社區繼發性肺結核合并下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性分析

陳望，劉愛勝，魏玉娥，謝統明，謝齊群

(深圳市龍華新區人民醫院檢驗科1、手外科2、急診科3，廣東 深圳 518109)

社區繼發性肺結核合并下呼吸道感染病原菌分布及耐藥性分析

陳望1，劉愛勝1，魏玉娥1，謝統明2，謝齊群3

(深圳市龍華新區人民醫院檢驗科1、手外科2、急診科3，廣東 深圳 518109)

目的 了解深圳龍華社區繼發性肺結核合并下呼吸道感染病原菌分布及其耐藥現狀，為臨床診斷和抗生素合理使用提供參考依據。方法參照2001年中華醫學會結核病學分會制定的繼發性肺結核診斷標準《肺結核診斷和治療指南》和下呼吸道感染診斷標準《臨床診療指南呼吸病學分冊》，選取2013年6月至2015年11月在龍華社區確診為繼發性肺結核合并下呼吸感染患者216例，對痰標本培養和藥敏結果進行了回顧性分析。結果從216例社區繼發性肺結核合并下呼吸道感染患者中共分離出251株病原菌，其中革蘭氏陰性桿菌占52.6%(132/251)，真菌占26.7%(67/251)，革蘭氏陽性球菌占20.7%(52/215)；革蘭氏陰性桿菌主要為肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌及流感嗜血桿菌，分別占22.3%(56/251)，15.5%(39/251)及10.4%(26/251)；真菌感染主要病原體為白色假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌，分別占21.1%(53/251)和3.2%(8/251)；革蘭氏陽性球菌主要為金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及溶血葡萄球菌，分別占7.6%(19/251)，5.2%(13/251)及2.8%(7/251)；分離出的病原菌多為耐藥菌，對常用抗菌藥物呈現不同程度的耐藥性。結論龍華社區繼發性肺結核合并下呼吸道感染病原菌以革蘭氏陰性桿菌和真菌感染多見，最常見為肺炎克雷伯菌、白色假絲酵母菌及銅綠假單胞菌，對常用抗菌藥物產生不同程度的耐藥性。

社區；繼發性肺結核；下呼吸道；病原菌；分布；耐藥性

近年來，社區繼發性肺結核感染率和耐藥率均呈上升趨勢。繼發性肺結核因療程長，導致患者免疫力低下，易破壞體內正常菌群，使微生態失衡而易導致病原菌定殖與感染[1]。了解社區繼發性結核合并下呼吸道感染患者病原菌分布及耐藥現狀，對其治療和控制社區感染傳播有重要意義。本研究就深圳龍華社區確診為繼發性肺結核合并下呼吸道感染患者分離的251株病原菌分布及藥敏結果進行了回顧性分析，現將結果報道如下：

1 材料與方法

1.1 標本來源 參照2001年中華醫學會結核病學分會制定的繼發性肺結核診斷標準《肺結核診斷和治療指南》[2]和下呼吸道感染診斷標準《臨床診療指南呼吸病學分冊》[3]，選取2013年6月至2015年11月在龍華社區確診為繼發性肺結核合并下呼吸感染患者216例，其中男性129例，女性87例，年齡18～73歲，平均(38.9±17.4)歲。

1.2 標本采集 采集標本前囑患者清晨清水漱口后，深咳肺部痰液，使用一次性痰液收集器，留取標本后立即送檢，對合格的痰標本立即進病原菌分離鑒定與藥敏試驗。

1.3 方法

1.3.1 病原菌分離鑒定與藥敏試驗 依照《全國臨床檢驗操作規程》第3版[4]進行：(1)標本檢查：涂片鏡檢白細胞＞25個/LP，上皮細胞＜10個/LP為合格標本，否則重取。(2)分離培養：黏液少或不含的合格標本，可直接接種；對含有大量黏液的合格標本應加入等量pH 7.6的10 g/L胰酶液于35℃下等完全液化后接種，分別接種于血平板、巧克力平板、麥康凱平板和沙保弱氏平板內，于35℃溫箱或CO2培養箱內孵育24～48 h后進行病原菌分離鑒定及藥敏試驗。使用ATB和VITEK-2 Compact鑒定及藥敏分析儀對臨床分離菌株進行鑒定與抗菌藥物敏感性試驗，所有操作均按儀器的使用說明書進行，藥敏結果按照美國臨床實驗室標準化委員會標準(CLSI2010)進行判讀。

1.3.2 儀器與試劑 ATB和VITEK-2 Compact分析系統其配套的鑒定和藥敏條均由法國生物梅里埃公司提供；血平板、巧克力平板、麥康凱平板、沙保弱氏平板及M.H瓊脂平板由廣州迪景微生物科技公司提供。

1.3.3 質控菌株 大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27859、金黃色葡萄球菌ATCC25933均由衛生部生物制品鑒定所提供，室內質控結果均在NCCLS規定范圍內。

1.4 統計學方法 采用微生物WHONET5.4軟件對抗生素耐藥率進行統計分析。

2 結果

2.1 病原菌分布 從216例社區繼發性肺結核合并下呼吸道感染患者中共分離出251株病原菌，其中革蘭氏陰性桿菌占52.6%(132/251)，真菌占26.7%(67/ 251)，革蘭氏陽性球菌占20.7%(52/215)；革蘭氏陰性桿菌主要為肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌及流感嗜血桿菌，分別占22.3%、15.5%及10.4%；真菌感染主要病原體為白色假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌，分別占21.1%和3.2%；革蘭氏陽性球菌主要為金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及溶血葡萄球菌，分別占7.6%、5.2%及2.8%，見表1。

表1 251株肺結核合并下呼吸道感染病原菌的分布及構成比（%）

2.2 耐藥率 分離出251株病原菌中主要革蘭氏陰性桿菌對氨芐西林/舒巴坦、阿米卡星、環丙沙星、美羅培南、亞胺培南及氨曲南等藥物有較高的敏感性，而對氨芐西林、頭孢他啶、頭孢曲松及頭孢唑林等抗生素有很高的耐藥性；主要真菌對兩性霉素B和5-氟胞嘧啶敏感性很高，可達94.3%以上；主要的革蘭氏陽性球菌對利奈唑安、萬古霉素、替考拉寧雖然敏感性很高，達到89.4%以上，但已出現耐藥現象，結果見表2、表3和表4。

表2 主要革蘭氏陰性桿菌對常用抗生素的耐藥率（%）

表3 主要真菌對常用抗真菌藥的耐藥率(%)

表4 主要革蘭氏陽性球菌對常用抗生素的耐藥率(%)

3 討 論

繼發性肺結核患者因肺部感染結核桿菌，肺部因滲出、增殖、纖維化及空洞等組織結構變化易導致痰液引流不暢，同時因結核桿菌能抑制體內免疫功能而導致結核病患者免疫力進一步低下、營養不良及長期使用抗生素等諸多因素影響，易引起下呼吸道醫院感染[5]。

本研究結果顯示，216例社區繼發性肺結核合并下呼吸道感染患者痰標本共分離出251株致病菌，其中革蘭氏陰性桿菌占52.6%(132/251)，高于同地區2012年陳建波等[6]報道的，而與國內其他地區報道[7-8]的相一致，位居第2位的是真菌占26.7%(67/251)，明顯低于相關文獻[6]報道，這可能除了與患者來源不同和菌種變異等因素有關外，還可能與不同地區醫院在疾病預防、診斷、治療及抗生素應用等方面存在很大差異有關。

本研究結果顯示，分離出132株革蘭氏陰性桿菌中以肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌及流感嗜血桿菌分離率最高。132株革蘭氏陰性桿菌對氨芐西林幾乎100%耐藥，其次為頭孢他啶、頭孢曲松及頭孢唑林等頭孢類抗菌藥物，而對氨芐西林/舒巴坦、阿米卡星、環丙沙星、美羅培南、亞胺培南及氨曲南等藥物雖有較高的敏感性，但對美羅培南、亞胺培南及氨曲南出現了不同程度的耐藥性，值得臨床注意。

本研究結果顯示，真菌感染在社區繼發性肺結核合并下呼吸道感染患者中位居第二，主要病原體以白色假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌為主，其對益康唑和酮康唑的耐藥率最高，達到26.7%以上，與陳建飛等[6]的報道相近，而對兩性霉素B和5-氟胞嘧啶敏感性最高，可達94.3%以上，這可能與其可通過有效抑制真菌膽固醇的合成，使細胞膜的通透性改變而達到殺菌等原因有關。

革蘭氏陽性球菌感染在社區繼發性肺結核合并下呼吸道感染患者中位居第三，以金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及溶血葡萄球菌感染率最高，其對青霉素、紅霉素、克林霉素和四環素等均有很高的耐藥性(52.6%～100.0%)，與胡靜等[9]的報道一致，而對利奈唑安、萬古霉素和替考拉寧敏感性雖很高，可達到89.4%以上，與王良平[10]的報道一致，但已出現少量耐藥菌株。因此，醫院應加強耐藥性監測，應嚴格按照藥敏結果使用抗生素，預防與控制這類耐藥菌株產生。

綜上所述，了解社區繼發性肺結核合并下呼吸道感染患者病原菌分布特征及其耐藥情況，可為臨床治療提供參考依據，同時加強抗生素使用管理，只有依據藥敏結果合理使用抗菌藥物，才能有效控制感染，避免耐藥菌株的不斷產生，提高臨床治愈率，更好地為繼發性肺結核合并下呼吸道感染患者的治療提供幫助。

[1]陶波山.肺結核并發其他病原菌感染的病原菌分布特點及耐藥結果分析[J].現代檢驗醫學雜志,2012,27(2):137-139.

[2]中華醫學會結核病學分會.肺結核診斷和治療指南[J].中華結核和呼吸雜志,2001,24(2):70-74.

[3]中華醫學會.《臨床診療指南》呼吸病學分冊[M].北京:人民衛生出版社,2009:45-61.

[4]中華人民共和國衛生部醫政司.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006:32,35.

[5]宋斌,葉燕青.肺結核患者下呼吸道醫院感染病原菌的分布及耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志,2012,22(8):1728-1729.

[6]陳建飛,鐘志宏.肺結核合并下呼吸道真菌感染病原菌的分布及藥敏分析[J].北京醫學,2012,34(9):791-795.

[7]雷鴻斌,范文,黃娥,等.ICU下呼吸道感染的革蘭陰性桿菌耐藥性調查分析[J].中華醫院感染學雜志,2011,21(4):806-807.

[8]陳谷霖,吳紅麗,何耀琴,等.重癥監護病房呼吸機相關性肺炎病原菌分布及耐藥分析[J].中華醫院感染學雜志,2011,21(6): 1244-1246.

[9]胡靜,熊邦澤,朱金梅,等.下呼吸道感染病原菌分布及藥敏分析[J].重慶醫學,2009,38(4):436-437.

[10]王良平.肺結核患者下呼吸道病原菌分布及耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志,2012,22(19):4407-4409.

Distribution and drug resistance of pathogens causing community secondary pulmonary tuberculosis combined with lower respiratory infection.

CHEN Wang1,LIU Ai-sheng1,WEI Yu-e1,XIE Tong-ming2,Xie Qi-qun3. Department of Clinical Laboratory1,Department of Hand Surgery2,Department of Emergency3,the People's Hospital of Longhua New District of Shenzhen,Shenzhen 518109,Guangdong,CHINA

Objective To investigate the distribution and drug resistance of pathogens causing community secondary pulmonary tuberculosis combined with lower respiratory infection in Shenzhen Longhua New District community,and provide a reference for clinical diagnosis and rational use of antibiotics.MethodsBased on secondary pulmonary tuberculosis diagnostic criteria in Guidelines for Diagnosis and Treatment of Tuberculosis and lower respiratory infection diagnostic criteria in Clinical Guidelines for Respiratory Medicine,which both approved by Chinese Society for Tuberculosis,Chinese Medical Association in 2001,a total of 216 cases of patients with secondary pulmonary tuberculosis combined with lower respiratory infection in Longhua community were confirmed from June 2013 to November 2015,and the bacterial culture results of sputum specimens and drug susceptibility were retrospectively analyzed.ResultsA total of 251 strains of pathogenic bacteria were isolated from 216 cases of community secondary pulmonary tuberculosis combined with lower respiratory infection,with Gram-negative bacilli accounting for 52.6% (132/251),fungi for 26.7%(67/251),Gram-positive cocci for 20.7%(52/215).Gram-negative bacillus mainly consisted of Klebsiella pneumoniae,Pseudomonas aeruginosa and Hemophilus influenza,which respectively accounted for 22.3% (56/251),15.5%(39/251)and 10.4%(26/251).Fungal infection major pathogens were Candida albicans and Candida glabrata,which respectively accounted for 21.1%(53/251)and 3.2%(8/251).Gram-positive cocci mainly consisted of Staphylococcus aureus,Epidermis staphylococcus and Hemolytic staphylococci,which respectively accounted for 7.6% (19/251),5.2%(13/251)and 2.8%(7/251).The most isolated pathogenic bacteria were drug-resistant bacteria,which had the different degrees of resistance to commonly used antimicrobial agents.ConclusionGram-negative bacteria and fungi are the most common pathogens in patients with community secondary pulmonary tuberculosis combined with lower respiratory infection in Shenzhen Longhua New District community,and Pneumonia klebsiella,Candida albicans and Pseudomonas aeruginosa are the most common pathogens,which have the different levels of resistance to commonly used antimicrobial agents.

Community;Secondary pulmonary tuberculosis;Lower respiratory tract;Pathogenic bacteria;Distribution;Drug resistance

R521

A

1003—6350（2016）10—1637—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.10.030

2016-01-14)

廣東省深圳市科技局項目（編號：JCYJ20150325103202291）

陳望。E-mail：195269566@qq.com