老年卒中相關(guān)性肺炎患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群及血清炎癥因子變化的臨床分析

劉秋紅　張杰文　楊景瑞

1)新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院　新鄉(xiāng)　453003　　2)河南省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科　鄭州　450003

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老年卒中相關(guān)性肺炎患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群及血清炎癥因子變化的臨床分析

劉秋紅1)張杰文2)#楊景瑞1)

1)新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院新鄉(xiāng)4530032)河南省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科鄭州450003

【摘要】目的探討老年卒中相關(guān)性肺炎(SAP)患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群及血清降鈣素原(PCT)、超敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)的變化并分析其臨床應(yīng)用價(jià)值。方法連續(xù)收集發(fā)病24 h內(nèi)入院的老年卒中患者63例，入院時(shí)對(duì)其進(jìn)行NIHSS評(píng)分，根據(jù)1周內(nèi)是否發(fā)生SAP，分為SAP組和非SAP組；并以同時(shí)期門診體檢中心30例健康老年人為對(duì)照組。3組入院后于24～48 h抽血送檢血清降鈣素原(PCT)、超敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)及細(xì)胞免疫指標(biāo)(CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+)，比較其差異，并根據(jù)臨床資料和統(tǒng)計(jì)分析其臨床應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果SAP組、非SAP組血清PCT及hs-CRP均明顯高于正常對(duì)照組(P<0.05)。SAP組、非SAP組的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+ T淋巴細(xì)胞水平均低于對(duì)照組，CD8+T淋巴細(xì)胞水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論卒中相關(guān)性肺炎患者發(fā)病早期即存在細(xì)胞免疫功能低下，血清PCT和hs-CRP明顯升高，且與患者的預(yù)后相關(guān)，PCT診斷早期細(xì)菌感染的特異性優(yōu)于hs-CRP；其生物標(biāo)志物對(duì)診斷、病情及預(yù)后評(píng)估提供臨床價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】老年；卒中相關(guān)性肺炎；外周血T淋巴細(xì)胞亞群；炎癥因子

卒中后感染臨床發(fā)生率15%～65%，且與不良預(yù)后明顯相關(guān)，嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量和加重患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。卒中相關(guān)性肺炎(SAP)是腦卒中急性期死亡的首要原因，也是腦卒中后最常見的感染類型。近期研究[1]發(fā)現(xiàn)，急性腦血管疾病患者的感染易感性增加，可能與其誘發(fā)的免疫功能抑制有關(guān)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)二者相互作用、密切相關(guān)，通過免疫系統(tǒng)可反應(yīng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷。本文觀察老年卒中相關(guān)性肺炎患者血清PCT、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)以及外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化并分析其臨床意義，為臨床更好的診斷和治療卒中相關(guān)性肺炎提供依據(jù)。

1對(duì)象和方法

1.1研究對(duì)象隨機(jī)選取我院神經(jīng)內(nèi)科2014-03—2015-09收治的老年卒中患者63例為觀察對(duì)象，男37例，女26例；年齡61～84(68.2±14.8)歲。并以同期門診體檢中心30例健康老年人為對(duì)照組，男18例，女12例；年齡60～86(71.4±13.6)歲。2組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象或其家屬均簽署知情同意書。

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)腦卒中發(fā)病后24 h內(nèi)入院。(2)磁共振彌散加權(quán)成像顯示為急性腦梗死灶或CT掃描證實(shí)為新發(fā)腦出血(不包括原發(fā)性蛛網(wǎng)膜下腔出血)。(3)入院當(dāng)天根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale，NIHSS)評(píng)分>3分。(4)年齡≥60歲。肺部感染診斷按2010年SAP診治中國專家共識(shí)的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]：(1)出現(xiàn)感染的臨床癥狀(肺炎，尿路感染和不明原因的發(fā)熱)；(2)血清超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)>5 mg/L；(3)血清降鈣素原濃度>0.5 μg/L。在入院后第7或第14天所有上述3項(xiàng)指標(biāo)完全滿足的患者劃入感染組(SAP組)，在整個(gè)觀察期上述3項(xiàng)指標(biāo)均未出現(xiàn)的患者劃入未感染組(非SAP組)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)發(fā)病前6個(gè)月內(nèi)有卒中史、顱腦外傷史且遺留明顯神經(jīng)功能缺損；(2)發(fā)病前3個(gè)月內(nèi)有慢性細(xì)菌感染性基礎(chǔ)疾病(如支氣管擴(kuò)張、膿腫、皮膚感染、尿路感染等)；(3)合并惡性腫瘤、嚴(yán)重血液系統(tǒng)疾病、自身免疫性疾病及其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的患者；(4)慢性酒精中毒、吸毒或存在嚴(yán)重心、肺、肝、腎功能不全；(5)短暫性腦缺血發(fā)作；(6)<24 h出院或死亡。2組臨床資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1　2組臨床資料比較　[n(%)]

1.2方法

1.2.1一般資料：包括患者年齡、性別、個(gè)人史和既往史、NIHSS評(píng)分[3]，評(píng)估神經(jīng)功能缺損程度。

1.2.2研究方法：入院后次日清晨取空腹外周靜脈血3 mL分裝于不同的試管中，分別用于檢測PCT、hs-CRP和細(xì)胞免疫指標(biāo)(CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+)，比較各組差異，分析其臨床意義。

1.2.3檢測方法：①炎癥因子的檢測：PCT檢測采用德國BRAHM.S公司的E170全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀和原裝試劑盒嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行檢測，正常值為<0.5 μg/L。hs-CRP的檢測采用i-CHROMA全自動(dòng)蛋白分析儀進(jìn)行，試劑盒由韓國醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品公司提供，正常值為<5 mg/L。②細(xì)胞免疫指標(biāo)的檢測：采用美國Beckman Coulter公司的EPICS-XL流式細(xì)胞儀定量檢測外周血T淋巴細(xì)胞亞群。在每支試管中加入10 μL四標(biāo)記的熒光單克隆抗體(CD45-FITC/CD4-RDl/CD8-ECD/CD3-PC5)，繼之加入EDTA-K2抽取的靜脈血100 μL后混合均勻，室溫避光孵育20 min后加人流式細(xì)胞專用紅細(xì)胞裂解液500 μL裂解紅細(xì)胞，在室溫下避光反應(yīng)15 min后在各試管中加入PBS緩沖液500 μL混合均勻，在室溫下避光放置10 min后進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測，使用軟件系統(tǒng)進(jìn)行定量分析并記錄數(shù)據(jù)。

2結(jié)果

2.1卒中組與健康對(duì)照組血清PCT、hs-CRP比較SAP組、非SAP組血清PCT及hs-CRP均明顯高于正常對(duì)照組；SAP組hs-CRP、PCT均明顯高于非SAP組(P<0.05)。見表2。

表2　卒中組與正常對(duì)照組血清PCT及hs-CRP比較

注：與正常對(duì)照組相比，aP<0.05；與SAP組相比，bP<0.05

2.2卒中組與健康對(duì)照組T淋巴細(xì)胞亞群比較SAP組、非SAP組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+與對(duì)照組比較有差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表3。

表3　卒中組與正常對(duì)照組T淋巴細(xì)胞亞群比較±s)

注：卒中組與對(duì)照組比較，P<0.01

3討論

卒中在世界范圍內(nèi)是致死和永久致殘的主要原因。目前由于生活節(jié)奏的加快和水平的提高，以及人口老齡化的加劇，腦卒中的發(fā)病率驟增。免疫和炎癥是卒中病程中的關(guān)鍵因素，免疫和炎癥反應(yīng)參與急性腦損傷和卒中后康復(fù)，卒中介導(dǎo)的損傷可能影響外圍免疫系統(tǒng)功能。很多原因均可引起卒中后相關(guān)感染，如因吞咽障礙或誤吸及排痰不利等，目前采用的常規(guī)檢查手段不僅時(shí)間過長，且靈敏性差(包括外周血白細(xì)胞、細(xì)菌培養(yǎng)和胸部影像檢查等)，因此可能延誤即時(shí)和更有效的治療。機(jī)體在發(fā)生炎癥時(shí)產(chǎn)生的一些蛋白質(zhì)成為急性期蛋白，hs-CRP是臨床研究和使用最多的炎癥指標(biāo)之一。hs-CRP由肝臟產(chǎn)生，當(dāng)機(jī)體受到感染、創(chuàng)傷、嚴(yán)重的精神打擊、手術(shù)等刺激時(shí)均會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)hs-CRP產(chǎn)生增多。機(jī)體在出現(xiàn)急性腦損傷時(shí)血hs-CRP會(huì)明顯升高，無論是否合并感染均會(huì)有一定程度的升高，但程度不同。本研究提示，卒中患者血清hs-CRP均高于健康對(duì)照人群，SAP組hs-CRP明顯高于非SAP組，是一種靈敏度較高但特異度較低的炎癥指標(biāo)。hs-CRP明顯升高時(shí)卒中相關(guān)性感染的可能性較大，對(duì)于臨床醫(yī)師選擇治療及判斷預(yù)后有一定的指導(dǎo)意義。

PCT是一種由甲狀腺分泌的降鈣素的前體物質(zhì)，正常情況下體內(nèi)僅有少量的PCT存在；但是當(dāng)機(jī)體受到感染時(shí)則PCT的濃度會(huì)明顯升高，這時(shí)體內(nèi)的PCT則主要由甲狀腺以外的器官和組織分泌。研究[4]顯示，PCT與卒中相關(guān)性感染的程度呈正相關(guān)。在急性腦血管病中PCT顯著升高，與其他指標(biāo)相比(如WBC、CRP、細(xì)菌培養(yǎng)等)，其特異性和敏感性均高，已逐漸成為診斷、鑒別SAP的可靠指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，急性腦血管病患者血清PCT均明顯高于正常對(duì)照組，SAP組PCT明顯高于非SAP組，由此可見，PCT對(duì)于診斷卒中相關(guān)性肺炎方面具有重要的臨床意義，可為臨床提供指導(dǎo)。

SAP的發(fā)生是老年卒中患者面臨的最大難關(guān)，癥狀加重可能會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)的功能受到很大限制，可以加快機(jī)體被外界病菌感染的速度，也會(huì)加重患者的病情。研究證實(shí)[5]，T淋巴細(xì)胞在胸腺中發(fā)育成熟，其主要功能是介導(dǎo)細(xì)胞免疫和免疫調(diào)節(jié)，既是免疫反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞，還是免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞。T淋巴細(xì)胞種類眾多，分類方法多樣，而CD4+和CD8+又是T淋巴細(xì)胞免疫的核心，其中CD4+/CD8+可在一定程度上反應(yīng)機(jī)體的免疫狀態(tài)，當(dāng)機(jī)體免疫狀態(tài)受到抑制時(shí)體內(nèi)CD4+/CD8+明顯降低。本研究顯示，卒中組的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞水平均低于對(duì)照組，CD8+T淋巴細(xì)胞水平均高于對(duì)照組，說明卒中組體內(nèi)存在著免疫細(xì)胞數(shù)量的異常和免疫功能的抑制。SAP是導(dǎo)致機(jī)體卒中后期機(jī)體免疫系統(tǒng)功能減弱的原理，必要時(shí)給予調(diào)節(jié)免疫的藥物促進(jìn)患者恢復(fù)。

綜上所述，老年卒中相關(guān)性肺炎患者發(fā)病早期即存在細(xì)胞免疫功能低下，血清PCT和CRP明顯升高，且與患者的預(yù)后相關(guān)，PCT診斷早期細(xì)菌感染的特異性優(yōu)于hs-CRP；其生物標(biāo)志物對(duì)SAP患者的診斷、病情及預(yù)后評(píng)估提供了參考依據(jù)。臨床上對(duì)SAP的治療，在積極促進(jìn)機(jī)體免疫功能及細(xì)胞免疫平衡的恢復(fù)的同時(shí)，還應(yīng)針對(duì)性給予抗病原微生物治療。

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(收稿2015-12-24修回2016-03-22)

【中圖分類號(hào)】R743.3

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1673-5110(2016)08-0034-02

#通訊作者：張杰文，E-mail：zhangjiewen9900@126.com