門診患者血培養病原菌分布及耐藥性分析

吳慶，陳櫟江，徐春泉，周翠，張雪青，余方友，周鐵麗（溫州醫科大學附屬第一醫院　醫學檢驗中心，浙江　溫州　325015）

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門診患者血培養病原菌分布及耐藥性分析

吳慶，陳櫟江，徐春泉，周翠，張雪青，余方友，周鐵麗
（溫州醫科大學附屬第一醫院醫學檢驗中心，浙江溫州325015）

[摘 要]目的：了解本院門診患者血培養陽性標本的病原菌分布及耐藥情況，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據。方法：采用BacT/Alert 3D全自動血培養儀進行血培養，VITEK 2 COMPACT全自動微生物分析系統進行菌株的鑒定和藥敏試驗，使用Whonet 5.6軟件進行耐藥率分析。結果：從7 774瓶門診血培養送檢標本中共分離出病原菌1 221株，培養陽性率為15.7%，剔除重復株后陽性菌株為569株。其中革蘭陰性菌325株（占57.1%），包括大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌，分別占25.0%、12.8%和3.3%，并檢出沙門菌12株、創傷弧菌5株和布魯氏菌3株；革蘭陽性菌237株（占41.7%），包括表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌和人葡萄球菌等，分別占10.5%、6.2%和5.1%；真菌7株（占1.2%）。病原菌的耐藥率相對來說較低，肺炎克雷伯菌的產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）陽性率為11.1%，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的分離率為28.6%，腸桿菌科細菌對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥率小于1.0%，未發現耐萬古霉素葡萄球菌。結論：門診患者血培養的主要病原菌為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和金黃色葡萄球菌，并且這些細菌對臨床常用抗菌藥物有較好的敏感性。

[關鍵詞]血培養；血流感染；病原菌；耐藥性

血流感染（bloodstream infection，BSI）屬嚴重感染性疾病，病情兇險，病死率高。血培養是BSI診斷、治療和病情監測的關鍵，對臨床醫師合理使用抗菌藥物，控制BSI病原菌耐藥株的產生和發展，具有十分重要的臨床意義[1]。為此，本研究對溫州醫科大學附屬第一醫院2011年7月-2014年6月期間從門診BSI患者的血培養標本中分離到的非重復病原菌569株，對其菌群分布及耐藥性進行回顧性分析。現將結果報告如下。

1　材料和方法

1.1菌株來源 收集2011年7月-2014年6月期間溫州醫科大學附屬第一醫院門診送檢的7 774瓶血培養標本。

1.2儀器與試劑 BacT/Alert 3D全自動血培養儀及其配套血培養瓶，VITEK 2 COMPACT型全自動微生物分析儀及配套用細菌鑒定卡和藥敏卡均購自法國生物梅里埃公司。頭孢哌酮-舒巴坦和替考拉寧藥敏紙片購自英國Oxoid公司。

1.3菌株培養鑒定及藥敏 按《全國臨床檢驗操作規程》進行操作。無菌操作抽取靜脈血10～20 mL迅速注入到血培養瓶（需氧瓶和厭氧瓶）中（有條件者，可采集兩套或三套的血培養），立即送檢，將血培養瓶置于全自動血培養儀中進行培養，對陽性報警標本接種分離細菌。使用全自動微生物分析儀進行菌株鑒定及藥敏試驗。頭孢哌酮-舒巴坦和替考拉寧的藥敏試驗采用紙片擴散法（K-B法），藥敏結果判斷根據CLSI 2011年標準[2]判讀，質量控制以金黃色葡萄球菌ATCC 25923、大腸埃希菌ATCC 25922和銅綠假單胞菌ATCC 27853（均購自衛生部臨床檢驗中心）為標準菌株。

1.4統計學處理方法 使用Whonet5.6軟件進行耐藥率分析。

2　結果

2.1病原菌的檢出與分布 從7 774瓶門診患者血培養標本中培養分離病原菌1 221株，陽性率為15.7%，剔除重復菌株后為569株。其分布及構成比見表1。

2.2多藥耐藥菌檢出率 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）的檢出率分別為49.6%和11.9%；耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林的表皮葡萄球菌和耐甲氧西林人葡萄球菌的檢出率分別為28.6%、57.1%和76.0%。

2.3耐藥率 主要革蘭陰性菌及革蘭陽性菌對常用抗菌藥物的耐藥率見表2-3。

3　討論

BSI是一種嚴重的全身感染性疾病，如果不及時治療，患者的病死率高，危害重。國內外有很多文獻關于血培養病原菌的菌株分布及耐藥性分析，但很少有提到門診患者血培養的情況。

本研究結果顯示，7 774例門診患者血培養中，共檢出病原菌1 221株，檢出率為15.7%，遠高于國內一些文獻[3-4]的報道；革蘭陰性菌的檢出率高于革蘭陽性菌，與文獻[5-7]報道血培養分離病原菌的分布趨勢較為一致。其中，檢出的革蘭陰性菌以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌、沙門菌屬為主；革蘭陽性菌以表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌及人葡萄球菌為主，表皮葡萄球菌和人葡萄球菌等凝固酶陰性葡萄球菌是導管相關性血流感染（catheter related blood stream infection，CRBSI）的主要病原菌，因為門診患者大多沒有留置導管，并且這些凝固酶陰性葡萄球菌都是以單瓶血培養報陽性為主，所以筆者認為從門診患者血培養中檢到的凝固酶陰性葡萄球菌大部分是由于消毒不完全而導致的污染菌，而并非正常的病原菌；共檢出了7株真菌，只占所有病原菌的1.2%，這提示門診患者由真菌引起的BSI的比例是比較低的。

表1　血培養陽性病原菌的分布及構成比

本次研究還檢出了5株創傷弧菌和3株布魯氏菌。創傷弧菌所致的敗血癥病死率超過50.0%，所以如果檢到創傷弧菌一定要及時通知臨床，為患者的及時治療提供病原學依據。布魯氏菌是布魯氏菌病的病原體，布魯氏菌病主要發生在我國西部和北部的牧區，而我們本次研究的所在地為溫州市，屬

于我國的東南沿海城市，過去很少發現布魯氏菌病，而近3年，我院門診發現了3例該病例，因此臨床醫師尤其是感染科的醫師對此一定要特別關注。布魯氏菌對人有極強致病力，常導致實驗室獲得性感染。為了減少實驗室感染的發生，所有的血培養陽性標本的操作都應在生物安全柜內進行。

表2　主要革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥率

表3　主要革蘭陽性球菌對抗菌藥物的耐藥率

本次研究的藥敏結果顯示，腸桿菌科細菌對碳青霉烯類抗菌藥物高度敏感，對厄他培南和亞胺培南的耐藥率均小于1.0%，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs檢出率分別為49.6%和11.9%，遠低于衛生部全國細菌耐藥監測網的數據[8]。除了大腸埃希菌對部分臨床常用的抗菌藥物的耐藥率在50.0%以上，其他的腸桿菌科細菌如肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌和沙門菌屬細菌的耐藥率大部分都在20.0%以下。提示臨床常用抗菌藥物對門診BSI患者分離到的腸桿菌科細菌具有較好的抗菌活性。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的檢出率為28.6%，也遠低于衛生部全國細菌耐藥監測網的數據[8]；金黃色葡萄球菌除了對青霉素、克林霉素和紅霉素的耐藥率較高外，對于其他的臨床常用抗菌藥物都有較好的敏感性。

綜上所述，門診BSI患者的常見病原菌以腸桿菌科細菌和金黃色葡萄球菌為主，并且這些病原菌的耐藥率遠低于住院BSI患者的病原菌，所以臨床醫師應根據藥敏試驗結果合理選擇抗菌藥物，從而減緩或避免耐藥菌株的出現。

參考文獻:

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[2]Clinical Laboratory Standard Institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[S].CLSI,2011.

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[7]姚丹,余方友,黃曉穎,等.引起血流感染的大腸埃希菌的耐藥譜分析[J].溫州醫科大學學報,2014,44(12):917 -919.

[8]呂媛,李耘,薛峰,等.衛生部全國細菌耐藥監測網(Mohnarin)2011-20 12年度血流感染細菌耐藥監測報告[J].中國臨床藥理學雜志,2014,30(3 ):278-288.

（本文編輯：吳昔昔）

·消息·

Distribution and drug resistance of pathogenic bacteria isolated from blood culture in outpatients

WU Qing,CHEN Lijiang,XU Chunquan,ZHOU Cui,ZHANG Xueqing,YU Fangyou,ZHOU Tieli.Center for Clinical Laboratory,the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University,Wenzhou,325015

Abstract:Objective:To investigate distribution and drug resistance of pathogenic bacteria isolated from blood culture in outpatients,to provide reference for the clinical rational use of antibiotics.Methods:Blood samples were cultured by BacT/Alert 3D automated system,the identification of strains and the drug susceptibility testing were performed by VITEK 2 COMPACT system,the data were analyzed with Whonet 5.6 software.Results:Totally 1 221 strains were isolated from 7 774 blood culture specimens in outpatients,with the positive rate of 15.7%,there were 569 positive cultures after the repeated strains were get rid of.Among the bacterial strains ,the percentages of the gram-negative bacteria,gram-positive bacteria and fungi were 57.1% (325 strains),41.7% (237 strains) and 1.2% (7 strains),respectively.Pathogenic bacteria resistance rate was relatively low,the positive rate of ESBLs in Klebsiella pneumoniae was 11.1%,resistance of methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolation rate was 28.6%; separation of Enterobacteriaceae to carbapenem antibacterial drug resistance＜1.0%,vancomycin resistant Staphylococcus aureus did not be found.Conclusion:The main pathogens of outpatient blood culture are Staphylococcus aureus,Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae,and these bacteria are better sensitivity to commonly used antibiotics in clinical practice.

Key words:blood culture; bloodstream infection; pathogen; drug resistance

作者簡介：吳慶（1979-），男，浙江溫州人，主管技師。

基金項目：溫州市科技局科研基金資助項目（Y20130286）。

收稿日期：2015-05-19

[中圖分類號]R378

[文獻標志碼]B

DOI:10.3969/j.issn.2095-9400.2016.03.014