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豬支原體肺炎合并鏈球菌病的診斷與防治

2016-04-08 12:56:35林達芳重慶市墊江縣畜牧生產站
獸醫導刊 2016年5期
關鍵詞:血清

林達芳/重慶市墊江縣畜牧生產站

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豬支原體肺炎合并鏈球菌病的診斷與防治

林達芳/重慶市墊江縣畜牧生產站

2015年3~7月,墊江縣幾個豬場的仔豬及育肥豬出現以咳嗽、呼吸困難、發病率高、死亡率高為特征的豬傳染病。筆者對該病進行了流行病學調查、臨床診斷、病理剖檢、病原分離、生化鑒定和動物實驗等確診為豬支原體肺炎合并鏈球菌病。現報告如下:

(一)發病情況

三月,A場的125頭80 kg左右的豬全部發病,突然不食,體溫升高,咳嗽,腹式呼吸,經藥物治療,有一定好轉,但始終不能完全恢復,后被迫淘汰,于全群轉出后的當晚將整個場地徹底消毒后,又將146頭40 kg的豬轉入此場,第二天,后進這一批又全群發病,同時,另有56頭太湖后備母豬也發病,后經過積極處理,得以控制。其附近一豬場共有86頭育肥豬也同樣遭此命運。

B場于三月從外縣引進20 kg左右仔豬562頭,進場后即有部分豬發病,主要癥狀是喘氣、呼吸困難,用藥物得以控制,但此病在豬群中都有零星散發,其中死亡23頭,在5月5日用水給豬沖水時由于水溫只有4℃~7℃,第二天全群發病,共死亡45頭。

C場于三月從外縣引進仔豬182頭,陸續有仔豬發病,死亡26頭。

(二)臨床癥狀

精神不振,頭下垂,呼吸次數增加,伸頸呼吸,甚者呈犬坐姿勢,腹壁起伏明顯,不時發出哮喘聲,有的口鼻流出淡紅色泡沫。體溫多在40℃左右。食欲減退、廢絕。耳根、腹側、四肢內側皮膚出現彌漫性暗紅色紫斑。有的豬不能站立,跛行;有的四肢作游泳狀。

(三)病理變化

肺水腫,氣腫,在肺的心葉、尖葉、中間葉及膈葉的前下部,出現融合性支氣管肺炎變化,病變的顏色為淡灰色或灰紅色,病變部界限明顯,像鮮嫩的肌肉樣。肺門淋巴結和縱膈淋巴結顯著腫大,呈灰白色,邊緣輕度充血。

脾臟腫大、柔軟,呈暗紅紫色,切面濾泡及脾梁不明顯。

全身淋巴結有不同程度的腫大、充血和出血。

切開腫大的關節可見關節囊內有黃色膠凍樣液體,關節囊膜面充血、粗糙。

(四)實驗室檢驗

1.取病死豬肝、脾、淋巴結、腎制成觸片,干燥、固定、革蘭氏染色、鏡檢,可見革蘭氏染色陽性,并呈短鏈狀排列的球菌。無菌采取病料直接劃線于血清瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板、巧克力瓊脂平板,同時接種于皮克增菌液做鏈球菌選擇性增菌,37℃培養24 h后,挑取皮克增菌液轉接種于綿羊血瓊脂平板,挑取各類瓊脂平板上的可疑菌落,反復純化后做生化實驗,最終鑒定獲得一株細菌,即β溶血性鏈球菌。選取病料接種于馬丁肉湯培養基,經24 h培養,取培養物0.2 ml皮下注射小鼠,實驗組小鼠均于48 h以內死亡,對照組全部健活。

2.微量全血-酶聯免疫吸附試驗(微酶試驗)。用消毒針頭點刺豬耳背側靜脈,用定量移液管吸取0.1 ml血液,滴于新華濾紙上,自然風干,制成全血紙片送檢。將干血紙片按血滴大小剪下,放入試管中,加入被檢血樣稀釋液2.5 ml作1∶25倍稀釋。

支原體抗原、酶標記抗體、標準陰、陽性血清均為0.1 ml、凍干包裝,由吉林獸醫科學研究所提供。

取聚苯乙烯微量反應板每孔加入稀釋抗原200 uL(最后一孔不加抗原,為底物對照孔)37℃水浴作用3 h后,置4℃過夜。

次日,用洗滴液沖洗3次,甩干后每孔加被檢血樣200 uL(最后第2列孔加標準陰性對照血清、標準陽性對照血清200 uL)37℃作用2 h。

甩干血樣液,洗滌3次,甩干各孔分別加入已稀釋標記抗體200 uL,置37℃水浴作用2 h。

用去酶標記抗體,洗滌3次,甩干,加入底物溶液200 uL,置37℃水浴作用20 min后取出,每孔加50 uL 2 mol/L硫酸液中止反應。

以底物對照孔校正酶標測定儀,在波長490 nm,測光密度值(OD)。

結果判定:以被檢血樣孔OD值為S,標準陰性對照血清孔OD值為N,S/N比值進行判定。其標準為:

判定標準:

S/N 判定結果 S/N 判定結果<1.4 - 2.6~3.0 + + + 1.4~2.0 + >3.1 + + + + 2.1~2.5 + +

三個豬場共采集血樣86份,其結果如下:

結果及份數 - + + + + + +  + + + + 86 4 8 16 21 37

3.采集病豬血清20份,用正向間接血凝試驗檢測,豬瘟抗體滴度>4 Log2的有19份,有效免疫抗體合格率為95%。

4.采用北京望爾生物公司生產的高致病性藍耳病抗體檢測ELISA試劑盒檢測18份豬血清樣品,結果全部為陰性。

經上述診斷,此三批豬為支原體合并鏈球菌感染。

(五)治療措施

1.預防和控制本病主要在于堅持預防為主,采取綜合性防制措施。堅持自繁自養的原則,確實需引進豬時,引入后應遠離生產區隔離飼養3個月,并經檢疫證明無疫病,方可混群飼養。發現喘氣病陽性的病豬,應立即隔離治療,治愈后再接種疫苗。

2.給種豬和新生仔豬接種豬喘氣病滅活疫苗和鏈球菌苗,以提高豬群免疫力。

3.每噸飼料中添加80%泰妙菌素50 g和金霉素150 g,或利高霉素(林肯霉素+壯觀霉素)1 000 g,可有效預防和治療豬喘氣病和鏈球菌病。

4.對已感染喘氣病及鏈球菌病的豬群要精心護理,隔離飼養。對咳嗽嚴重的豬群,可考慮以濕料分餐飼喂。及時淘汰治療效果不佳的病豬和僵豬,防止疫病的傳播。

5.病豬可使用氟苯尼考、林肯霉素、頭孢等肌肉注射,重者可在充分保定的情況下進行胸腔注射、腹腔注射、耳靜脈滴注。對呼吸困難者,使用氨茶堿等;對體弱者可采用支持療法。

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