梔子的化學(xué)成分研究

【摘要】目的：對梔子果實(shí)進(jìn)行化學(xué)成分研究。方法：應(yīng)用硅膠柱色譜、ODS、制備型高效液相色譜等方法進(jìn)行分離純化，通過渡譜解析進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果：從乙醇提取物中分離得到3個化合物，分別為p-谷甾醇（1），七葉苷（2），淫羊藿次苷D2（3）。

【關(guān)鍵詞】梔子；化學(xué)成分

梔子為茜草科（Rubiaceae）植物梔子干燥成熟果實(shí)，主產(chǎn)于浙江、福建等地。該藥最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，性寒，味苦，歸心、肺、三焦經(jīng)，具有瀉火除煩，清熱利尿，涼血解毒的功效，外用消腫止痛。文獻(xiàn)報道，該植物中含有環(huán)烯醚萜類化合物，有機(jī)酸類、黃酮類、香豆素類、及其他類化合物。現(xiàn)代藥理作用表明梔子具有抗炎、抗氧化、鎮(zhèn)痛、防輻射、降血脂等多種生物活性，成為研究的熱點(diǎn)。為更好的對該植物進(jìn)行開發(fā)利用，闡明藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)對其進(jìn)行了化學(xué)成分研究。

筆者對梔子進(jìn)行了系統(tǒng)的提取分離和結(jié)構(gòu)鑒定。通過硅膠柱層析、反相ODS柱層析和分析及制備型HPLC等分離方法，分離出5個化合物。應(yīng)用¹H-NMR、¹³C-NMR等波譜學(xué)測試技術(shù)，結(jié)合ESI-MS和HR-ESI-MS鑒定了其中3個化合物的結(jié)構(gòu)。

1 儀器與材料

Bruker-500型超導(dǎo)核磁共振光譜儀；制備型HPLC采用Waters公司的Delta-600-2487型；分析型色譜柱采用大連依利特公司Hypersil ODS Ⅱ（5μm4.6x200mm）；化學(xué)試劑為分析純（天津市試劑一廠公司生產(chǎn)）；顯色劑：10%的硫酸/乙醇溶液。

2 提取與分離

將llkg梔子破碎后，用95%乙醇回流提取兩次，每次2h，合并提取液，減壓濃縮至無醇味。將濃縮液加適量水稀釋，用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇依次梯度萃取。正丁醇部分（9lg）反復(fù)用硅膠柱色譜，ODS反相柱色譜、制備型HPLC以及其它現(xiàn)代分離技術(shù)與方法對該部分進(jìn)行分離，共分離得到5個單體化合物。經(jīng)理化分析及各種波譜數(shù)據(jù)的綜合解析，共鑒定了3個單體化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

3 化合物結(jié)構(gòu)的鑒定

3.1 化合物1的化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定

無色針狀結(jié)晶，易溶于氯仿。HR-ESI-MSm/z：413.2651[M-H]^-，化合物的分子式為C₂₉H₅₀0，不飽和度為5。

¹H-NMR（400MHz，CDCI₃）高場區(qū)顯示6個甲基信號δ0.61（3H，s，H-18）、0.88（3H，s，H-19）、0.86（3H，d，J=6.2，H-21）、0.80（3H，d，J=6.2，H-26）、0.97（3H，d，J=6.4，H-27）、1.09（3H，d，J=6.5，H-28）；δ5.11（1H，d，J=4.2，H-7）、5.30（1H，m，H-23）處氫質(zhì)子歸屬于雙鍵上質(zhì)子信號。

在¹³C-NMR（100MHz，CDCI₃）中可觀察到29個碳信號，歸屬如下：

δ36.4（c-1）、30.5（C-2）、70.7（C-3）、41.2（C-4）、139.6（C-5）、120.6（C-6）、30.8

（C-7）、28.0（C-8）、49.0（C-9）、35.4（C-1O）、20.0（C-11）、38.7（C-12）、41.2（C-13）、55.1（C-14）、25.1（C-15）、23.2（C-16）、55.7（C-17）、11.1（C-18）、18.3（C-19）、35.1（C-20）、18.7（C-21）、32.8（C-22）、27.2（C-23）、44.7（C-24）、28.2（C-25）、17.7（C-26）、18.1（C-27）、22.0（C-28）、10.7（C-29）。綜合以上核磁數(shù)據(jù)與胡雪艷等（2008）對照鑒定該化合物為B-谷甾醇。

3.2 化合物2的化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定

白色粉末，Molish陽性，異羥肟酸鐵反應(yīng)呈陽性，HR-ESI-MS m/z：341.0809[M+H]⁺，分子式C₁₅H₁₆O₉，不飽和度為8。¹H-NMR（400MHz，CD₃0D）δ：6.21（1H，d，J=9.6Hz，H-3），7.88（1H，d，J=9.6Hz，H-4），7.27（1H，s，H-5），7.01（1H，s，H-8），δ4.90（1H，d，J=7.8Hz）為葡萄糖端基質(zhì)子，δ3.28-3.91為糖的其他質(zhì)子信號；¹³C-NMR（100MHz，CD₃0D）δ：162.6（C-2），113.6（C-3），144.5（C-4），112.8（C-5），151.5（C-6），148.5（C-7），104.5（C-8），102.2（C-I’），74.1（C-2’），77.9（C-3’），71.7（C-4’），78.1（C-5’），62.0（C-6’）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道一致，鑒定該化合物為七葉苷。

3.3 化合物3的化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定

白色粉末，HR-ESI-MS m/z：301.1150[M+H]⁺，分子式C₁₄H₂₀O₇。¹H-NMR（400MHz，CD₃OD），δ：7.18（2H，d，J=8.3Hz）和7.09（2H，d，J=8.3Hz）處歸屬于苯環(huán)上兩組質(zhì)子信號；δ2.71（2H，t，J=7.3Hz）處信號推斷可能與仲碳連接；δ3.62（2H，m）處信號歸屬于氧代碳?xì)湫盘?；?.88（1H，d，J=7.8 Hz）為葡萄糖端基質(zhì)子信號，63.31-3.82為糖上的其他質(zhì)子信號。

¹³C-NMR（100MHz，CD₃0D）δ：133.2（C-1），131.8（C-2，6），116.7（C-3，5），156.6（C-4），38.3（C-7），63.3（C-8），101.5（C-1’），75.6（C-2’），78.8（C-3’），71.6（C-4’），78.7（C-5’），62.1（C-6’）。以上數(shù)據(jù)與張羅紅（2010）報道一致，鑒定該化合物為淫羊藿次苷D2。