ELISA檢測ToRCH的方法學探討

摘要：目的 探討ELISA檢測ToRCH IgG和IgM的臨床價值，指導臨床對篩查指標的選擇。方法 回顧性分析2014年1～9月來我院就診的早孕婦女或待孕婦女的ToRCH檢測結果，評估ToRCH各檢測項目的陽性檢出率。結果 ToRCH-IgG檢測陽性率分別為RUB-IgG 86.84%、HSV2-IgG 86.22%、CMV-IgG 73.43%、HSV1-IgG 23.58%、HSV1-IgG 1.38%；ToRCH-IgM則無1份陽性結果。結論 ELISA法檢測ToRCH IgM陽性率低，可能不適用于臨床進行ToRCH的診斷篩查。

關鍵詞：ToRCH；IgM；IgG

從ToRCH概念的提出至今已近半個世紀，Nahmia 將復雜的圍產期感染綜合后稱之為 ToRCH ，即弓形蟲（Toxoplasmosis， To）、風疹（Rubella， R ）、巨細胞病毒（Cytomegalovirus， C ） 、單純皰疹病毒 1型或2型（Herpes Simplex Virus， H ）。近年來，隨著超聲診斷和核磁共振等技術的引進和發展，發現越來越多的胎兒先天畸形與ToRCH感染有關。然而，妊娠期4種病原微生物抗體篩查實驗應不應該做？怎樣做？至今在醫學界仍存在較大爭議。基于此，本研究回顧性分析2014年1～9月我室檢測的ToRCH結果，對ELISA法檢測ToRCH的臨床價值進行探討。

1 資料和方法

1.1試劑 ToRCH IgG、ToRCH IgM試劑盒（貝爾生物技術有限公司，北京），質控品（上海臨檢中心）。

1.2儀器 BioTek ELX 808酶標儀（美國）。

1.3標本 2014年1月～9月來我院就診的早孕婦女或待孕婦女共2274例。

1.4方法 嚴格按ToRCH IgG、ToRCH IgM試劑盒說明書操作，同時進行室內質控。室內質控在控后出具檢測報告。

1.5 檢測結果 檢測結果所示，2014年1～9月送檢至我室的標本中未檢出ToRCH-IgM陽性標本，ToRCH-IgG檢測陽性率分別為RUB-IgG 86.84%、HSV2-IgG 86.22%、CMV-IgG 73.43%、HSV1-IgG 23.58%、HSV1-IgG 1.38%，見表1。

2 討論

經典的ToRCH感染在圍產醫學中稱為ToRCH綜合征，是一組以胎兒中樞神經系統受損為主，多器官受累的臨床癥候群。包括小頭畸形、腦積水、腦內鈣化，遲發性中樞神經系統障礙，耳聾、自內障、視網膜脈絡膜炎、先天性心臟病、肝脾腫大、骨髓抑制、胎兒宮內發育遲緩等。

ToRCH在臨床診斷上通常檢測針對相應病原的IgM或IgG。特異IgM在感染早期出現，以后逐漸被IgG取代。IgM陽性，尤其是高滴度的特異IgM抗體，提示可能有相應病原體的急性感染；病程中IgG增高4倍及4倍以上，代表近期感染或繼發活動感染；IgG檢測單項陽性則表明被檢者有過既往感染或接種過疫苗，具備一定的免疫力[1，2]。

以巨細胞病毒（CMV）感染為例，CMV 是宮內感染最常見的原因，在活產兒中發病率為0.2%～ 2.2%，初次感染和復發感染的孕婦宮內垂直傳播和胎兒感染的風險明顯不同，前者為30%～40%、后者僅為1%[3]。但是，CMV IgM抗體在初發感染和復發感染的孕婦血清中均可出現[4]，妊娠期初次感染的血清學診斷主要依據血清轉化現象（之前血清反應陰性的孕婦出現特異性IgG 抗體，即IgM陽性+ IgG 定量檢測上升，15 d后轉為陽性發生血清轉化= 初次感染），或檢出病毒特異性IgM抗體并伴隨低親和力IgG 抗體[3]。因此，ELISA法為定性檢測項目，僅用ELISA法進行CMV感染的初篩，無法確診孕婦何時感染。從成本效益出發，篩查的意義不大[5]。

ELISA法用于抗體檢測因其特異性強、敏感性高、操作簡單的特點，廣泛應用于臨床實驗室。我室2014年1～9月ToRCH檢測結果表明，ELISA法檢測ToRCH IgG具有較高的敏感性，但檢測ToRCH IgM的敏感性極低。這一方面可能是篩選人群的因素，即人群中確實是此種現象；另一方面也可能是ELISA法自身缺陷造成，如易受類風濕因子、抗核抗體的干擾，產生假陽性或假陰性結果。研究結果和william等認為IgG檢測的敏感性和特異性很高，而IgM敏感性低的觀點一致[1]。

目前，國內檢測ToRCH的診斷方法多用ELISA法，且診斷試劑盒品牌繁多，但試劑盒質量的差異也很大，即試劑的靈敏度有較大差異： 不同試劑間不僅檢測的S/CO值差異明顯，而且數據的離散程度也不相同；即使用同一家試劑檢測同一份樣本，S/CO值有的達l0倍以上的差異[6，8]。ToRCH IgM陽性率低除了試劑因素外、檢測人員的操作及環境因素都可影響結果的準確性。

綜上所述，ELISA法檢測ToRCH IgM陽性率低，不能判斷初發感染和復發感染，且檢測耗費大量人力財力，ELISA法并不適合臨床進行ToRCH的診斷篩查。

參考文獻：

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編輯/馮焱