芒果套袋前后噴施吡蟲啉·噻嗪酮農(nóng)藥的消解動(dòng)態(tài)研究

李胤均+錢程+謝德芳

摘要： 建立噴施清水的對(duì)照、套袋前噴藥、套袋后噴藥、不套袋噴藥4種處理方法，噴施38%吡蟲啉和噻嗪酮混合懸浮劑，建立芒果中吡蟲啉、噻嗪酮?dú)埩舻母咝б合嗌V（HPLC）檢測(cè)方法。結(jié)果表明，在0.05～0.5 mg/kg添加水平下，吡蟲啉和噻嗪酮的平均回收率分別為82.6%～93.8%、101.4%～104.2%，相對(duì)偏差（RSD）分別為1.9%～45%、9.3%～15.6%。芒果中吡蟲啉、噻嗪酮的最小檢出量均為0.01 mg/kg。吡蟲啉套袋前施藥、套袋后施藥、不套袋施藥3種處理方式下的半衰期分別是16.74、6.38、8.10 d。噻嗪酮在套袋前施藥、不套袋施藥2種處理方式下的半衰期分別是9.72、9.23 d。套袋后施藥的噻嗪酮的殘留量低，第3天已經(jīng)低于檢出限。套袋處理降低了2種農(nóng)藥在芒果上的消解速率，吡蟲啉在芒果上有較強(qiáng)的內(nèi)吸性。

關(guān)鍵詞： 吡蟲啉；噻嗪酮；芒果；動(dòng)態(tài)；內(nèi)吸性

中圖分類號(hào)： S481+.8 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2016）03-0276-03

我國(guó)于20世紀(jì)90年代從日本引進(jìn)套袋技術(shù)，主要應(yīng)用在蘋果、葡萄、梨等溫帶果樹上。近年來，隨著套袋技術(shù)的推廣，套袋技術(shù)在熱帶作物上的應(yīng)用也越來越普及。芒果是熱帶作物，栽培環(huán)境需要高濕高熱，常常會(huì)受到病菌、害蟲的侵襲。每年我國(guó)因病蟲害造成的芒果產(chǎn)量損失占總產(chǎn)量的30%[1]。套袋技術(shù)的應(yīng)用可以避免果實(shí)受病蟲害侵襲，減少機(jī)械損傷，提高外觀品質(zhì)，減少農(nóng)藥使用次數(shù)，對(duì)芒果的種植具有積極影響[2]。套袋技術(shù)不能完全代替農(nóng)藥對(duì)作物的保護(hù)作用。本研究探索對(duì)作物噴施農(nóng)藥的前提下如何更有效地使用套袋技術(shù)，確保農(nóng)藥在作物上的消解半衰期更短，從而指導(dǎo)實(shí)際生產(chǎn)。

國(guó)內(nèi)外關(guān)于芒果套袋研究較多，主要集中在套袋對(duì)果實(shí)品質(zhì)影響以及套袋對(duì)農(nóng)藥殘留的影響。一般認(rèn)為，套袋能提高芒果的外觀品質(zhì)，增強(qiáng)芒果表面的光潔度、減少斑點(diǎn)、改善色澤，從而提高芒果的商品品質(zhì)。套袋處理可以降低水果中的農(nóng)藥殘留。絕大多數(shù)農(nóng)藥殘留試驗(yàn)的處理方式是套袋后對(duì)果樹進(jìn)行噴藥處理[3-4]，這種處理減少了果實(shí)和農(nóng)藥的直接接觸，農(nóng)藥的原始積累量降低了，因此必定降低了農(nóng)藥殘留量。在實(shí)際生產(chǎn)中，芒果從保花保果到果實(shí)的最后成熟期間，往往多次噴藥，在未套袋之前，芒果可能已經(jīng)接觸到農(nóng)藥。且不同性質(zhì)的農(nóng)藥對(duì)最終殘留量也有較大影響，套袋前后噴藥對(duì)于內(nèi)吸性農(nóng)藥與不內(nèi)吸農(nóng)藥的影響也不相同。吡蟲啉是煙堿類超高效殺蟲劑，具有內(nèi)吸、胃毒、拒食等作用，目前已成為世界上普遍使用的農(nóng)藥品種[5-6]。我國(guó)對(duì)蚍蟲啉在芒果中的限量還未作規(guī)定，國(guó)際食品法典委員會(huì)（CAC）規(guī)定，吡蟲啉在芒果上的MRL值為0.2 mg/kg。噻嗪酮是抑制昆蟲生長(zhǎng)的新型選擇性殺蟲劑，對(duì)飛虱、葉蟬、粉虱有特效[7]。CAC規(guī)定，噻嗪酮在芒果中的MRL值為0.1 mg/kg。本研究通過建立吡蟲啉、噻嗪酮2種農(nóng)藥的HPLC方法，對(duì)比芒果套袋前后噴藥的消解動(dòng)態(tài)，研究套袋與施藥順序?qū)γ⒐限r(nóng)藥的消解影響，旨在為降低吡蟲啉、噻嗪酮2種農(nóng)藥在芒果中的殘留量提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要儀器、藥劑與試劑

waters 2695高效液相色譜配waters 2496紫外檢測(cè)器，乙腈（色譜純），IKAT25高速勻漿機(jī)（上海萬捷科技有限公司），R206旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海申生科技有限公司），AL204電子天平、DL 2002/01 電子頂載天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]，Srata NH2柱[500 mg/6 mL，NH2柱使用前用正己烷-丙酮（V/V為6 ∶ 4）溶液6 mL活化，美國(guó)Phenomenex公司]，乙腈、正己烷、甲醇（均為色譜純，上海Fisher Scientific公司），丙酮（色譜純，美國(guó)Tedia公司），氯化鈉（分析純，使用前160 ℃煅燒4 h，廣州化學(xué)試劑廠），吡蟲啉（純度為995%）、噻嗪酮（純度為99.6%）標(biāo)準(zhǔn)品。

1.2 方法

1.2.1 田間試驗(yàn) 芒果樹品種為臺(tái)農(nóng)，試驗(yàn)地點(diǎn)為海南省昌江天河農(nóng)場(chǎng)芒果園，選擇生長(zhǎng)狀況基本一致的芒果樹32棵，分成12個(gè)小區(qū)，每小區(qū)2棵樹，4種處理方法，每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)，4種處理方法分別為：噴施清水的對(duì)照，套袋前噴藥，套袋后噴藥，不套袋噴藥。所用的農(nóng)藥為38%吡蟲啉和噻嗪酮混合的懸浮劑，其中噻嗪酮含量為34%，吡蟲啉含量為4%，施藥濃度為379.5 mg/kg（有效劑量），套袋在第二次生理落果結(jié)束、芒果長(zhǎng)至雞蛋大小時(shí)進(jìn)行[8]。2014年4月15日對(duì)所選果樹進(jìn)行套袋和噴藥處理，采收距施藥間隔期為0、1、2、3、5、7、14、21、28、42 d，采果后當(dāng)天把芒果送往中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院分析測(cè)試中心，選擇果實(shí)大小、成熟度相同的果品進(jìn)行制樣檢測(cè)。

1.2.2 樣品前處理 樣品通過制樣機(jī)打成漿狀攪拌均勻，稱取25 g樣品置于干凈的燒杯中，加入50 mL乙腈，在勻漿機(jī)上勻漿3 min，過濾到裝有氯化鈉（已煅燒4 h）的具塞量筒內(nèi)，振蕩1 min后靜置1 h。待具塞量筒中溶液明顯分層且乙腈層澄清，用移液管移取10 mL乙腈于圓底燒瓶?jī)?nèi)，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，配制丙酮 ∶ 正己烷體積比為4 ∶ 6的淋洗液，用淋洗液潤(rùn)洗圓底燒瓶，過SPE NH2小柱，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干后定容。過0.22 μm濾膜，待測(cè)。

1.2.3 高效液相色譜檢測(cè)條件 色譜柱：waters C18色譜柱150 mm×4.6 mm，5 μm。流動(dòng)相：乙腈+超純水梯度洗脫（表1），流速為1.0 mL/min；進(jìn)樣量10 μL；柱溫40 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)：245、270 nm。

2 結(jié)果與分析

2.1 高效液相色譜檢測(cè)色譜圖

液相色譜中吡蟲啉出峰時(shí)間為2.272 min，噻嗪酮出峰時(shí)間為9.274 min（圖1、圖2）。

2.2 線性范圍和檢出限

在建立的色譜分析條件下，采用外標(biāo)法定量，以3倍信噪比（S/N=3）確定儀器的最低檢出限，結(jié)果顯示，吡蟲啉、噻嗪酮在芒果中的最低檢出限分別為0.005、0.01 mg/kg。其中標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)見表2。

2.3 方法的平均回收率和標(biāo)準(zhǔn)偏差

向空白的芒果樣品中添加3個(gè)濃度水平的2種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照上述的前處理以及儀器檢測(cè)方法進(jìn)行回收率試驗(yàn)，每個(gè)添加濃度做5個(gè)平行試驗(yàn)，結(jié)果見表3。2種農(nóng)藥的平均回收率為82.6%～104.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 1.9%～15.6%，符合農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.4 樣品檢測(cè)結(jié)果

從吡蟲啉、噻嗪酮在芒果中的殘留動(dòng)態(tài)曲線圖可以看出：吡蟲啉在套袋前施藥、套袋后施藥、不套袋施藥3種處理方法的原始累積量分別為0.463、0.071、0.367 mg/kg。噻嗪酮在套袋前施藥、套袋后施藥、不套袋施藥3種處理方法的原始累積量分別為0.460、0.05、0.299 mg/kg。因套袋處理方式不同，農(nóng)藥的原始累積量差異較大。2種殺蟲劑套袋前施藥的原始積累量大于不套袋，這可能是由于不套袋的果樹在施藥后，藥劑順著果實(shí)滴下，減少了果實(shí)上農(nóng)藥的原始積累量。套袋前施藥的果實(shí)，藥劑黏附在果袋上，與果實(shí)接觸，從而增加了果實(shí)的原始積累量（圖3、圖4）。

由圖3可以看出，3種處理方式下，施藥后吡蟲啉在芒果中的檢出量先逐漸上升，達(dá)到最高值后逐漸下降，第3天達(dá)到最高值。由此可知，吡蟲啉在芒果上具有內(nèi)吸性，果實(shí)中的農(nóng)藥除了噴施直接滲透外，還包括植物內(nèi)部的疏導(dǎo)組織從根部、葉片部分運(yùn)輸至果實(shí)。

由圖4可以看出，套袋前施藥和不套袋施藥處理下，噻嗪酮在芒果中的檢出量也呈先上升后下降的趨勢(shì)。套袋后施藥處理方式下，吡蟲啉、噻嗪酮在芒果中都有少量的原始積累量，這可能是由于對(duì)果樹噴施農(nóng)藥后，農(nóng)藥隨著果梗流到果實(shí)上。隨后吡蟲啉在果品中的檢出量升高，最高達(dá) 0.248 mg/kg，說明吡蟲啉在芒果上的內(nèi)吸性強(qiáng)。第3天噻嗪酮在芒果上的檢出量低于檢出限。

由圖5可以看出，套袋前施藥處理下，吡蟲啉的降解速率大于不套袋施藥處理，說明套袋減緩了吡蟲啉的降解速率。從表4可以看出，套袋后施藥處理下，吡蟲啉的半衰期為 6.38 d，是3種施藥處理中半衰期最短的方式。套袋前施藥處理下吡蟲啉半衰期最長(zhǎng)，達(dá)16.74 d。不套袋施藥處理下吡蟲啉半衰期是8.1 d。由此可見，套袋前施藥處理下，芒果果面受光照減少、雨水沖刷減少、空氣流動(dòng)減少等原因降低了吡蟲啉在芒果中的降解速率。套袋前施藥和不套袋施藥處理下噻嗪酮的半衰期變化不明顯，說明套袋對(duì)噻嗪酮的降解速率影響不大（圖6）。

3 結(jié)論與討論

本研究通過對(duì)套袋前、套袋后施藥方式進(jìn)行比較，探究吡蟲啉、噻嗪酮2種殺蟲劑在芒果上的降解動(dòng)態(tài)，顯示了內(nèi)吸性殺蟲劑吡蟲啉的特性，在芒果上即使沒有原始積累量，噴施在植株上的藥劑通過內(nèi)吸作用也可以到達(dá)芒果內(nèi)部，從而影響殘留量。Laurent 等利用14C 標(biāo)記吡蟲啉，用吡蟲啉包衣向日葵籽后檢測(cè)了向日葵植株不同生長(zhǎng)階段藥劑在不同部位的分布情況，結(jié)果表明，當(dāng)植株開花時(shí)，各個(gè)葉片中藥劑的含量不均勻，在向日葵植株中吡蟲啉具有明顯的頂端優(yōu)勢(shì)，向日葵最頂部葉片中的藥劑濃度是最底部葉片的20倍[9]。宗建平通過在番茄、甘藍(lán)葉片上噴施吡蟲啉，采集1、2、4、7、10 d的葉片，一部分葉片進(jìn)行沖刷處理，一部分葉片不沖刷，對(duì)比兩者中吡蟲啉的含量，確定吡蟲啉的內(nèi)吸性，結(jié)果表明，沖刷率在10 d內(nèi)基本保持不變，說明吡蟲啉在番茄、甘藍(lán)的葉片上不具備內(nèi)吸作用[10]。本研究結(jié)果表明，對(duì)芒果樹噴施吡蟲啉，其內(nèi)吸作用可以傳輸?shù)焦麑?shí)中。徐鳳仙研究噻嗪酮在柑橘內(nèi)的消解動(dòng)態(tài)，結(jié)果表明，噻嗪酮在柑橘內(nèi)無內(nèi)吸作用[11]。戴志一等用相同濃度的噻嗪酮對(duì)水稻進(jìn)行粗噴霧、潑澆、彌霧、毒土等不同施藥方式處理，發(fā)現(xiàn)水稻上的內(nèi)吸作用和稻莖對(duì)田水中藥劑的吸收、富集能力是該藥在田間長(zhǎng)效的主要原因[12]。本研究結(jié)果表明，噻嗪酮在套袋前施藥和不套袋施藥處理方式下都有內(nèi)吸現(xiàn)象，說明噻嗪酮在不同作物中的內(nèi)吸性不同。雖然套袋前施藥和不套袋施藥處理方式下噻嗪酮的消解趨勢(shì)均為先上升后下降，但套袋后施藥噻嗪酮沒有上升趨勢(shì)，因此不能確定噻嗪酮在芒果上是否具有內(nèi)吸性，應(yīng)開展進(jìn)一步研究。

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