李國奮

摘 要:當前許多養豬地區出現了仔豬腹瀉的疫情,并具有高死亡率的特征,給養豬業造成了巨大的經濟損失。在仔豬腹瀉的多種類型中,豬瘟和豬藍耳病的混合感染是較為常見的類型。本文結合診斷實例,對由豬瘟和豬藍耳病混合感染引發的仔豬腹瀉疫情診斷進行了介紹,并提出了相關的防治措施,為有關需要提供參考。
關鍵詞:仔豬腹瀉;診斷;防治措施
當前有許多豬病,一當發生,將會給養豬業帶來巨大的經濟損失。在眾多的豬病中,仔豬腹瀉是較為常見的傳染病之一,它能夠造成仔豬生長發育緩慢、死亡,仔豬的成活率大大降低,給養豬業帶來了巨大的經濟損失。而仔豬腹瀉的癥狀復雜,引發的原因多樣,其中由豬瘟和豬藍耳病混合感染的類型較為常見。如何準確對由豬瘟和豬藍耳病混合感染引發的仔豬腹瀉病進行診斷,并采取有效措施進行防治是當前的一個重要課題。對此,筆者進行了詳細介紹。
一、流行病學調查
某養豬廠現有母豬50頭,仔豬200頭,發病豬50~60頭,現已死亡10余頭,豬場免疫過的疫苗有豬瘟疫苗、豬偽狂犬疫苗、豬圓環疫苗和副豬嗜血桿菌疫苗,并且使用過替米考星和地塞米松治療效果不顯著。經調查2013年和2014年分別出現過副豬嗜血桿菌和豬圓環病毒感染的情況。
二、臨床癥狀與剖檢病變
1.臨床癥狀。患病豬拉稀、消瘦后慢慢死亡,糞便呈黃白色,并有水樣便;仔豬出現四肢游泳的神經癥狀,出生7d后拉稀較多,斷奶后也有拉稀甚至死亡的現象。
2.病理剖檢。剖檢2頭死亡仔豬,其病變大致為肺臟出血,脾臟有壞死灶,邊緣有鋸齒狀病變,腎臟有出血斑、出血點,腹股溝淋巴結腫大、出血,脾臟腫大,關節腫大。
三、實驗室診斷
1.材料
(1)病料。某豬場送檢的2頭死亡仔豬,剖檢觀察后采集血液、肺臟、脾臟、腎臟和淋巴結。病料分類編號,并于-20℃保存。
(2) 試劑。北京天根公司總RNA抽提試劑盒、北京全式金生物技術公司RT-PCR一步法盒子。
(3)引物。CSFV和PRRSV特異引物由當地疫控中心實驗室保存。
2.方法
(1)總RNA的抽提。將所采的肺臟、脾臟、淋巴結等病料在無菌條件下剪取適量于2mL EP管中,加入生理鹽水并用研磨儀研磨成懸液,-20℃反復凍融2~3次,12000R/min離心2min。按試劑盒說明書操作步驟進行抽提:吸取200μL病料上清液,加入300μL裂解液RL和10μL蛋白酶K,振蕩混勻;放入56℃水浴鍋水浴15min;加入250μL無水乙醇,混勻后轉到套有收集管CR3吸附柱中,12000R/min離心60s;棄去收集管中的廢液,向吸附柱中加入350μL的去蛋白液RW1,12000R/min離心60s;棄去收集管中的廢液,向吸附柱中加入配制好的DNASEI工作液80μL,靜置15min,加入350μL的去蛋白液RW1,12000R/min離心60s;棄去收集管中廢液,向吸附柱中加入500μL的漂洗液RW,靜置2min,12000R/min離心60s;棄去收集管中的廢液,再向吸附柱中加入500μL的漂洗液,12000R/min離心60s;棄去收集管中的廢液,12000R/min空離2min,把吸附柱取出置于新的RNASE-FREE離心管中,打開蓋子數分鐘晾干漂洗液;向吸附柱中懸空滴加35μL ddH2O,靜置2min,12000R/min離心2min,離心管中所得液體即為RNA溶液。
(2) 病毒RNA的RT-PCR反應。按北京全式金生物技術公司的一步法盒子進行RT-PCR反應。反應體系:R-mix10μL、水3.8μL、上游引物0.4μL、下游引物0.4μL、E-mix0.4μL。RT-PCR反應條件如下:45℃30min,94℃5min,94℃30s,56℃30s,72℃1min,35個循環;72℃5min,4℃保存。
3.實驗室檢測結果。通過RT-PCR,1號病料擴增出2個條帶,其大小分別為508bP和511bP,與CSFV和PRRSV的陽性對照片段大小相符,說明1號病料有豬瘟和豬藍耳病毒;2號病料無明顯條帶,說明沒有豬瘟和豬藍耳病毒。見圖1。
1:1號病料CFSV;2:2號病料CSFV;3:CSFV陽性對照;4:1號病料PRRSV;5:2號病料PRRSV;6:PRRSV陽性對照;7:HPRRSV陽性對照;8:MARKER DL 2000經流行病學調查、臨床癥狀、剖檢變化及實驗室RT-PCR檢測的結果,1號病豬確診為豬瘟和豬藍耳病共同感染所引起的仔豬腹瀉。
四、討論
1號病豬確診為豬瘟和豬藍耳病混合感染,而2號病豬病料未檢到豬瘟和豬藍耳病毒,可能是大腸桿菌引起的仔豬腹瀉,如早發性大腸桿菌病和遲發性大腸桿菌病,即仔豬黃痢和仔豬白痢。仔豬黃痢可造成仔豬排黃白色水樣便,體重減輕甚至死亡;仔豬白痢主要以排灰白色的糞便為主,呈漿糊狀,有腥臭味。
五、防治措施
1.發病豬應立即隔離,病情較重病豬果斷淘汰,對病死豬采用深埋處理。糞便作為重要傳播源應進行發酵或深埋處理,豬舍和工具應及時清洗并消毒,保持豬舍通風、干燥。
2.對豬群緊急免疫接種豬瘟細胞活疫苗和豬藍耳病滅活疫苗,為避免相互感染,1頭豬使用1個針頭。
3.仔豬腹瀉將造成機體的水、電解質大量丟失,酸堿失衡,這時對癥治療應以補液為主,具體措施可采用口服補液鹽如0.9%氯化鈉、氯化鉀、碳酸氫鈉和5%葡萄糖;對因治療可服用抗病毒藥物如干擾素、黃芪多糖、排疫肽、免疫球蛋白等。由于抵抗力的下降,疾病的發生多伴有細菌繼發感染,需使用抗菌藥物如氨芐青霉素、阿米卡星、頭孢氨芐等,同時使用收斂劑、吸附劑,如:鞣酸蛋白、藥用炭,前者口服有止瀉作用,后者可吸附胃腸道內的有毒物質和氣體,起到止瀉作用。對于腹瀉較嚴重的仔豬還可服用神經性止瀉藥阿托品。
4.防控其他疫病如豬偽狂犬病、豬氣喘病等疾病的發生,做好疫苗注射工作,定期對豬群的豬瘟和豬藍耳病進行監測。
六、結語
綜上所述,仔豬腹瀉的癥狀較為復雜,其中由豬瘟和豬藍耳病混合感染引發的仔豬腹瀉是較為常見的類型之一,給養豬業帶來了巨大的經濟損失。因此,要準確地對仔豬腹瀉疫情進行診斷,并結合診斷結果采用相應的處理措施進行治療,同時還要采取有效的防治措施對病情進行防治,從而避免仔豬腹瀉疫情的出現,減少養豬業的經濟損失。
參考文獻:
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