菊糖-枯草芽孢桿菌合生元對斷奶仔豬糞便菌群及糞便pH 的影響

楊侃侃

（遼寧省農業經濟學校，遼寧錦州 121000）

隨著集約化和規模化養豬產業發展進程的不斷加快，仔豬早期斷奶綜合征的發生率呈逐漸升高的趨勢，給養豬產業造成了很大的經濟損失。微生態制劑作為一種安全、環保的綠色飼料添加劑，可有效預防仔豬早期斷奶綜合征，調節仔豬腸道系統微生態平衡，降低斷奶仔豬發病率，促進養豬業的健康發展。益生菌和益生素類物質按適當比例配合成合生元，可最大限度地發揮其促生長、調控畜禽消化道微生態環境等作用。枯草芽孢桿菌作為一種重要的益生菌制劑，不僅能提高動物生長性能，增強免疫力，同時能調節腸道菌群平衡。菊糖是一種天然果聚糖，能調節動物消化道微生物區系的平衡。本試驗在斷奶仔豬日糧中添加菊糖-枯草芽孢桿菌合生元，比較分析其對仔豬糞便微生物菌群及糞便pH 的影響，為斷奶仔豬飼料中添加合生元奠定理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

自制菊糖培養基，菊糖含量為4.0mg/mL。試驗用枯草芽孢桿菌培養基、菊糖-枯草芽孢桿菌合生元培養基均為實驗室自制，其中確定含菌量為1.35×108CFU/mL。基礎飼糧由錦州展鴻牧業有限公司參照NRC（1998）仔豬營養需要量標準配置提供，其組成及營養水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養水平（風干基礎）單位：%

1.2 飼養管理

試驗采用半開放式豬舍，通風、光照、溫度、濕度等環境條件控制良好。豬只自由飲水和采食，按照分組每天在飼糧中添加不同培養基。試驗前按豬場常規管理程序對斷奶仔豬進行免疫防疫和驅蟲。試驗為期14d。

1.3 試驗設計

試驗選取120 頭“杜洛克×長白×大白” 三元雜交仔豬，斷奶日齡為（23±2）d，平均體重為（6.76±0.56）kg。將仔豬隨機分為4 組，分別為處理A 組（基礎日糧）、處理B 組（基礎日糧+菊糖）、處理C組（基礎日糧+枯草芽孢桿菌）、處理D 組[基礎日糧+（菊糖-枯草芽孢桿菌合生元）]，每組5 個重復，每個重復6 頭豬。各組培養基喂量為15mL/d。

1.4 測定指標及方法

（1）糞便收集：在試驗第15 天早上收集各處理組每個重復3 頭健康仔豬排出的新鮮糞便（不低于1g）于無菌自封袋封裝，保存于冰盒中。

（2）計數：采用平板涂布法進行細菌計數。整個操作過程在無菌操作臺上進行，首先將1g 糞便與9mL 滅菌生理鹽水混勻稀釋成10-1，然后取1mL 稀釋液再次與9mL 的生理鹽水混勻稀釋成10-2，按此法逐級進行，稀釋至10-7。每個菌種選擇10-4、10-5、10-63個梯度，每個梯度2 個重復。分別取50μL 不同濃度稀釋液滴入相應培養基，在37℃條件下分別培養大腸桿菌24h、乳酸桿菌48h（厭氧）、雙歧桿菌48h（厭氧）。結果以CFU 的常用對數值lg（CFU/g）表示。

（3）糞便pH：在試驗第15 天早上，各處理組每個重復隨即選擇3 頭健康仔豬，收集新鮮糞便10g 放入燒杯中，用pH 儀測定pH。

1.5 統計分析

采用SPSS 17.0 對試驗數據進行單因素方差分析，采用Duncan's 法進行多重比較，結果以“平均值±標準差” 表示，P＜0.05 表示組間差異顯著。

2 結果與分析

2.1 斷奶仔豬糞中菌群

由表2 可知，從大腸桿菌數量看，與處理A 組相比，其余試驗組數量均有降低趨勢，其中處理C 組和處理D 組仔豬糞便大腸桿菌數量與處理A 組相比顯著減少（P＜0.05），且這兩組之間無顯著差異（P＞0.05），其中處理D 組大腸桿菌數量最低；從乳酸桿菌數量看，處理B 組、處理C 組和處理D 組均高于處理A 組，其中處理D 組乳酸桿菌數量最高，顯著高于處理A 組和處理B 組（P＜0.05），與處理C 組差異不顯著（P＞0.05）；從雙歧桿菌數量看，處理D 組顯著高于處理A 組（P＜0.05），而處理B 組、處理C組與處理A 組之間差異不顯著（P＞0.05），4 組中處理D 組雙歧桿菌數量最高。

表2 菊糖-枯草芽孢桿菌合生元對斷奶仔豬糞中菌群的影響 單位：g/L

2.2 斷奶仔豬糞便pH

由表3 可知，處理B 組、處理C 組和處理D 組仔豬糞便pH 值均顯著低于處理A 組（P＜0.05），其中處理D 組糞便pH 最低，處理B 組和處理C 組之間數量上很接近。

表3 枯草芽孢桿菌-菊糖合生元對斷奶仔豬糞便pH 的影響

3 討論

3.1 斷奶仔豬糞便PH 值

3.1.1 菊糖-枯草芽孢桿菌合生元對斷奶仔豬糞便菌群中大腸桿菌數量的影響

倪學勤等[1]試驗表明，仔豬斷奶后添加枯草芽孢桿菌可降低大腸桿菌數量，對腸道中需氧菌和厭氧菌的比例起到維持作用。郝生宏等[2]發現，雛雞日糧中添加枯草芽孢桿菌后，糞便中大腸桿菌的數量明顯減少（P＜0.05），合生元抑制了大腸桿菌的生長繁殖。相關研究表明合生元不僅可以增加肉雞腸道中乳酸桿菌的數量，還可以減少大腸桿菌、沙門菌等總需氧菌的數量。本試驗研究表明，枯草芽孢桿菌與合生元均可顯著降低仔豬糞便大腸桿菌數量（P＜0.05），菊糖組在一定程度上降低了大腸桿菌的數量（P＞0.05）。本試驗基本與前人研究結果一致。

3.1.2 菊糖-枯草芽孢桿菌合生元對斷奶仔豬糞便菌群中乳酸桿菌數量的影響

Guo 等[3]研究發現，與對照組相比，仔豬日糧中添加枯草芽孢桿菌后，糞樣中乳酸桿菌數量顯著增加。顧憲紅等[4]研究表明，菊粉能促進斷奶仔豬盲腸內乳酸桿菌生長，增加雙歧桿菌數量（P＜0.05）。邸靜[5]報道，給肉仔雞飼喂苦豆籽粕-雙歧桿菌合生元后，能提高自身腸道內的乳酸桿菌數量。本試驗研究表明，枯草芽孢桿菌與合生元均可顯著提高乳酸桿菌數量（P＜0.05），菊糖組也可提高乳酸桿菌數量，但差異不顯著（P＞0.05）。

3.1.3 菊糖-枯草芽孢桿菌合生元對斷奶仔豬糞便菌群中雙歧桿菌數量的影響

Jannine 等[6]報道，菊糖增加了雙歧桿菌和乳酸桿菌等有益微生物菌群在各段腸道中的數量。邸靜[5]研究發現，苦豆籽粕-雙歧桿菌合生元對肉雞腸道內雙歧桿菌的增殖具有促進作用。本試驗研究表明，合生元組可提高仔豬糞便雙歧桿菌數量（P＜0.05），菊糖組在一定程度上提高了雙歧桿菌的數量（P＞0.05），枯草芽孢桿菌組的雙歧桿菌數量沒有增加趨勢，原因可能是乳酸桿菌產生了一定的競爭抑制作用，從而負面影響雙歧桿菌的增殖，導致雙歧桿菌數量下降。

菊糖是典型的益生元，大量體內試驗和體外試驗研究表明，菊糖能增強有益菌生長，如雙歧桿菌和乳酸桿菌在腸道后段會利用菊糖，使有益微生物迅速增加，維持了腸道微生態平衡，進而促進動物健康[7]。枯草芽孢桿菌-菊糖合生元進入腸道后不僅會增加外源性有益菌，同時合生元中的菊糖成分可以輔助腸道內有益菌的恢復，并且還能抑制有害菌繁殖。此外，腸道有益菌的增加還可以促進營養物質的消化吸收，使腸道pH 降低，進而抑制有害菌繁殖，兩者結合可起到雙倍效果。本試驗研究表明，以菊糖為益生元與枯草芽孢桿菌配合成的合生元添加劑不僅可以快速促進斷奶仔豬腸道菌群的建立及平衡，還可以顯著提高有益菌與有害菌的比值。因此，菊糖和枯草芽孢桿菌具有協同調節腸道微生態平衡的作用。

3.2 菊糖-枯草芽孢桿菌合生元對斷奶仔豬糞便pH 的影響

大量研究表明，枯草芽孢桿菌和菊糖均可顯著降低氨氣濃度，改變豬舍環境。楊鋒[8]研究表明，3%的枯草芽孢桿菌制劑可顯著降低豬舍氨氣濃度（P＜0.05）。孫瑞峰等[9]發現，菊糖+枯草芽孢桿菌能顯著減少肉雞排泄物中氨氣散發量。而Aarnink 等[10]研究認為，影響氨氣散發量的關鍵因素是糞便pH，兩者成正相關，降低糞便pH 可顯著減少氨氣散發量。由于試驗條件的限制，無法測得氨氣揮發量，進而用仔豬糞便pH 來反應豬舍氨氣濃度。楊鋒[8]試驗報道，隨著枯草芽孢桿菌制劑添加量的增加，仔豬糞便pH 降低。顧憲紅等[4]研究表明，1%菊粉能顯著降低斷奶仔豬直腸后端內容物pH（P＜0.05）。本試驗研究表明，菊糖組、枯草芽孢桿菌組和合生元組均能降低糞便pH，合生元組尤其明顯，與前人報道一致。

菊糖到達腸道后端被微生物發酵，可產生乙酸、丙酸、丁酸等短鏈脂肪酸和乳酸、丙酮酸、琥珀酸等有機酸，菊糖與枯草芽孢桿菌兩者結合，更能顯示出兩者的共同作用，顯著降低糞便pH，進而降低氨氣等惡臭氣體的散發。糞便pH 不僅能顯示腸道內環境，也可表明合生元等微生態制劑可以減少豬舍內有害氣體含量，改善豬舍空氣質量。

4 結論

（1）菊糖-枯草芽孢桿菌合生元不但能有效減少斷奶仔豬糞便中大腸桿菌的數量，而且能顯著提高乳酸桿菌和雙歧桿菌的數量，從而有利于維持仔豬腸道微生態平衡和仔豬健康。

（2）菊糖-枯草芽孢桿菌合生元可顯著降低斷奶仔豬糞便pH，減少豬舍內氨氣濃度，從而改善豬舍空氣質量。