HPV分型檢測在CIN患者LEEP術后隨訪的臨床研究

摘要：目的 檢測宮頸上皮內瘤變患者Ⅰ-Ⅲ（CINⅠ-Ⅲ）高頻電刀錐切術（LEEP）治療后高危型乳頭瘤病毒（HPV）及其亞型清除的情況，評價手術療效及其隨訪價值。方法 200例因CINⅠ-Ⅲ接受LEEP手術治療的患者，隨機分為三組，術前HPVDNA檢測證實高危型HPV感染。治療后6個月再次檢測HPVDNA，如為高危型HPV持續感染再次行活檢病理學檢查。比較各組HPV及其亞型術后清除率。結果 各年齡組LEEP治療后HPV清除率分別為93.7%、71.4%、64.2%，各年齡組兩兩比較有統計學意義（P<0.05）；隨CIN級別增加，術后HPV清除率下降，不同級別間HPV清除率分別具有顯著性（P<0.05）；HPV16、18亞型清除率各年齡組比較有統計學意義（P<0.05），其它亞型清除率各年齡組比較無統計學意義（P>0.05）；隨CIN級別增加，術后HPV16、18亞型清除率下降，其它亞型清除率下降， 不同級別間各亞型清除率比較無統計學意義（P>0.05）。結論 LEEP可在切除病變的同時清除HPV，是一種簡單安全的手術；術后6個月HPV分型檢測是一種較好的隨訪方法；對年齡較大，病變程度高，尤其是術后HPV16、18亞型持續感染人群應密切加強隨訪。

關鍵詞：宮頸上皮內瘤變；人乳頭瘤病毒；高頻電刀錐切術

中圖分類號：R711.74 文獻標識碼： A

Detection of HPV Types in CIN LEEP Postoperative Follow-up of Patients with Clinical Studies

HU Yan-mei

（Panzhihua Maternal and Child Health Hospital， Panzhihua 617071，Sichuan，China）

Abstract：Objective Detection in patients with cervical intraepithelial neoplasia Ⅰ - Ⅲ （CIN Ⅰ - Ⅲ） high frequency electric knife cut method （LEEP） after treatment of high-risk type cone papilloma virus （HPV） and its subtypes removal， evaluating the effect of surgery and follow-up value. Methods 200 cases for CIN Ⅰ-ⅢLEEP surgery treatment of the patients， randomly divided into 3 groups， preoperative HPVDNA tests identified high-risk type HPV infection. 6 months after treatment HPVDNA again detection， such as high risk type HPV persistent infection， biopsy pathology examination again. Comparison between groups of HPV and its subtypes postoperative clearance. Results HPV clearance after LEEP treatment among all age groups are 93.7%， 71.4% and 93.7% respectively， two comparison among all age groups was statistically significant （P<0.05）； With the increase of level of CIN， HPV clearance decreased postoperatively， HPV clearance between different levels， respectively is significant （P<0.05）； HPV16， 18 subtype clearance comparison among all age groups was statistically significant （P < 0.05）， other subtypes clearance comparison among all age groups had no statistical significance （P>0.05）； With the increase of level of CIN， HPV16， 18 subtype clearance decreased postoperatively， other subtypes clearance decreased，each subtype of clearance between different levels is no statistical significance （P>0.05）. Conclusion ①LEEP in the diseased clear HPV at the same time， is a kind of simple and safe operation；②after 6 months of HPV types detection method is a kind of good follow-up；③To older， high degree of pathological changes， especially postoperative HPV16， 18 subtype infected people should strengthen follow-up closely。

Key words： Cervical intraepithelial neoplasia；Human papilloma virus；High frequency electricity knife cone cut method

宮頸上皮內瘤變（cervical intraepthelial neoplasia CIN）是與宮頸浸潤癌密切相關的一組癌前病變。宮頸高頻電刀錐切（loop electrosurgical excision procedure LEEP）是目前治療CIN的主要有效手段。研究表明[1]，消融或切除治療CIN失敗的比率在1%～25%，且大多數失敗發生在治療2年后。因此，治療后隨訪是必需的。

治療后隨訪中應用HPV-DNA檢測的系統性綜述表明，其性能優于細胞學隨訪方法[2]。本文對200例CINⅠ-Ⅲ患者術后隨訪，通過比較術前及術后6月HPV及其亞型清除率改變，從而為HPVDNA分型檢測在 CINⅠ-Ⅲ LEEP治療后的隨訪提供進一步的依據。

1資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年11月～2013年12月在我院診斷為CINⅠ-Ⅲ 并實施LEEP術的患者200例，隨機按年齡分為三組。每組分別為 63例、70例、67例。納入標準：術前行HPV檢測高危型HPV陽性，陰道鏡活檢病理檢查證實為CINⅠ-Ⅲ，無腺體累及、頸管搔刮結果陰性的已婚婦女。排除標準：妊娠期、哺乳期婦女。

1.2 方法

1.2.1 HPV標本采集 每位患者使用HPV專用刷完全插入宮頸口同一方向旋轉3～5w，將采集的樣本刷頭放入保存液試管小瓶內蓋緊瓶蓋。經專利Invader酶切信號放大法可以檢測出14種高危型HPV病毒（51、56、66、18、39、45、59、68、16、31、33、35、52、58）。

1.2.2 LEEP手術 將陰道鏡下病檢結果為CINⅠ-Ⅲ的患者在簽署知情同意書的情況下行LEEP手術治療。手術時間均在月經干凈后3～7d進行。手術器械：德國WALLACH高頻電刀。操作方法：根據宮頸大小及病變范圍選用不同型號環形電刀。切割功率為40-60W，電凝功率為50W。患者取膀胱截石位，常規消毒鋪巾，放置窺陰器，充分暴露宮頸陰道部，擦拭宮頸分泌物后碘染宮頸，標記移形帶及病灶區域，電極從碘不著色外緣3～5mm處開始。電切環與宮頸表面垂直切入宮頸組織，到達需要深度，緩慢均勻連續移動電切環，直至患者病變外側3～5mm處出電切環。宮頸管切除深度：CIN Ⅰ-Ⅱ切除深度約1.5～2.0cm，CIN Ⅲ切除深度約2.0～2.5cm。宮頸標本在\"12點\"標記后送病檢。宮頸殘端有滲血者用球形電凝器止血，必要時予以止血紗布壓迫，24h取出。

1.2.3 術后隨訪 術后3月常規檢查創面愈合情況，術后6月行HPVDNA分型檢測，持續感染者行陰道鏡檢查，必要時活檢。所有活檢標本由2名病理醫生盲法閱片做出判斷。

1.3 統計學分析 采用SPSS17.0統計軟件，計數資料采用χ2，等級資料采用秩和檢驗，檢驗水準ɑ=0.05，P<0.05為有統計學意義。

2 結果

2.1 不同年齡組術后6個月HPV清除情況 隨年齡增加，術后6月HPV清除率逐漸下降，不同年齡組清除率兩兩比較，三組中21～30歲組分別與另兩組比較，差異有統計學意義（P<0.05）。

2.2不同CIN病變程度術后6個月HPV清除情況 隨CIN級別的增加，術后6個月HPV清除率逐漸下降，不同級別間清除率兩兩比較分別具有顯著性（P<0.05）。

2.3 不同年齡組術后HPV亞型清除情況 隨年齡增加，術后6月HPV各亞型清除率逐漸下降，16、18亞型清除率各年齡組比較有統計學意義（P<0.05），其它亞型清除率各年齡組比較無統計學意義（P>0.05）。

注：凡是HPV 16、18亞型感染與其它亞型有多重感染者均列入HPV16、18亞型感染中。

2.4不同CIN病變程度術后6個月HPV亞型清除情況 隨CIN級別增加，術后6個月HPV各亞型清除率逐漸下降， 不同級別間各亞型清除率比較無統計學意義（P>0.05）。

2.5 術后6個月HPV持續感染患者再次病理檢查情況 見表5。

3 討論

3.1.LEEP術對宮頸CIN患者治療效果 研究表明[3]，LEEP可降低HPV的感染，HPV在LEEP治療后6個月清除最明顯，其清除率約為79.7%。本研究中，HPV在不同年齡及病變程度間均有明顯下降，與既往研究結果一致，進一步說明LEEP有利于HPV的清除。LEEP通過對宮頸病灶的燒灼，祛除了宮頸表面的異常細胞，切除了HPV賴以生存的部位，從而減少、消除了HPV病毒的感染，達到了治療的目的[4]。

3.2 不同年齡組術后HPV及其亞型清除率的比較 有學者研究發現[5]，年齡因素是CIN術后HPV復發的危險因素，尤其是超過35歲的患者容易出現HPV持續感染，故年齡較大的患者容易造成治療效果差，高危型HPV感染不易被清除，術后持續感染率高。本研究中，在同一隨診期限內，隨年齡增加，HPV及其亞型清除率均逐漸下降。分析以上結果，反映出年齡在CIN術后對療效的影響，年齡越大，病灶越不易清除，病灶殘留時間越長，治療效果越差。故臨床上對年齡較大的CIN術后患者，應加強隨訪，鞏固治療。

3.3 不同級別間術后HPV及其亞型清除率的比較 文獻報道切緣陽性與病變程度有關[6]。本研究中，隨著病變程度的提高，術后HPV及其亞型清除率均逐漸下降，這提示我們，隨著病變級別的增加，LEEP術后病灶殘留機率增加，因此，對病變程度高的患者應加強隨訪，以早期發現殘留病灶。

CIN 治療失敗或術后復發的主要危險因素同一亞型高危型HPV的持續感染[7]。如果HPV分型結果是陽性，則需要判別患者現在感染的HPV亞型與術前感染的亞型是否相同，如果相同則說明術后還存在著殘留的風險，如果感染的是不同亞型，說明患者又有新的感染，對HPV 16、18亞型感染的患者其隨訪次數應大于其它亞型感染者。因此，HPV分型檢測在隨訪中有助于判斷高危型持續感染還是新亞型的新型感染，是多型混合感染還是單獨亞型病毒感染。由于HPV分型檢測的優越性，它已成為宮頸疾病治療后最好的隨訪指標。

參考文獻：

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編輯/王海靜