牙周炎常見菌對抗菌藥物的篩選及活性測定探討

王金海（中國人民解放軍第四六三醫院口腔科，遼寧 沈陽 110000）

牙周炎常見菌對抗菌藥物的篩選及活性測定探討

王金海
（中國人民解放軍第四六三醫院口腔科，遼寧 沈陽 110000）

目的 通過對牙周炎常見菌對抗藥物的篩選及活性測定，分析探討治療不同類型牙周炎的最佳藥物。方法 采用NCCLS推薦的液體稀釋法對牙周炎常見菌進行藥物測定，測出最低抑菌濃度（MIC）。結果 克林霉素、二甲胺四環素、環丙沙星這三種抗生素對牙周炎常見菌抑菌效果最好，其中尤以二甲胺四環素的效果最為突出。結論 臨床上治療牙周炎時可將二甲胺四環素作為最佳藥物。

牙周炎常見菌；對抗菌藥物；篩選；活性測定

局部因素所引起的牙周支持組織產生的慢性炎癥即為牙周炎。該病多分布在35歲以后的年齡階段，如患者不及時治療，炎癥就會逐漸向深層擴散到牙周膜、牙槽骨、牙骨質，從而發展成牙周炎［1］。本次研究對牙周炎常見菌進行了抗菌藥物的篩選與活性測定，具體報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

1.1.1牙周炎常見菌。牙周炎常見致病菌株：①國際標準菌株：卟啉單胞菌（牙齦卟啉單胞菌、不解糖卟啉單胞菌、牙髓卟啉單胞菌）、普氏菌（中間普氏菌、盧氏普氏菌、軀體普氏菌）、放線菌（伴放線桿菌、黏性放線菌、內氏放線菌）、嗜二氧化碳菌（牙齦嗜二氧化碳菌、黃褐色嗜二氧化碳菌）、血鏈球菌、嗜沫嗜血桿菌、巨核梭形桿菌、韋榮氏球菌；②藥敏指示菌：多形類桿菌、脆弱類桿菌；③分離菌株，主要為從臨床上牙周炎患者牙周袋內鑒定、分離的菌株，包括18株類桿菌、56株放線菌、82株產黑色素菌群、57株梭形桿菌、13株伴放線桿菌、12株嗜沫嗜血桿菌、10株韋榮氏球菌、15株其他厭氧菌。

1.1.2牙周炎抗菌藥物。本次研究共選用18種牙周炎抗菌藥物：四環素類（強力霉素、二甲胺四環素）、大環內酯類（克拉霉素、羅紅霉素、紅霉素、麥白霉素、阿奇霉素、交沙霉素、乙酰螺旋霉素）、硝咪唑類（替硝唑、甲硝唑）、喹諾酮類（曲氟沙星、環丙沙星、氧氟沙星、左旋氧氟沙星、諾氟沙星、洛美沙星）、克林霉素。

1.1.3培養基：選擇放線菌、伴放線放線桿菌、梭形桿菌、產黑色素菌群作為培養基。

1.2方法

1.2.1對抗菌藥物的篩選。①配置細菌懸液：在固體CDC培養基上接種上述國際標準菌株，采取厭氧培養，并保持溫度在37 ℃，5 d后即在液體培養基中置于新鮮細菌菌落，繼續進行厭氧培養，2 d后再把液體CDC培養基稀釋到一定濃度留置待用。②配置藥敏培養基：對18種牙周炎抗菌藥物進行稀釋，由濃到稀分為13個濃度，把55 ℃混有5%羊血的CDC培養基與1 mL藥液加14 mL的培養基進行混合，分置到13個實驗器皿中，并設兩個無藥培養基以進行對照。③細菌點種：把稀釋好的菌液用點種儀分先后點種到其中一個空白培養基和藥敏培養基上，進行先前對照觀察；13個濃度的藥敏培養基點種完后，再把菌液點種到另一個空白培養基上，進行后對照。將器皿放置到35 ℃的厭氧環境中進行培養，5 d后觀察最低抑菌濃度（MIC）。

1.2.2對抗菌藥物的活性測定：①用選擇培養基對牙周炎患者牙周袋內取下的齦下菌斑進行致病菌株的培養；②用分離的263株致病菌進行細菌懸液的配置；③選用經對抗菌藥物篩選試驗后的三種效果最好的抗生素進行藥敏培養基的配置；④進行細菌點種；⑤分析觀察263株臨床分離的菌株對三種抗生素的藥物活性。

1.3結果判斷：針對對抗菌藥物的篩選，平均血藥濃度＜MIC即為耐藥，MIC≤平均血藥濃度＜MIC的5倍即為中度敏感，平均血藥濃度≥MIC的5倍即為高度敏感；針對對抗菌藥物的活性測定，用平均血藥濃度分別與90%抑菌范圍、50%抑菌范圍、有效抑菌范圍（MIC）進行比較。

2　結 果

通過對牙周炎常見致病菌進行藥物的篩選試驗后取得了克林霉素、二甲胺四環素、環丙沙星這三種抑菌效果最好的抗生素，并用臨床分離的263株菌株進行了藥物活性的測定，得出了90%抑菌范圍、50%抑菌范圍、有效抑菌范圍（MIC）。

其中二甲胺四環素的抑菌效果最好，除了對產黑色素菌群的有效抑菌范圍在0.06～64 mg/L，對其他菌株的抑菌活性范圍（MIC）均＜0.06～64 mg/L；克林霉素對類桿菌、放線菌、產黑色素菌群、梭形桿菌的有效抑菌范圍相同（＜0.06或＞256 mg/L），對其他菌株的有效抑菌范圍則不同；環丙沙星則對類桿菌、韋榮氏球菌的有效抑菌范圍相同（＜0.06～16 mg/L），對其他菌株的有效抑菌范圍都不同。

3　討 論

牙周炎是由特定的可疑致病菌所引起的慢性感染性疾病，牙齦卟啉單胞菌、伴放線桿菌、福賽類桿菌這三類均屬于革蘭陰性桿菌、具有多種毒力因子的牙周致病菌已被世界牙周病研討會所公認［2］。在大部分研究中，黃褐色嗜二氧化碳菌、伴放線桿菌是導致青少年患上牙周炎的主要致病菌，其中克林霉素、二甲胺四環素、強力霉素、環丙沙星對它們有較高的敏感性。而中間普氏菌、牙齦卟啉單胞菌、巨核梭形桿菌、黏性放線菌則是導致成年人出現牙周病的主要原因，克林霉素、二甲胺四環素、環丙沙星這三種抗生素對他們的敏感性最高［3］。

本次試驗中得出的抑菌效果最好的三種抗生素中尤以二甲胺四環素的抗菌效果最好，它是一種半合成的四環素類抗生素，與同類其他藥物相比，具有更廣的抗菌譜，抑菌作用更強，因此可作為臨床上治療牙周炎的首選藥物。

［1］ 楊暤.茶多酚聯用奧硝唑對牙周可疑致病菌的體外抑菌活性研究［D］.重慶：重慶醫科大學，2012.

［2］ 張研.克拉霉素治療重度慢性牙周炎的基礎與臨床研究［D］.天津：天津醫科大學，2012.

［3］ 劉曉花.派麗奧聯合布洛芬治療慢性牙周炎的臨床應用研究［D］.濟南：山東大學，2010.

R781.4+2

B

1671-8194（2016）23-0051-01