脂能夠明顯改善患者機體血液流變學(xué)水平，降低纖維蛋白原含量，改善腦血流量供血，并降低炎性因子及調(diào)控因子對腦組織缺血缺氧造成的水腫于炎性病變，從根本改善腦梗死患者病灶血流灌注，減輕腦組織損傷，值得臨床推廣。

〔關(guān)鍵詞〕大豆磷脂;腦梗死;炎性因子;調(diào)控因子;血液流變學(xué)

目前臨床上治療腦梗死主要依靠抗血小板聚集聯(lián)合溶栓治療改善腦供血，但溶栓治療出血傾向極大，且臨床療效并不理想。臨床研究發(fā)現(xiàn)大豆磷脂能夠有效抑制血小板在血管內(nèi)皮的聚集，并改善血流動力學(xué)水平、降低血黏稠度，降低機體炎性因子水平，改善調(diào)控因子活性，從而提高梗死病灶血液灌溉。本文旨在探究大豆磷脂對腦梗死患者的臨床療效。

1　資料與方法

1. 1一般資料選取2013年1月至2014年6月于我院以腦梗死為診斷收入院患者60例，采用隨機數(shù)字表分為治療組和對照組。治療組30例，其中男14例，女16例，平均年齡(53. 6±8. 5)歲;對照組30例，其中男15例，女15例，平均年齡(54. 1±7. 3)歲。兩組患者的一般資料無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0. 05)。

1. 2納入標準符合《1995年全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會議診斷標準》〔1〕的腦梗死患者，起病突然，多數(shù)無前驅(qū)癥狀;短時間內(nèi)可出現(xiàn)嚴重對側(cè)偏癱、偏側(cè)感覺麻木、偏盲、失語等;可有意識清晰或短暫性意識障礙，不同程度的眼球運動麻痹、共濟失調(diào)、交叉癱、四肢運動功能障礙、吞咽障礙等腦動脈閉塞導(dǎo)致的局灶性神經(jīng)功能障礙;腦CT及磁共振成像(MRI)檢查患者發(fā)病在72 h以內(nèi)，并有偏癱肢體運動障礙;影像可見梗死病灶的位置、范圍及周圍腦水腫情況和腦出血征象等。患者自愿參與本實驗，并簽署知情同意書。方案獲得我院倫理委員會批準并全過程跟蹤。

1. 3排除標準肝、膽嚴重疾病;嚴重的血小板減少癥、凝血機能異常、冠心病、嚴重肝腎功能不全的肝膽疾病患者;惡性腫瘤、白血病等;腦炎、腦出血;神志異常等患者。

1. 4治療方法對照組參照臨床用藥指南，予常規(guī)注射用尤瑞克林(廣東天普生化醫(yī)藥股份有限公司，國藥準字H20052065，商品名凱力康，0. 15 PNA單位/瓶)0. 15 PNA靜滴，1次/d，應(yīng)用2 w，治療組予大豆磷脂散(上海金伴藥業(yè)有限公司，國藥準字H19999594，7 g/袋)15 g口服，1次/d沖服，4 w 為1個療程，治療1個療程。正常組30例，選取健康成年人，不予任何治療手段。治療結(jié)束后，對比兩組患者調(diào)控因子核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB、腫瘤壞死因子(TNF)-α、紅細胞黏附促進因子(RFER)、炎性因子高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、白細胞介素(IL)-6、IL-8及血液流變學(xué)水平變化情況，并通過PCR逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測各組調(diào)控因子TNF-α及炎性因子hs-CRP基因表達水平。

1. 5試驗試劑CRP、血流動力學(xué)化驗、IL化驗試劑(批號EIA05849河北博海生物工程有限公司分裝，美國R＆D Systems公司生產(chǎn))。0. 01 mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS)，四甲基聯(lián)苯胺(TMB)顯色液，TMB、1型前膠原羧基端肽(PICP)、Ⅰ型膠原C端肽(ICTP)、P16終止液及免疫組化試劑盒(武漢博士德生物有限公司);染色試劑盒(美國貝克曼-庫爾特公司); RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)試劑(北京中杉生物公司); PCR引物(上海生工); HIMAS-1000病理圖文分析系統(tǒng)(美國Media Cybernetics公司)，雙螺旋CT儀(飛利浦醫(yī)學(xué)影像學(xué)公司)。

1. 6觀察指標及檢測方法試驗結(jié)束后，采取各組患者血5 ml，通過臨床血液檢測化驗系統(tǒng)，檢測機體NF-κB、TNF-α、hs-CRP、IL-6水平;通過臨床血液檢測化驗系統(tǒng)，檢測機體血流動力學(xué)水平，測量全血低切黏度、全血高切黏度、血漿黏稠度、纖維蛋白原水平，采用PCR方法檢測各組中調(diào)控因子TNF-α及炎性因子hs-CRP蛋白基因表達情況。PCR試驗檢測所用比對引物序列為，hs-CRP:正義-GTCTTGGGTTGCTGGTGTCG;反義-CTTGGGTCTGGGTTGCTGTCGGCCTT; TNF-α:正義-CCCATCATGTCTTCGGTAGCAAG;反義-GTTCAGTCTTCGGTGCATCTAG。并應(yīng)用甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)管家基因作為內(nèi)參，驗證燈亮可證明各因子蛋白基因段參與PCR反應(yīng)，GAPDH管家基因引物序列為:正義-ACCACGTCTTCGGCGGGTTGCTGGCAC，反義-TCCACGTCTTCGGGTTGCTGTA。取各組患者靜脈血3 ml，離心機5 000 r/min離心15 min，提取血清。加入PICP免疫組化劑，通過冰浴方法對勻漿凍融3次，5 000 r/min離心30 min，取上清液，放置于離心管中以15 000 r/min二次離心2 h，沉淀物通過50 μl ICTP、P16試劑，進行懸浮試驗，100℃沸水浴10 min，最后1 000 r/min離心5 min，取上清液3 μl放入PCR儀器中檢測調(diào)控因子TNF-α及炎性因子hs-CRP蛋白基因表達情況，做凝膠電泳及攝影分析。用HIMAS-1000病理圖文分析系統(tǒng)對PCR電泳結(jié)果進行光密度掃描，測得hs-CRP及TNF-α條帶與GAPDH條帶的峰面積積分。記錄并對比結(jié)果。

1. 7統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS19. 0軟件進行t檢驗。

2　結(jié)果

2. 1調(diào)控因子及炎性因子水平比較試驗后各組機體調(diào)控因子及炎性因子水平均不同程度變化，與對照組比較，治療組NF-κB、TNF-α、hs-CRP、IL-6水平明顯改善(P＜0. 05)。見表1。

表1　三組NF-κB、TNF-α、hs-CRP、IL-6水平比較(x ±s，n=30)

2. 2血流動力學(xué)水平比較試驗后各組患者血流動力學(xué)均不同程度改善，與對照組比較，治療組全血低切黏度、全血高切黏度、血漿黏稠度、纖維蛋白原水平明顯降低(P＜0. 05)。見表2。

表2　血流動力學(xué)水平比較(x ±s，n=30)

2. 3各組TNF-α、hs-CRP基因表達情況及PCR試驗擴增結(jié)果

實驗結(jié)束后，各組均有不同程度的TNF-α、hs-CRP基因表達，治療組表達水平〔(0. 16±0. 07)ng/L，(0. 14±0. 09)mg/L〕明顯低于對照組〔(0. 69±0. 19)ng/L，(0. 53±0. 04)mg/L〕(P＜0. 05)。正常組hs-CRP、TNF-α含量分別為(0. 07±0. 06)ng/L、(0. 09±0. 01)ng/L。

3　討論

心腦血管疾病中腦梗死是一種臨床常見且高發(fā)的疾病，其較高的致殘率及致死率與患者血液流變學(xué)水平及體內(nèi)炎性因子、調(diào)控因子密切相關(guān)〔2，3〕。經(jīng)統(tǒng)計，中老年腦梗死患者中85. 23%均有不同程度的高血壓、糖尿病、冠心病等，其導(dǎo)致血小板在血管內(nèi)皮粥樣斑塊處凝聚力增強，極大提高了血栓形成概率〔4～6〕。全世界因腦梗死致殘患者約占35. 71%，其致死率更高達21. 33%。因繼發(fā)高血脂、高血壓等疾病的腦梗死患者，其腦血管內(nèi)皮斑塊形成概率可增高26. 21%，并且其脫落率可提高11. 91%，嚴重危害了患者生命安全〔7〕。因腦組織中的神經(jīng)元細胞均為高度分化細胞，其自我修復(fù)能力極低，在梗死病灶形成后，短時間內(nèi)可造成腦組織局部病灶的大面積缺血性壞死表現(xiàn)，且溶栓后再灌注有效率平均只有62. 11%，臨床療效往往不理想〔6〕。經(jīng)過大量臨床研究表明，大豆磷脂中復(fù)合氨基酸可明顯改善局部組織缺血壞死而產(chǎn)生的炎性因子水平，從而降低腦水腫程度。腦組織病灶梗死可激活機體調(diào)控基因，使其大量表達，抑制了局部再灌注修復(fù)的有效率〔8〕。大豆磷脂可調(diào)節(jié)機體血小板的聚集水平，從而改善血液流變學(xué)，降低纖維蛋白原在體內(nèi)的含量，為后續(xù)溶栓治療提供良好基礎(chǔ)。

本實驗提示大豆磷脂可有效降低炎性因子如CRP等水平，改善腦組織因缺血缺氧造成的水腫狀態(tài)，抑制機體中腫瘤因子等調(diào)控因子的表達，從而抑制多種損傷因子對缺血腦組織造成的損害，提高溶栓后恢復(fù)率。大豆磷脂中氨基酸及含磷有機物可明顯降低機體纖維蛋白原水平，從而降低血小板及斑塊在腦血管內(nèi)皮凝聚能力，并減輕斑塊及栓子的脫落水平，通過提高血管內(nèi)血流速，來維持局部腦組織血液灌溉，減輕腦組織的損傷情況。

4參考文獻

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〔2014-12-25修回〕

(編輯滕欣航)

〔文章編號〕1005-9202(2015)20-5776-03;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 043

〔文獻標識碼〕A

〔中圖分類號〕R742

第一作者:趙磊(1982-)，男，住院醫(yī)師，主要從事神經(jīng)內(nèi)科疾病研究。