芯片技術在菌陰肺結核診斷中臨床應用

謝良冬 王昱云 曾忠 王艷

芯片技術在菌陰肺結核診斷中臨床應用

謝良冬 王昱云 曾忠 王艷

目的 探究芯片技術在菌陰肺結核診斷中的臨床價值。方法 選取肺結核患者90例作為本次的研究對象，按照隨機數字法分為2組，分別為觀察組和對照組，觀察組患者50例，對照組患者40例。觀察組采用芯片技術進行診斷，對照組采用結核菌素純蛋白衍生物實驗（PPD）進行診斷，比較2組診斷方式的應用價值。結果 經過臨床診斷后，觀察組診斷方式的敏感性明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；比較2組診斷方式的特異性差異無統計學意義；采用兩種方式聯合檢測出的陽性者有79例，說明其敏感性為87.8%，明顯高于單純采用蛋白芯片或PPD診斷的結果，差異有統計學意義（P＜0.05）。結論 對菌陰肺結核患者采用結核蛋白芯片進行檢測的臨床價值較高，與PDD檢測方式聯用可以明顯提高患者的陽性檢出率，值得進一步推廣并應用。

菌陰肺結核；診斷；芯片技術

結核病是臨床上對患者威脅較大的一類感染性疾病，約有65%～75%的肺結核患者存在痰結核分枝桿菌涂片陰性肺結核，且該類病菌的培養時間較長、陽性率較低，臨床上多采用X線胸片、臨床癥狀[1]等作為檢測依據，診斷特異性不高，因此，對該類結核病的臨床治療較為困難。為了尋求更好的臨床診斷方法，本次研究對90例肺結核患者的臨床資料進行了回顧性的分析，并對其中的50例患者采取芯片技術進行臨床診斷，旨在探究該診斷技術在菌陰肺結核患者中的臨床應用價值，并為疾病研究提供相關的參考依據，現將統計資料報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取贛州市第五人民醫院2013年5月～2014年12月呼吸科門診收治的肺結核患者90例作為本次的研究對象，所有患者均符合《肺結核診斷和治療指南》[2]中的相關診斷標準。按照隨機數字法分為2組，分別為觀察組和對照組，觀察組患者50例，對照組患者40例。觀察組患者男女比例為29∶21，年齡20～69歲，平均年齡（46.2±5.8）歲；對照組患者男女比例為24∶16，年齡19～68歲，平均年齡（45.6±5.2）歲。比較2組肺結核患者的性別、年齡、臨床癥狀等基本資料差異無統計學意義，2組之間的可比性良好。

1.2 臨床診斷方法 觀察組：采用結核蛋白芯片進行臨床診斷。主要步驟為：取患者靜脈血，將血清進行分離，并采用南京大淵生物技術工程有限公司生產[3]的結核芯片系統與蛋白芯片閱讀儀進行操作，并根據生產廠家規定的參數標準對檢測結果進行判別，結核桿菌陽性判定標準：16Kd、LAM、38kD中的任意一項指標[4]。

對照組：采用結核菌素純蛋白衍生物實驗（PPD）進行診斷，行PPD皮試，給予相應規格的PPD稀釋液于患者皮內注入，注入部位為患者左前臂下1/3掌側處[5]，注入劑量為0.1mL，注入后的72h左右檢測患者局部硬結，若其直徑在5mm以上則判定為陽性。

1.3 臨床觀察指標 觀察并比較兩種檢測方式的敏感性、特異性、陽性檢出率等。

1.4 統計學方法 將所有數據結果錄入到SPSS18.0軟件中，以95%作為可信區，錄入過程中確保真實客觀，計數資料用百分比、率表示，組間比較用χ2檢驗；計量資料用“x±s”表示，組間比較用t檢驗；以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種檢測方式的檢測結果分析 采用蛋白芯片檢測的敏感性與特異性分別為62.0%與87.5%，采用PPD檢測的敏感性與特異性分別為40.0%與85.0%，說明觀察組診斷方式的敏感性明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；比較2組診斷方式的特異性差異無統計學意義。見表1。

表1 2組檢測方式的檢測結果分析（n）

2.2 分析結核蛋白芯片檢測方式中陽性患者的各指標所占百分比 抗體陽性率中所占百分比最高的為抗38kD，占據29.0%，接下來為LAM抗體，為19.4%，所占百分比最低的為抗16kD，為12.9%。見表2。

表2 分析結核蛋白芯片檢測方式中陽性患者的各指標所占百分比

2.3 比較兩種方式聯合檢測的陽性率 90例肺結核患者中，采用兩種方式聯合檢測出的陽性者有79例，說明其敏感性為87.8%，明顯高于單純采用蛋白芯片或PPD診斷的結果，差異有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

雖然痰涂片檢查是臨床上對肺結核疾病進行確診的主要診斷方式，但是檢測方式的陽性率約為25%～35%之間[6]，陽性率較低，還存在大量的呈陰性涂片的可疑性肺結核病例需要進行更為準確的臨床診斷。所以說，對菌陰性肺結核患者進行科學有效的診斷是臨床較為重視的一類問題。

近年來，蛋白質芯片是蛋白質組學臨床研究中的一類新型的研究方向，該芯片與基因芯片較為類似，主要檢測方法是將蛋白質與固相物質相結合，后與檢測組織（細胞）進行“雜交”[7]，最后在自動化儀器的檢測下得出結果。該項系統將微孔濾膜作為檢測載體，利用結核菌脂阿拉伯甘露糖、蛋白38kD、蛋白16kD等抗原體將其固相于同一張膜片中，根據微孔濾膜的濃縮、滲濾、凝集作用快速進行抗原體反應[8]，并直接在固相膜上顯色。將顯色后的芯片放置于閱讀儀中進行分析，并采用專門的軟件得出檢測結果。本次中采用的結核蛋白芯片檢測技術可以對上述三種抗原體進行同步檢測，并根據結核的感染情況進行臨床診斷。

LAM是屬特異性抗原，其免疫原性較強，臨床檢測后的靈敏度較高，但是其他種類的分枝桿菌也同樣含有LAM成分，所以，其特異性較低。

本次研究結果發現，采用蛋白芯片診斷與PPD診斷的敏感性均較高，但是比較兩種檢測方式的特異性差異不大，且兩種檢測方式聯合診斷后可以較為準確的對肺結核疑似人群進行判定，其敏感性高達87.8%，明顯高于單純采用蛋白芯片或PPD診斷的結果，差異有統計學意義（P＜0.05）。除此之外，PPD檢測的費用較低，但檢測時間較長，約為72h，臨床測量時會產生一定的誤差，且檢測結果容易受到諸多因素的影響；而蛋白芯片檢測所需時間大大縮短，只需10分鐘便可檢測出結果，但是花費較高。若兩者聯用可為菌陰性肺結核患者的臨床診斷與鑒別提供有效的參考意見[9]。其中結合蛋白芯片作為臨床上對肺結核診斷的一種新型的檢測方式，需經過大量的臨床實驗對其檢測價值進行進一步的研究與驗證。

綜上所述，對菌陰肺結核患者采用結核蛋白芯片進行檢測的臨床價值較高，與PDD檢測方式聯用可以明顯提高患者的陽性檢出率，值得進一步推廣并應用。

[1] 白廣紅,李耀軍.結核生物蛋白芯片技術在結核病臨床診斷中的價值探討[J].國際檢驗醫學雜志,2011,32(5):597-599.

[2] 楊曉燕,呂紹敏,岳晨莉，等.結核桿菌蛋白芯片檢測對肺結核的診斷價值[J].中國誤診學雜志,2012,12(7):1564.

[3] 劉志輝,譚守勇,劉玉美，等.結核病患者與健康人血清蛋白質譜的比較研究[J].國際結核病與肺部疾病雜志（中文版）,2012,1(3):159-162.

[4] 李衛彬,李新旭,張彤群，等.基因芯片檢測技術檢測結核分枝桿菌異煙肼和利福平耐藥的實際應用效果評價[J].中華臨床醫師雜志（電子版）,2012,6(16):4666-4670.

[5] 高純,翟菊萍,公艷蕾，等.微陣列酶聯免疫技術診斷肺結核的臨床應用[J].現代預防醫學,2012,39(17):4488-4490,4493.

[6] 姜洪斌,汪浩,姜格寧，等.超聲支氣管鏡引導下的經支氣管針吸活檢術診斷菌陰肺結核[J].中華胸心血管外科雜志,2011,27(9):526-528.

[7] 遲晶宇,胡華,楊燕，等.菌陰肺結核患者血清SP-A檢測及其相關因素分析[J].山東醫藥,2011,51(31):7-9.

[8] 曾誼,馮梟,宋梅梅，等.酶聯免疫斑點試驗在菌陰肺結核診斷中的價值[J].中國防癆雜志,2012,34(2):100-102.

[9] 楊新婷,賈紅彥,李琦，等.全血γ干擾素釋放試驗在菌陰肺結核中診斷價值的臨床觀察[J].中國臨床醫生,2013,41(3):42-45.

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.29.039

江西 341000 贛州市第五人民醫院 （謝良冬 王昱云 曾忠 王艷）