干黃茶乳劑對慢性牙周炎患者齦溝液中TNF-α、IL-6 和IL-10水平的影響及療效觀察

李海燕林洋洋徐 丹鄒玉龍叢軍茲

（1牡丹江醫學院紅旗醫院藥學部，牡丹江，157000；2牡丹江醫學院紅旗醫院口腔科，牡丹江，157011；3牡丹江醫學院紅旗醫院經內一科，牡丹江，157011）

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干黃茶乳劑對慢性牙周炎患者齦溝液中TNF-α、IL-6 和IL-10水平的影響及療效觀察

李海燕1林洋洋2徐 丹3鄒玉龍1叢軍茲1

（1牡丹江醫學院紅旗醫院藥學部，牡丹江，157000；2牡丹江醫學院紅旗醫院口腔科，牡丹江，157011；3牡丹江醫學院紅旗醫院經內一科，牡丹江，157011）

摘要目的：觀察干黃茶乳劑對慢性牙周炎患者齦溝液中TNF-α、IL-6和IL-10水平的影響及其療效。方法：慢性牙周炎患者82例隨機分為治療組（41例）和對照組（41例）。2組患者均給予齦上潔治、齦下刮治和根面平整等常規牙周基礎治療。治療組給予干黃茶乳劑注滿牙周袋內，對照組給予等量復方碘甘油液。1次／周，連續6周治療。觀察2組患者治療前后齦溝液中TNF-α、IL-6和IL-10水平變化，比較臨床有效率。結果：治療結束后，2組患者齦溝液中TNF-α、IL-6水平均明顯下降，IL-10水平明顯升高（P＜0. 05或P＜0. 01），且治療組下降或升高幅度較對照組更顯著（P＜0. 05）。治療組臨床總有效率為95. 12%，明顯優于對照組75. 61%（P＜0. 05）。結論：干黃茶乳劑局部治療慢性牙周炎的效果良好，能夠降低齦溝液中TNF-α、IL-6水平，提高IL-10水平，從而有效控制牙周組織炎性反應損傷，改善局部炎性反應狀況。

關鍵詞慢性牙周炎；干黃茶乳劑；炎性因子；療效

The Influence of Ganhuangcha Cream on TNF-α，IL-6 and IL-10 Levels ln Glnglval Crevlcular Fluld of Patlents wlth Chronlc Perlodontltls and lts Curatlve Effect

Li Haiyan1，Lin Yangyang2，Xu Dan3，Zou Yulong1，Cong Junzi1
（1 Department of Pharmacy，Hongqi Hospital of Mudanjiang Medical College，Mudanjiang 157000，China；2 Stamotology Department of Hongqi Hospital of Mudanjiang Medical College，Mudanjiang 157011，China；3 First Internal Medicine Department of Hongqi Hospital of Mudanjiang Medical College，Mudanjiang 157011，China）

Abstract Objectlve：To observe the influence of Ganhuangcha cream and its influence on tumor necrosis factor-α（TNF-α），interleukin-6（IL-6）and interleukin-10（IL-10）levels in gingival crevicular fluid of patients with chronic periodontitis. Methods：A total of 82 cases of patients with chronic periodontitis were selected and divided into observation group（41 cases）and control group（41 cases）by random number table. All patients were given the routine periodontal non-surgical treatment，including supragingival scaling，subgingival scaling，scaling and root planning. The patients in the observation group were given Ganhuangcha cream filled in the periodontal pockets，and the control group were given compound iodine glycerol liquids，the treatment was performed once a week，lasting for 6 weeks. The changes in TNF-α，IL-6 and IL-10 levels in gingival crevicular fluid of patients before and after treatment were observed，and the curative effect was compared as well. Results：After treatment，the levels of TNF-α and IL-6 in the two groups were obviously declined，and the IL-10 levels were obviously increased（P＜0. 05 or P＜0. 01）. Besides，the change degree of the observation group was much higher than that of the control group（P＜0. 05）. The total clinical efficiency in the observation group（95. 12%）was much higher than that of the control group（75. 61%）（P＜0. 05）. Concluslon：Ganhuangcha cream has favorable clinical effect in treating chronic periodontitis. It can reduce TNF-α and IL-6 levels in gingival crevicular fluid and increase IL-10 levels；thus controlling the inflammatory damage in periodontium effectively and improving the local inflammation. .

Key Words Chronic periodontitis；Ganhuangcha cream；Inflammatory factors；Curative effect

慢性牙周炎是口腔科常見的多發常發疾病，嚴重影響人們的生活質量?，F代研究表明慢性牙周炎是由牙菌斑中細菌及其產物引起牙齦及牙周組織的慢性炎性反應性疾?。?］。慢性牙周炎的病變過程復雜，其發生與牙菌斑微生物激活宿主免疫機制破壞，引起炎性反應細胞因子產生并釋放密切相關［2］。目前牙周的基礎治療只能對牙石及菌斑進行清理，而對炎性反應的控制效果不顯著。干黃茶乳劑是由干姜、黃連和兒茶等中藥組成，并根據處方中各藥材有效成分或有效部位的理化特性通過正交試驗篩選出的最佳的熱回流提取工藝而制成［3］，且對可二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹和蛋清所引起的大鼠足跖腫脹具有明顯抑制作用［4］。本研究觀察了干黃茶乳劑對慢性牙周炎患者齦溝液中TNF-α、IL-6及IL-10水平的影響及療效，初步探討其對牙周炎性反應狀態的影響，現報道如下。

1　資料與方法

1. 1 一般資料 收集2012年1月至2013年1月牡丹江醫學院紅旗醫院口腔科門診進行牙周治療的慢性牙周炎患者82例，所有納入慢性牙周炎患者均符合《牙周病學》診斷標準［5］。納入標準：患者現存自然牙≥20顆，牙齦指數≥2，牙周袋深度≥4 mm。排除標準包括：1）急性牙周炎及牙髓疾??；2）心血管疾病、糖尿病、感染性疾病等；3）治療前3周使用過抗炎性藥物及抗炎性漱口藥水等；4）近期進行過牙周治療患者；5）不愿進行本研究治療患者。本研究經我院倫理委員會批準，在實驗開始前告知所有患者并簽署知情同意書。采用隨機數字表方法將所有入選患者隨機分為治療組和對照組，2組分別41例。2組患者性別、年齡和病程時間方面進行比較，差異無統計學意義（P＞0. 05），2組之間具有可比性，見表1。

表1　一般資料比較（±s）

表1　一般資料比較（±s）

組別　　例數　　性別男　　女　　年齡（歲）　　病程（月）治療組41　 22　 19　 47. 9±4. 3　 15. 9±3. 6對照組41　 21　 20　 48. 1±3. 8　 16. 2±2. 5

1. 2 治療方法 對2組患者均給予牙齦上潔治，牙齦下刮治和牙根面平整等基礎治療。治療組給予干黃茶乳劑（本院制劑室提供，濾液濃縮至0. 3 g／mL，配置藥物濃度為80%干黃茶乳劑），注入牙周袋內；對照組給予等量復方碘甘油液注入牙周袋內，告知受試者1 h內勿飲食及漱口等，待藥物充分發揮療效。2組治療均同時進行，1次／周，連續6周進行治療，在治療期間內2組受試者均不服用其他藥物和采用其他治療手段。

1. 3 觀察指標

1. 3. 1 齦溝液中TNF-α、IL-6及IL-10水平測定將消毒濾紙（3 mm×9 mm）插入牙周袋內取樣位點獲取齦溝液樣本，每個受試者取位點均選擇在相同或相近位置，將取樣濾紙稱重，放入EP管中置于－70℃存放。采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）測定樣本中TNF-α、IL-6及IL-10水平含量，實驗所需試劑盒均由北京華英生物有限公司提供。

1. 3. 2 療效評估 療效評估標準參照趙軍［6］等預后評估分級方法。顯效：牙周袋深度減小≥2 mm，牙齦指數降低≥1／2，臨床癥狀基本消失或較治療前明顯改善；有效：牙周袋深度減小≥1 mm，臨床癥狀較前減輕；無效：牙周袋深度無明顯變化或加深，臨床癥狀無改變或加重。以顯效和有效合計為總有效。

1. 4 統計學分析 所有實驗數據均采用SPSS 17. 0統計學軟件進行統計，所有計量資料均采用（±s）表示，組間比較采用t檢驗；所有計數資料采用χ2檢驗，P值以0. 05作為統計學差異的標準。

2　結果

2. 1 2組患者治療前后TNF-α、IL-6和IL-10水平變化 在治療前，2組患者齦溝液中TNF-α、IL-6和IL-10水平比較差異無統計學意義（P＞0. 05）。治療后2組患者齦溝液中TNF-α、IL-6水平分別與治療前比較，均明顯下降（P＜0. 05），其中治療組下降更為明顯（P＜0. 01），2組比較差異具有統計學意義（P＜0. 05）。治療后2組IL-10水平分別與治療前比較，均表現為升高，其中治療組升高更加明顯（P ＜0. 01），治療組水平較對照組差異具有統計學意義（P＜0. 05）。參見表2。

表2　2組患者治療前后TNF-α、IL-6和IL-10水平

2. 2 2組患者治療后療效對比 在完成連續6周治療后，治療組患者的臨床總有效率為95. 62%，對照組的臨床總有效率為76. 41%，2組比較顯示，治療組明顯優于對照組（P＜0. 05）。見表3。

表3　2組患者治療后療效對比

3　討論

隨著現代研究對牙周炎發病機制的深入，慢性牙周炎牙周組織的損傷主要由于牙周局部微生態平衡紊亂、宿主免疫炎性反應等等因素共同導致［7-9］，其炎性反應過程容易反復交替持續發作［10］。當炎性反應發作時，牙周袋內的細菌毒素及其分泌物可以通過受損上皮進入血液系統，激活體內的免疫系統，從而促使免疫細胞活化，釋放大量的免疫炎性分子參與炎性反應［11-12］，其中促炎性反應因子和抗炎因子的失衡對疾病的產生起重要作用［13］。TNF-α一種具有廣泛生物活性的低分子蛋白質，在炎性反應的發生過程中會大量分泌，激活炎性反應遞質、趨化因子等從而啟動炎性反應，刺激成纖維細胞、基質細胞等導致結締組織和骨質破壞，從而導致牙周組織的損傷［14］。IL-6是一種多功能的炎性因子，其與人體免疫、造血等密切相關。在慢性牙周炎中，IL-6參與了炎性分子的生成調節及牙槽骨的破壞，加重炎性反應，抑制了牙周組織的修復［15］。IL-10是主要由單核巨噬細胞、活化的B細胞等分泌的一種抗炎性反應因子，其可以抑制多種炎性反應遞質的產生，縮小炎性反應范圍，減輕牙齦組織炎性反應狀況，防止牙槽骨吸收，起到抗炎和修復作用［16］。這幾種主要的炎性反應小分子物質在牙周炎的發病發展過程中具有十分重要的作用。

慢性牙周炎是局部慢性炎性反應性疾病，局部用藥是較為適合的方法，且臨床應用較為普遍。干黃茶乳劑是由中藥干姜、黃連和兒茶3種中草藥配伍組成，并根據處方中各藥材有效成分或有效部位的理化特性，以水為溶劑，以正交試驗篩選出的最佳提取時間、次數等，采用熱回流提取法加工而成。先前研究表明其對制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹和蛋清所引起的大鼠足跖腫脹具有明顯的抑制作用，其具有良好的抗炎性［4］。本研究顯示，與治療前比較，2組慢性牙周炎患者在治療后TNF-α、IL-6水平均降低，IL-10水平均升高，且與對照組比較治療組降低或升高的范圍更明顯（P＜0. 05），表明干黃茶乳劑能夠有效的減少促炎性反應因子的產生，增強局部抗炎性反應因子的分泌，達到抑制局部炎性反應發展、控制牙周組織炎性損傷及改善牙周局部組織的炎性反應狀況。2組患者治療后總有效率比較，治療組明顯優于對照組（P＜0. 05），表明干黃茶乳劑對于慢性牙周炎患者的治療效果具有較高的有效率，可以推廣使用。

本研究顯示干黃茶乳劑能夠有效調節局部炎性反應因子水平，改善慢性牙周炎患者牙周組織局部炎性反應狀態，促進牙周病變修復，有效治療慢性牙周炎。

參考文獻

［1］陳宏宇，巫家曉.牙周炎的研究進展［J］.醫學綜述，2013，19（6）：1037-1039.

［2］Tancharoen S，Matsuyama T，Kawahara K，et al. Cleavage of host cytokeratin-6 by lysine-specific gingipain induces gingival inflammation in periodontitis patients［J］. PLoS One，2015，10（2）：e117775.

［3］翟登奎，陳巖.干黃茶乳膏提取工藝研究［J］.哈爾濱醫科大學學報，2008，42（6）：658-659.

［4］米娜，翟登奎，畢良佳，等.干黃茶乳劑的抗炎藥效學及毒理性研究［J］.口腔醫學研究，2009，25（4）：427-429.

［5］孟煥新.牙周病學［M］. 3版.北京：人民衛生出版社，2008：156-158.

［6］趙軍，甘慧玲，黃月霞，等.米諾環素軟膏對慢性牙周炎患者齦溝液中炎性反應因子水平的影響及療效觀察［J］.中國藥物與臨床，2013，13（12）：1592-1593.

［7］Jin Y，Wang L，Liu D，et al. Tamibarotene modulates the local immune response in experimental periodontitis［J］. Int Immunopharmacol，2014，23（2）：537-545.

［8］Hajishengallis G. Periodontitis：from microbial immune subversion to systemic inflammation［J］. Nat Rev Immunol，2015，15（1）：30-44.

［9］Wang L Y，Jin Y，Lin X P. The role of adaptive immune response in periodontitis［J］. Chinese Journal of Stomatology，2013，48（2）：115-118.

［10］鄒亞光，黃琪，張萍.中西醫結合治療正畸患者牙周炎臨床研究［J］.遼寧中醫藥大學學報，2010，12（8）：33-34.

［11］Jakovljevic A，Knezevic A，Karalic D，et al. Pro-inflammatory cytokine levels in human apical periodontitis：Correlation with clinical and histological findings［J］. Aust Endod J，2014. doi：10. 1111／aej. 12072.

［12］Moradi J，Abbasipour F，Zaringhalam J，et al. Anethole，a Medicinal Plant Compound，Decreases the Production of Pro-Inflammatory TNF-alpha and IL-1beta in a Rat Model of LPS-Induced Periodontitis［J］. Iran J Pharm Res，2014，13（4）：1319-1325.

［13］Zhang YM，Zhong LJ，Liang P，et al. Relationship between microorganisms in coronary atheromatous plaques and periodontal pathogenic bacteria［J］. Chin Med J（Engl），2008，121（8）：1595-1597.

［14］李巖濤，賀蘭，李潔，等.牙周炎齦組織腫瘤壞死因子α的含量及其與牙周炎的關系［J］.口腔醫學，2002，22（1）：12-14.

［15］吳亞菲，趙川江，張靜儀，等.牙齦溝液中白細胞介素-6含量與牙周炎關系的研究［J］.華西醫科大學學報，2000，31（4）：494-496.

［16］于新波，鐘德鈺，許曉燕，等.慢性牙周炎患者牙周治療前后齦溝液中白介素-10水平的變化［J］.口腔醫學，2006，26（5）：373-375.

［17］王科峰，楊海卿.中藥抗菌作用研究思路探討［J］.臨床合理用藥雜志，2012，5（3B）：83-84.

（2015－09－15收稿 責任編輯：王明）

老中醫經驗

中圖分類號：R285. 6

文獻標識碼：A dol：10. 3969／j. issn. 1673－7202. 2016. 02. 020

通信作者：鄒玉龍（1989. 04—），男，碩士，主要從事中藥藥理學研究工作，E-mail：450191181＠qq. com

作者簡介：李海燕（1986. 07—），女，碩士，主要從事臨床藥學研究工作，E-mail：lihaiyan37＠163. com

基金項目：黑龍江省衛生廳科研課題（編號：2004-089）——干黃茶乳劑對牙周炎治療機制的研究