臨床微生物學檢驗在醫院感染檢測中的應用

張其鳳

【摘要】醫療中感染問題一直是困擾醫學界的一個難題，院內的交叉感染是引發多種感染性疾病、減慢康復速率、增加患者死亡率的主要根源。由于醫院中免疫抑制劑的應用、放化療的大力開展以及內科介入療法的廣泛應用，使得院內感染人數日益增多。臨床上微生物的檢驗主要針對傳染源、傳播途徑、易感人群這三個方面，切斷這三個方面中的任何一個方面都能有效降低院內感染的概率。現針對臨床微生物檢驗對有效控制醫院感染的價值進行討論。

【關鍵詞】臨床微生物；檢驗；感染檢測

【中圖分類號】R-0 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801（2016）02-0213-01

引言：醫院感染的發生包括3個重要的環節，即傳染原的存在、傳播途徑和易感人群，每個環節都和微生物學檢查有著極為密切的關系。醫院感染的發生主要有兩種類型，即外源性感染（系指由患者本身以外的微生物引起的感染）、內源性感染（系指由患者本身攜帶的微生物引起的感染）。要對不同類型的感染作出正確的診斷，必須進行微生物學檢查。因此臨床微生物學檢驗在醫院感染的診斷、監測，醫院感染的流行病學調查、消毒滅菌效果評價以及抗菌藥物的合理使用等方面，具有極其重要的作用。

1.常用微生物檢測技術

目前常用的微生物檢測技術有顯微技術、染色技術、分離純化技術、微生物鑒定技術、細菌診斷技術、聚合酶技術等幾大類。

1.1 顯微技術

顯微技術是微生物檢測中常用的技術之一，包括普通光學顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡等多種設備，在不同的檢測需求中所運用的檢測設備并不相同。顯微技術是微生物檢測中最為簡便，操作最為容易的檢測技術之一，但檢測結果準確度和檢測控制較差，直接觀測的結果有可能會產生極大的誤差。

1.2 染色技術

染色技術則是對微生物細胞進行染色后，對微生物進行觀察檢測的一種技術，不過由于染色后微生物標準基本是死的，其形態和結構會在染色過程中發生一定變化，無法切實反應出活細胞的真實情況，因此通常只作為輔助檢測手段。在實際操作中，整個流程也較為繁瑣，染色、脫色都需要嚴格控制，否則將會影響檢測結果的準確性。

1.3 分離純化技術

自然環境中的微生物通常是雜居混生的，在微生物檢測中需要對混生微生物群體進行分離純化，以對純微生物進行檢測的技術，分離純化技術常用于菌種鑒定中，分離純化技術是微生物檢測的一項重要技術，是微生物檢測的重要基礎。

1.4 其它技術

在微生物常規檢測中，通常對微生物進行形態結構、培養特性方面的觀察，再利用化學反應來測定微生物的代謝物，以鑒別一些形態和其它方面不易區別的微生物，以更好的進行微生物分類鑒定。近年來，在環境監測中，微生物檢測技術運用方法較為廣泛，如運用細菌總數和糞便污染指示菌監測水質，運用發光細菌檢測環境有毒物質，運用水中藻類生長量監測水質或物質霉性等等，這些方法都已經有了較為成熟的操作手段和檢驗標準，具有較強的實踐價值。。

2.臨床微生物檢驗技術的運用

2.1重視原始標本直接涂片的診斷價值

原始標本涂片檢查不僅對微生物檢驗全過程起著導向作用，還可快速為診斷提供有價值的信息。在細菌培養過程中，受細菌生長緩慢且培養特異性的制約，不能快速回報結果，可通過細菌培養前對標本進行涂片鏡槍，包括未染色濕片位相顯微鏡觀察和染色標本片檢查，結合患者的臨床表現，快速提供診斷信息，對一些感染性疾病特別是急重癥感染有重要的實用價值。例如無菌體液如血液、胸腹水、腦脊液等的陽性標本可直接根據涂片細菌形態和染色特征快速回報臨床，指導其經驗用藥，顯微鏡形態學在細菌鑒定中體現的價值遠甚于此，但是由于目前自動化儀器以及分子生物學技術的廣泛應用，臨床似乎有忽視形態學檢查的傾向，同時，由于缺少模式菌株形態學圖譜，以及鑒定鏡下形態需要豐富的經驗，更使得顯微鏡形態學檢查在各醫院開展困難重重，這就需要每一位檢驗工作者從態度上給予高度重視，平時苦練基本功，善于總結歸納。此外，相關機構應盡快建立形態學檢查的標準方法，使臨床有據可依，真正體現顯微鏡形態學的應有價值。

2.2發展快速準確的診斷技術

對于發病率和病死率很高的感染性疾病，特別對那些體外難培養的病原微生物，臨床迫切需要快速且準確的診斷方法。目前血清免疫學、多重聚合酶鏈反應（PCR）、基因芯片和多肽質譜分析等技術在微生物領域的應用，提高了疑難病原確診率。由于條件限制一些前沿技術很難在基層醫院開展，如何更有效地提高此類醫院對感染性疾病的快速診斷水平，是擺在每一位微生物檢驗工作者面前的一個嶄新課題。

2.3做好細菌藥敏試驗標準化

加強藥敏試驗標準化和規范化是獲得藥敏試驗準確性的關鍵。首先，準確的藥敏試驗需要合格的藥敏試劑和標準的試驗方法。目前國內許多醫院的微生物室采用K-B紙片擴散法進行藥敏試驗，該方法是美國臨床和實驗室標準化協會（CLSI）公認的藥敏試驗方法，但較易受紙片質量、M-H瓊脂厚度和菌液濃度等因素的影響，所以欲得到準確的藥敏結果，必須進行嚴格的室內質量控制，保證藥敏紙片以及M-H瓊脂等的在控狀態，同時也應充分了解K-B法的局限性，對于不能使用此法進行檢測的菌株，應參照CLSI推薦的最低抑菌濃度（MIC）法檢測；其次，臨床微生物檢驗工作者應注重自身業務能力的培養，隨著臨床對細菌耐藥性認識的不斷深入及新的抗感染治療藥物的層出不窮，古老的微生物學重新煥發了光彩，如何更好地了解細菌藥敏試驗，需要微生物檢驗工作者不斷地增加知識儲備，積極參加本專業學術交流，掌握細菌藥敏發展的新動向，積極參加室間質量評價，提高檢驗技術水平。

結束語

微生物檢驗技術正朝著簡便、高效、快速、自動化方向發展，許多新的檢測技術還在不斷涌現出來，除了上面介紹的技術，還有代謝學技術、傳感器技術、流式細胞術、基因探針技術、生物芯片技術等等。每種檢測技術都有其優缺點，研究檢測人員應該根據不同的檢測目標，不同的實驗環境及條件，選擇適當的檢測方法，進一步地，還可以將不同的技術結合起來比對、使用，以提高檢測的準確性。

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