LC-MS/MS法同時測定復方鹿角顆粒中13種成分的含量

郝燕勤（赤峰學院醫學院，內蒙古 赤峰 024000）

LC-MS/MS法同時測定復方鹿角顆粒中13種成分的含量

郝燕勤
（赤峰學院醫學院，內蒙古 赤峰 024000）

目的 通過使用LC-MS/MS法同時測定復方鹿角顆粒中13種成分具體含量。方法 建立液相色譜-串聯質譜法（Liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS），依次分析10個批次的復方鹿角顆粒樣品并取其平均值作為補骨脂素、異補骨脂素、馬錢苷、淫羊藿苷、柚皮苷、橙皮苷、朝藿定C、寶藿苷Ⅰ、朝藿定A、朝藿定B、紅景天苷、特女貞苷、淫羊藿次苷Ⅱ最終具體含量。結果 通過采用LC-MS/MS法進行測定，復方鹿角顆粒中13種成分的具體含量依次為：1.75～2.00 mg/g、2.15～2.60 mg/g、3.75～4.20 mg/g、14.0～15.5 mg/g、0.75～0.80 mg/g、13.5～15.5 mg/g、13.2～14.5 mg/g、0.38～0.40 mg/g、3.75～4.10 mg/g、1.82～2.05 mg/g、3.85～4.40 mg/g、6.75～7.65 mg/g、0.55～0.63 mg/g。結論 LC-MS/MS法同時測定復方鹿角顆粒中13種成分具體含量操作簡便、測定時間短、反應靈敏度高、結果真實準確，能夠為復方鹿角顆粒質量控制工作提供科學依據，值得在今后工作中推廣使用。

液相色譜-串聯質譜法；復方鹿角顆粒；質量控制

復方鹿角顆粒是當前臨床中用于治療慢性心力衰竭的主要藥物之一，在提高患者臨床治療效果的同時，也為臨床工作進一步發展提供了有利的支持［1-3］。然而，由于該藥物成分復雜多樣，含量差異將會直接影響藥物質量及治療效果，已經成為質量控制工作所面臨的棘手問題。為此，本次研究針對LC-MS/MS法同時測定復方鹿角顆粒中13種成分的含量展開深入分析，現將結果報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料：本次研究中10個批次的復方鹿角顆粒均購自中國食品藥品檢定研究院。所選儀器為LC-20A高效液相色譜儀（日本Shimadzu公司生產）；4000Q-Trap型液相色譜-串聯質譜儀（美國安捷倫公司生產）；TG332A微量分析天平（上海精密科學儀器有限公司生產）。

1.2方法：采用TG332A微量分析天平精確量取補骨脂素、異補骨脂素、馬錢苷、淫羊藿苷、柚皮苷、橙皮苷、朝藿定C、寶藿苷Ⅰ、朝藿定A、朝藿定B、紅景天苷、特女貞苷、淫羊藿次苷Ⅱ樣品各10 mg并分別置于單獨量瓶之中。加入甲醇溶液溶解并稀釋至1 mg/mL濃度。隨機抽取各個批次的復方鹿角顆粒樣品并將其研成粉末，之后精確稱取0.5 g，放置在50 mL容量的錐形瓶之中加入70%甲醇水溶液20 mL，經過處理之后利用0.45 μm微孔濾膜取其上清液并稀釋50倍。使用LC-20A高效液相色譜儀提取離子流色譜圖后采用4000Q-Trap型液相色譜-串聯質譜儀在多反應監測模式（multiple reaction monitoring，MRM）進行正負離子掃描切換在同一周期同時測定補骨脂素、異補骨脂素、馬錢苷、淫羊藿苷、柚皮苷、橙皮苷、朝藿定C、寶藿苷Ⅰ、朝藿定A、朝藿定B、紅景天苷、特女貞苷、淫羊藿次苷Ⅱ樣品具體含量。

2　結 果

通過采用LC-MS/MS法進行測定，復方鹿角顆粒中13種成分的具體含量依次為：1.75～2.00 mg/g、2.15～2.60 mg/g、3.75～4.20 mg/g、14.0～15.5 mg/g、0.75～0.80 mg/g、13.5～15.5 mg/g、13.2～14.5 mg/g、0.38～0.40 mg/g、3.75～4.10 mg/g、1.82～2.05 mg/g、3.85～4.40 mg/g、6.75～7.65 mg/g、0.55～0.63 mg/g。

3　討 論

復方鹿角顆粒對于慢性心力衰竭病癥具有較好的治療功效已經得到了患者及臨床醫師的廣泛認可，使用頻率及范圍得到了大幅提升。然而，盡管現代化醫學檢測設備陸續在臨床中推廣使用，但是關于復方鹿角顆粒多指標成分定量的分析與研究在目前而言仍然屬于一個全新的研究課題。眾所周知，中成藥制劑中藥物成分含量劇烈變化將會導致其配比發生分本性改變，繼而因藥物相生相克而對患者產生不良影響，因而中成藥成分質量控制工作成為當前社會各界廣泛關注的焦點問題。為此，本次研究通過建立當前臨床檢測工作中比較青睞的液相色譜-串聯質譜法來對10個批次的復方鹿角顆粒十三種成分進行定量分析，以明確其具體含量范圍，為質量控制以及臨床檢測工作進一步發展提供科學依據［4-9］。

通過采用LC-MS/MS法同時測定復方鹿角顆粒中十三種成分具體含量后發現，LC-MS/MS法同時測定復方鹿角顆粒中13種成分含量操作簡便、測定時間短、反應靈敏度高、結果真實準確，能夠為復方鹿角顆粒質量控制工作提供科學依據，值得在今后工作中推廣使用。

［1］ 劉宏明，張葉，楊福偉，等.高效液相色譜法同時測定小兒解表顆粒中8種成分的含量及主成分分析［J］.中國醫院藥學雜志，2014，11（15）：1302-1305.

［2］ 唐勵靜，文翔昊，李沖，等.HPLC同時測定復方金銀花顆粒中綠原酸、連翹苷、黃芩苷、漢黃芩素、芹菜素的含量［J］.中國實驗方劑學雜志，2014，24（21）：71-74.

［3］ 賀康洪，張廣春，陳明明，等.RP-HPLC法同時測定復方黑參顆粒中肉桂酸和次野鳶尾黃素的含量［J］.沈陽藥科大學學報，2013，12（4）：264-267.

［4］ 李艷，谷凱，鄭學燕.人血漿中昂丹司瓊的LC-MS/MS法測定及其藥動學［J］.中國醫藥工業雜志，2016，47（6）：747-750.

［5］ 周芳妍，劉力.復方鹿角顆粒的HPLC指紋圖譜研究［D］.上海：上海中醫藥大學，2013.

［6］ 候晨艷，高繼光，付爾康.鹿角膠鈣顆粒劑對大鼠實驗性骨質疏松癥的研究［J］.中國現代應用藥學，2000，17（1）：66-68.

［7］ 金穎成，劉力.復方鹿角顆粒制備工藝、質量標準及穩定性研究［J］.上海：上海中醫藥大學，2012.

［8］ 徐冉馳，劉力，徐德生.液-質聯用法同時測定復方鹿角顆粒中18種氨基酸的含量［J］.中國醫院藥學雜志，2015，35（19）：1719-1723.

［9］ 田婷婷，馬英華，解偉偉，等.LC-MS/MS同時測定藍萼香菜中4種二萜類成分及其聚類分析［J］.中國中藥雜志，2016，41（2）：250-256.

R282.710.3

B

1671-8194（2016）23-0039-01