高效液相色譜法測定馬來酸氨氯地平片的含量

李祖紅，李傳響

(1.海南衛(wèi)康制藥(潛山)有限公司,安徽 安慶　246300；2.安慶市食品藥品檢驗(yàn)中心,安徽 安慶　246001)

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高效液相色譜法測定馬來酸氨氯地平片的含量

李祖紅1，李傳響2

(1.海南衛(wèi)康制藥(潛山)有限公司,安徽 安慶246300；2.安慶市食品藥品檢驗(yàn)中心,安徽 安慶246001)

摘要：目的建立高效液相色譜法測定馬來酸氨氯地平片的含量。方法采用Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；以甲醇-0.05 mol·L-1乙酸銨溶液(70∶30)為流動(dòng)相；檢測波長365 nm；流速1.0 mL·min-1。結(jié)果馬來酸氨氯地平在22.4～336.0 mg·L-1的線性范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r=0.999 9(n=6)，平均回收率為99.4%，RSD=0.29%(n=9)。結(jié)論該方法簡便、快速、準(zhǔn)確、專屬性好，適于馬來酸氨氯地平片含量控制。

關(guān)鍵詞：氨氯地平/分析；色譜法,高壓液相；回收率；藥物穩(wěn)定性

氨氯地平(amlodipine)是三代鈣拮抗劑，馬來酸氨氯地平是氨氯地平與馬來酸所成的鹽，有較強(qiáng)的外周血管和冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張作用[1-2]。馬來酸氨氯地平在國內(nèi)已上市的劑型有片劑和膠囊劑，由于本品臨床療效高，毒副作用小，已成為臨床用于降壓的一線藥物，應(yīng)用非常廣泛，但是其含量測定的檢測標(biāo)準(zhǔn)還未納入中國藥典。本文采用以甲醇-0.05 mol·L-1乙酸銨溶液(70∶30)為流動(dòng)相；檢測波長365 nm[3-4]的檢測條件對(duì)馬來酸氨氯地平片含量的測定方法進(jìn)行研究。

1儀器與試藥

1.1儀器島津HPLC色譜儀(LC-20AT泵，SPD-M20A檢測器，SIL-20A進(jìn)樣器，CTO-20AC柱溫箱)，Lcsolution色譜工作站；梅特勒AB265-S電子分析天平；梅特勒AG8603精密pH計(jì)。

1.2試藥樣品(市場抽驗(yàn)，批號(hào)：140823；150402；150705)；對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所提供，純度為99.8%，批號(hào)為20081208)。甲醇(色譜純，國藥集團(tuán))；水為重蒸餾水，乙酸銨(分析純)。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件色譜柱：Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相：甲醇-0.05 mol·mL-1乙酸銨(70∶30；v/v)；檢測波長365 nm；流速1.0 mL·min-1；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量：10 μL；理論塔板數(shù)按氨氯地平色譜峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000，見圖1。

2.2供試品及對(duì)照品溶液制備

2.2.1供試品溶液制備取本品20片，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于氨氯地平8 mg)，置于100 mL量瓶中，加鹽酸溶液(9→1 000)適量，超聲5 min溶解，并稀釋至刻度，振搖，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液

2.2.2對(duì)照品溶液制備精密稱取馬來酸氨氯地平對(duì)照品15 mg(實(shí)際稱量14.5 mg，相當(dāng)于氨氯地平11.2 mg)，置于50 mL容量瓶中，加鹽酸溶液(9→1 000)適量超聲振蕩5 min溶解，并稀釋至刻度，制成每1 mL中約含224.0 μg的溶液作為對(duì)照品溶液。

2.3線性關(guān)系考察取“2.2.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液(224.0 mg·L-1)適量，分別用水稀釋配成22.4、44.8、67.2、112.0、224.0、336.0 mg·L-1。按“2.1”色譜條件項(xiàng)下，取20 μL進(jìn)樣分析，記錄峰面積，并以峰面積(A)與樣品濃度(C)作線性回歸，回歸方程為：A=20 870.9C+731.2，相關(guān)系數(shù)r=0.999 9，馬來酸氨氯地平在線性范圍22.4～336.0 mg·L-1內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

對(duì)照品色譜圖

樣品色譜圖

注：1.馬來酸；2.氨氯地平。

圖1馬來酸氨氯地平高效液相色譜圖

2.4精密度試驗(yàn)按“2.3”線性關(guān)系考察項(xiàng)下方法，用水稀釋成高、中、低對(duì)照品溶液(22.4、67.2、224.0 mg·L-1)，分別連續(xù)進(jìn)樣3次，記錄色譜圖和峰面積，計(jì)算RSD分別為：0.20%、0.17%、0.12%(n=3)，結(jié)果具有良好精密度。

2.5穩(wěn)定性研究取“2.2.1”項(xiàng)下供試品溶液80 mg·L-1，室溫下放置，按“2.1”色譜條件項(xiàng)下操作，分別于0、2、4、8、12 h進(jìn)樣10 μL，記錄色譜圖，結(jié)果表明：供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.6回收率試驗(yàn)精密稱取馬來酸氨氯地平對(duì)照品溶液15、20、25 mg，加入已知準(zhǔn)確濃度的樣品(批號(hào)150705)溶液中，照“2.2.1”項(xiàng)下方法溶解，并加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取續(xù)濾液5 mL置10 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，取20 μL進(jìn)樣，記錄色譜圖；另取馬來酸氨氯地平對(duì)照品溶液，按“2.1”色譜條件項(xiàng)下操作，計(jì)算回收率，得回收率平均值為99.4%，RSD為0.29%，結(jié)果見表1。

2.7樣品測定取3種不同批次的樣品，按“2.2.1”供試品溶液制備項(xiàng)下操作，照“2.1”色譜條件，進(jìn)樣10 μL分析，記錄色譜圖，計(jì)算三批樣品的含量，結(jié)果見表2。

表1　樣品回收率測定結(jié)果

表2　樣品含量測定結(jié)果

3討論

參考有關(guān)文獻(xiàn)[5-12]，對(duì)馬來酸氨氯地平的吸收波長、溶劑、及流動(dòng)相進(jìn)行反復(fù)試驗(yàn)比較，最終選定以(9→1 000)鹽酸溶液為溶劑溶解，有效改善了氨氯地平溶解性的問題，在365 nm波長處測定，使測定結(jié)果更加準(zhǔn)確，甲醇-0.05 mol·L-1乙酸銨溶液(70∶30)為流動(dòng)相的試驗(yàn)條件，最適合本品溶解，準(zhǔn)確定量，為制訂科學(xué)的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)提供參考依據(jù)。

本文建立馬來酸氨氯地平片含量的測定方法，并對(duì)測定方法給以驗(yàn)證，同時(shí)將三批樣品測定結(jié)果與馬來酸氨氯地平的現(xiàn)行國家藥品標(biāo)準(zhǔn)[4]進(jìn)行比較，不存在顯著差異，反而更好的地改善了其溶解度，使測定結(jié)果更準(zhǔn)確。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，馬來酸氨氯地平在22.4～336.0 mg·L-1濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系；雜質(zhì)不干擾含量測定；因此，所建立含量測定的方法簡便快速、準(zhǔn)確、專屬性好，能夠有效的控制馬來酸氨氯地平片的質(zhì)量。

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HPLC determination of the contents of Amlodipine maleate in tablets

LI Zu-hong1，LI Chuan-xiang2

(1.HainanWeikangPharmaceutical(Qianshan)Co.,Ltd,Anqing,Anhui246300，China；2.AnqingInstituteforFoodandDrugControl，Anqing,Anhui246001,China)

Abstract:ObjectiveTo establish an HPLC method for the determination of the contents of Amlodipine maleate in tablets.MethodsThe separation was performed on a Kromasil C18column (4.6 mm×250 mm，5 μm).The mobile phase was composed of methanol-0.05 mol·L-1ammonium acetate (70∶30) at the flow rate of 1.0 mL·min-1.The detection was carried out with a UV detector at 365 nm.ResultsThe calibration curves were linear between 22.4～336.0 mg·L-1(r=0.999 9,n=6),and the average recovery was 99.4%,RSD=0.29%(n=9).ConclusionsThe method is simple,rapid,accurate and suitable for the determination of amlodipine maleate tablets.

Key words:Amlodipine/analysis;Chromatography,high pressure liquid;Retrieving rate;Drug stability

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2016.06.013

(收稿日期：2016-01-18，修回日期：2016-04-08)