ZEB1、E-cadherin和Vimentin在上皮性卵巢癌組織中表達的情況及臨床意義

周丹丹 李潔華

(鹽城市第一人民醫院婦產科 江蘇 鹽城 224000)

卵巢癌患者在病情得到確診后，其5年的死亡率約為70%-80%。在卵巢癌患者中，上皮性卵巢癌（EOC）患者占85%-90%[1]。上皮源性腫瘤包括乳腺癌、肺癌、食管鱗狀細胞癌、胃癌、胰臟癌、子宮頸癌、子宮內膜癌和前列腺癌等。E盒結合鋅指蛋白1（ZEB1）是上皮源性腫瘤EMT的轉錄誘導因子之一[2]。鈣粘蛋白E（E-cadherin）的基因定位于人類染色體16q22.1附近，其異常的表達與乳腺癌、上皮性卵巢癌、鼻咽癌等惡性腫瘤發生侵襲轉移有關[3]。波形蛋白（Vimentin）的基因定位于人類染色體10p13的附近，其表達的水平與腫瘤細胞的惡性程度有密切的關系[4]。在本文中，我們采用免疫組化法檢測ZEB1、E-cadherin和Vimentin在50例上皮性卵巢癌組織和12例正常卵巢組織中表達的情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究的對象為2011～2014年鹽城市第一人民醫院婦產科采集的62例卵巢組織標本，其中有50例上皮性卵巢癌患者腫瘤原發灶的組織標本，12例子宮肌瘤患者正常的卵巢組織標本。提供上皮性卵巢癌組織標本的50例患者其年齡在24～75歲之間，其中位年齡為55歲，其中卵巢癌的FIGO分期為Ⅰ期的患者有16 例 (32.00%)，為Ⅱ期的患者有6例(12.00%) ，為III期的患者有23例(46.00%)，為Ⅳ期的患者有5例(10.00%)，卵巢癌的分化程度為低分化的患者有11例 (22.00%)、為中分化的患者有19例（38.00%)、為高分化的患者有20例(40.00%)，卵巢癌的病理類型為漿液性腺癌的患者有31例(62.00%)，為黏液性腺癌的患者有13例(26.00%)，為其他類型的患者有6例（卵巢透明細胞癌患者1例、卵巢子宮內膜樣腺癌患者5例,共占12.00%）。

1.2 方法 采用免疫組化法檢測本組組織標本中ZEB1、E-cadherin和Vimentin表達的情況，檢測方法是：將本組標本用福爾馬林進行固定，用石蠟進行包埋(應選取癌巢中心的組織進行石蠟包埋)，對組織蠟塊進行連續切片，將其切成4-5張3μm厚的組織切片，置于60℃的烤箱中保存30min左右。對這些組織切片采用常規的蘇木素-伊紅（HE）法與免疫組織化學SP法進行染色。由鹽城市第一人民醫院病理科的兩名病理醫師共同分析并判定檢測結果，判定方法是：將本組組織切片置于400倍的顯微鏡下，隨機選取5個不同的視野，采用半定量計分法進行分析。組織切片中細胞的細胞核內若出現淡黃色、棕黃色或棕褐色的顆粒可判定其中ZEB1的表達呈陽性。組織切片中細胞的細胞膜若呈黃色或棕黃色，可判定其中E-cadherin的表達呈陽性。組織切片中細胞的細胞質內若出現淡黃色、棕黃色或棕褐色的顆粒，可判定其中Vimentin的表達呈陽性。計算本組組織切片中ZEB1、E-cadherin和Vimentin呈陽性的細胞所占的百分比。

1.3 統計學處理 采用SPSS22.0統計軟件對本研究中的數據進行分析，計數資料用（%）表示，采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 在本組組織標本中ZEB1表達情況的分析 上皮性卵巢癌組織標本中ZEB1表達的陽性率高于正常的卵巢組織，差異有統計學意義(P＜0.01)。詳情見表1。

表1 在本組組織標本中ZEB1表達情況的分析[例（%）]

2.2 在本組組織標本中E-cadherin表達情況的分析上皮性卵巢癌組織標本中E-cadherin表達的陽性率高于正常的卵巢組織，差異有統計學意義(P＜0.01)。詳情見表2。

表2 在本組組織標本中E-cadherin表達情況的分析[例（%）]

正常卵巢組織120（0.0）12（100.0）8.775 0.003上皮性卵巢癌組織5023（46.0）27（54.0）

2.3 對本組組織標本中Vimentin表達情況的分析 上皮性卵巢癌組織標本中Vimentin表達的陽性率高于正常的卵巢組織，差異有統計學意義(P＜0.01)。詳情見表3。

表3 對本組組織標本中Vimentin表達情況的分析[例（%）]

3 討論

上皮性卵巢癌的致死率位居婦科惡性腫瘤致死率的第五位。上皮性卵巢癌起源于卵巢表面的生發上皮、卵巢皮質的包涵囊腫或鄰近的遠端輸卵管上皮[5]。由于缺乏有效的診斷及治療方法，全球每年死于上皮性卵巢癌的患者約有125000例[6]。上皮性卵巢癌患者的五年生存率與其腫瘤的臨床分期密切相關。此病患者若在腫瘤的臨床分期為I期或II期時得到診斷和治療，其5年存活率可達到90%以上[7]。然而，大多數上皮性卵巢癌患者的病情在得到確診時已進入晚期（臨床分期為III期和IV期），其5年存活率僅為30%～40%[8]。目前，臨床上尚無可精確診斷早期上皮性卵巢癌的非侵入性檢測方法。

ZEB家族屬于鋅指蛋白類的轉錄因子，其家族成員包含ZEB1和ZEB2等。研究證實，ZEB1和ZEB2可抑制E-cadherin的表達，誘導EMT的發生，促進腫瘤的發展、轉移及擴散[9]。在卵巢癌等惡性腫瘤組織中，ZEB1和ZEB2的表達水平均較高[10]。我們的研究結果顯示，ZEB1在正常卵巢組織中無表達，在上皮性卵巢癌組織中的表達增多。ZEB1主要分布在腫瘤細胞的細胞核中，可能具有促進上皮性卵巢癌發生發展的作用。E-cadherin是鈣粘蛋白家族的重要成員，具有維持上皮細胞的極性和正常結構等作用。在大多數腫瘤發生惡性轉化和進展的過程中，E-cadherin的表達下調均可介導細胞間粘附性的丟失[11,12]。我們的研究結果顯示，E-cadherin在正常的卵巢組織中無表達，在上皮性卵巢癌中的表達增多。E-cadherin主要分布在腫瘤細胞的細胞膜中。Vimentin的表達與前列腺癌、胃腸道腫瘤、中樞神經系統腫瘤、乳腺癌、惡性黑色素瘤及肺癌等腫瘤細胞的惡性程度密切相關，其在腫瘤中的過表達與腫瘤的生長、對正常組織的侵襲及腫瘤患者的預后均有關[13]。我們的研究結果顯示，Vimentin在正常的卵巢組織中無表達，在上皮性卵巢癌細胞的細胞質中表達呈陽性。

綜上所述，檢測ZEB1、E-cadherin和Vimentin表達的情況在診斷上皮性卵巢癌方面具有重要的意義。

[1]De Craene B and Berx G. Regulatory networks defining EMT during cancer initiation and progression. Nat Rev Cancer,2013, 13: 97-110.

[2]Davidson B,Tropé CG,Reich R. Epithelial-mesenchymal tr ansition in ovarian carcinoma.Front Oncol,2012,2: 33.

[3]Yokobori T, Suzuki S, Tanaka N, Inose T, Sohda M, et al .MiR-150 is associated with poor prognosis in esophageal squamous cell carcinoma via targeting the EMT inducer ZEB1.Cancer Sci,2013,104: 48–54.

[4]Roche J, Nasarre P, Gemmill R, Baldys A, Pontis J, et al.G lobal Decrease of Histone H3K27 Acetylation in ZEB1-In duced Epithelial to Mesenchymal Transition in Lung Can cer Cells. Cancers (Basel),2013,5: 334–56.

[5]Yang Y, Ahn YH, Chen Y, Tan X, Guo L, et al. ZEB1 sensiti zes lung adenocarcinoma to metastasis suppression by PI 3K antagonism. J Clin Invest,2014,In press.

[6]Lobert S, Graichen ME, Morris K .Coordinated regulation of b-tubulin isotypes and epithelial-to-mesenchymal tr ansition protein ZEB1 in breast cancer cells.Biochemist ry,2013,52: 5482–90.

[7]羅愛華,高嵋,謝樂,等.鼻咽癌組織中上皮-間葉轉換的檢測及與其轉移的相關性. 實用癌癥雜志,2012,27:449-452.

[8]徐文清,胡衛,肖戈,等.E-cadherin及Vimentin在腎上腺皮質癌中的表達及其意義.實用癌癥雜志,2013,28(3):243-245.

[9]張麗娜,張淑敏.Vimentin、Ki-67在透明細胞性腎細胞癌組織中的表達及其與MVD的相關性研究.中國實驗診斷學,2012,16(03):457-459.

[10]謝建中,魏嘉,梁佳,等.肝細胞癌組織中E-cadherin、N-cad herin、Vimentin的表達變化及意義.山東醫藥,2010,50(22):90-91.

[11]Geminill RM, Roche J,Potiron VA,et al. ZEBl-responsive genes in non-small cell lung cancer. Cancer Lett, 2011,300(1):66-78.

[12]Sivertsen S, Berner A, Michael C W, et al. Cadherin expre ssion in ovarian carcinoma and malignant mesothelioma cell effusions.Acta Cytol, 2006, 50(6): 603.

[13]Cheng JC,Auersperg N,Leung PC.TGF-beta induces serous borderline ovarian tumor cell invasion by activating EM T but triggers apoptosis in low-grade serous ovarian ca rcinoma cells. PloS One,2012,7(8):e42436.