B族鏈球菌感染、預防及檢測研究進展

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·綜述·

B族鏈球菌感染、預防及檢測研究進展

王欣1，韓淵明2綜述，魏超君1△審校

(1.甘肅省人民醫院臨床檢驗中心，甘肅蘭州 730000；

2.甘肅省蘭州市第一人民醫院泌尿外科，甘肅蘭州 730050)

關鍵詞:B族鏈球菌；感染；預防；疫苗

B族鏈球菌(GBS)即無乳鏈球菌感染是造成孕產婦生殖道感染的重要原因，嚴重時更可引起如泌尿系感染、絨毛膜羊膜炎、產褥感染等。早產、胎膜早破和新生兒敗血癥等均與其感染有密切關系[1]。王兆莉等[2]的研究發現未發生胎膜早破的正常產婦其生殖道中GBS感染率遠低于發生胎膜早破的產婦。孫瑜等[3]研究認為陰道感染GBS后，該菌可繼續上行造成宮腔內感染，引起絨毛膜羊膜炎，甚至造成胎兒死亡。

1GBS對孕產婦的影響

1.1GBS與胎膜早破(PROM)臨床研究證實,泌尿生殖道的GBS感染可引起PROM、早產、絨毛膜羊膜炎[4-5]，且由于PRDM而引起早產的孕婦組GBS感染率明顯高于足月產的孕婦組[6]。

1.2GBS與早產當GBS數量多且毒力強、孕婦免疫力低下或引起陰道炎的GBS上行造成PROM時，機體釋放的磷脂酶A2可刺激羊膜等組織產生細胞因子及前列腺素，它們引起子宮收縮導致早產發生[7-9]。Klebanoff等[10]研究表明,感染GBS的孕婦較健康孕婦發生早產的可能性增加20%～60%，且其分娩的胎兒為低或極低出生體質量兒的概率也相應增加。

1.3GBS與羊膜腔感染孕婦患細菌性陰道炎等疾病后致病菌上行造成胎盤、胎膜及羊水等感染即為羊膜腔感染。由于GBS對絨毛膜的穿透能力遠大于其他可引起生殖道感染的致病菌如大腸埃希菌等,故由GBS造成的羊膜腔感染病情也更嚴重。

2GBS與新生兒及嬰兒感染

目前普遍以患兒發病時間及臨床表現的差異為分類依據，將新生兒和嬰兒GBS感染分為兩型。(1)早發型感染：患兒出生后7 d內發生且以生后24 h內發生多見，主要臨床表現為肺炎和敗血癥，其中GBS肺炎可有發紺、呼吸暫停及呼吸窘迫等嚴重癥狀。(2)晚發型感染：患兒出生7 d后至出生后3個月發生，多見于足月兒，常呈隱匿性發病，主要臨床表現為發熱、嗜睡和顱內高壓等，若伴發敗血癥則預后較差。

3GBS的檢測

3.1微生物學檢驗方法GBS培養是檢測GBS感染的重要方法之一。雖然GBS培養所需時間較其他檢測方法長且陽性率不高,但可利用培養出的細菌進行進一步深入研究，并且可根據藥敏試驗結果選擇敏感抗菌藥物治療。

3.2免疫學檢驗方法

3.2.1乳膠凝集法實驗原理為檢測GBS莢膜多糖抗原，采用吸附了抗GBS莢膜多糖抗體的膠乳混懸液進行檢驗。此種方法敏感度高，操作簡便且成本低廉,適合進行快速檢測時使用。

3.2.2免疫層析法免疫層析法是一種快速且步驟簡單的檢測GBS抗原的方法。當標本含有GBS抗原時，其可與染料或膠體金等標記的針對GBS的單克隆抗體特異性結合形成抗原抗體復合物，此復合物可被固相化的多克隆抗體捕獲從而產生有色條帶[11]。

3.3分子生物學檢驗方法

3.3.1斑點印跡法Mavenyengwa等[12]將GBS被熱十二烷基硫酸鹽溶液裂解的裂解物經過聚丙烯酰胺凝膠電泳轉移至PVDF膜后,依次與抗-R3單克隆抗體以及耦聯過氧化物酶的抗IgM抗體反應,產物與底物顯色后產生有色斑點。此方法特異性較高，但對操作人員及實驗設備要求嚴格。

3.3.2PCR技術

3.3.2.1常規PCRJordan等[13]采用單一PCR技術，Rallu等[14]使用實時熒光定量PCR技術分別檢測GBS的16S rDNA以及編碼C5a肽酶的scpB基因。Parham等[15]通過定量PCR技術檢測被探針捕獲到的GBS基因組DNA，該寡核苷酸探針長度不同，以cfb基因為靶基因。此方法可將特異性的GBS基因片段濃集、純化，使得高效檢測GBS成為可能。

3.3.2.2多重PCRPoyart等[16]采用以莢膜多糖cps基因為靶基因的多重PCR技術檢測已知的多種GBS莢膜多糖。Zeng等[17]、Zhao等[18]使用從Ⅰa到Ⅷ共9個GBS血清特異性基因以及7個表面蛋白抗原基因和cfb菌種特異性基因為靶基因，設計出33種引物和34種探針，這種多重PCR-反向線點雜交技術(mPCR/RLB)可同時檢測GBS的分子血清型和表面蛋白基因。此技術與多重PCR方法相比提高了GBS檢測的靈敏度和特異性以及檢測效率，可避免交叉反應，在大規模的GBS流行病學調查研究時更加適宜使用。此外，Wen等[19]采用DNA芯片技術檢測9種GBS血清型，可用于GBS血清特異性疫苗的研制以及GBS的發病機制研究。

4GBS預防策略的進展

從妊娠期抗菌藥物預防(IAP)到疫苗，美國疾病預防控制中心于2010年頒布了《圍產期GBS預防指南》，針對妊娠期GBS的預防和控制提出了兩種方案，該方案已被美國婦產科學院、護士助產士協會、藥理學會、流行病學會、兒科學會及微生物學會認可。方案一：對所有孕婦于妊娠35～37周時進行GBS篩查。方法是將陰道前端及直腸采集的標本進行細菌培養。因使用平板直接接種與使用增菌肉湯接種相比約有50%的GBS攜帶者出現假陰性結果，故推薦使用增菌肉湯培養來提高檢出率。對培養結果為陽性的孕婦進行青霉素預防性治療。方案二：對下列高危情況者直接給予青霉素預防性治療：妊娠37周之前分娩、產時體溫大于或等于38 ℃，破膜時間大于或等于18 h、上次新生兒GBS感染史,以及本次妊娠有GBS菌尿。

研究表明，近年來GBS對青霉素耐藥率隨著抗菌藥物廣泛使用而逐漸升高，而對紅霉素和克林霉素的耐藥率已從小于5%升至20%～30%[20-21]。Pettersson等[22]認為，IAP雖能使新生兒早發型GBS感染率降低，但新生兒晚發型GBS感染率不能降低。IAP還可能通過母體影響新生兒腸道內環境，增加了由于耐藥的革蘭陰性菌引起的新生兒膿毒癥的發病率和病死率。因此，目前認為疫苗接種是預防GBS感染的一種更加有效的方法，其不僅可防止新生兒發生GBS感染，而且也可預防諸如流產、死產和產婦菌血癥[23-24]等其他GBS相關疾病的發生。

5結論

目前，新生兒GBS感染已引起全球公共衛生機構的廣泛關注。GBS疫苗是預防感染的有效途徑，研發安全有效的GBS疫苗已成為熱點[25-26]，但仍有部分問題尚未解決[27]，例如如何延長疫苗保護時間以及研制針對不同GBS血清型的疫苗。針對致病性強的GBS血清型如Ⅰa型、Ⅰb型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅴ型制備多效價GBS疫苗的技術仍處于臨床Ⅰ期、Ⅱ期實驗階段[28]。GBS疫苗研制的重點主要集中在如何選用GBS表面蛋白方面，如C蛋白復合體中的A、B抗原[29]、RIB蛋白、R蛋白等；此外，載體蛋白與莢膜多糖耦聯的結合疫苗，以及基因工程疫苗等均在研制過程中。Valentin-Hansen等[30]的研究結果顯示目前GBS的蛋白-多糖疫苗已進入三期臨床實驗階段，這將對GBS感染的預防起到重大作用。

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(收稿日期：2015-12-08)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.04.038

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)04-0521-03

作者簡介：王欣，女，主管檢驗師，主要從事微生物檢驗研究?！魍ㄓ嵶髡?，E-mail:weichaojun0312@126.com。