雙氯芬酸鈉注射液在豬體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究

楊海峰，李勇軍，王雅琴，趙杉杉，董 浩，卜仕金*

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雙氯芬酸鈉注射液在豬體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究

楊海峰1，2，李勇軍1，王雅琴2，趙杉杉1，董 浩1，卜仕金2*

（1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，泰州225300；2.揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，揚(yáng)州225009）

摘 要：研究雙氯芬酸鈉注射液在豬體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)特征和生物利用度，為其臨床合理使用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。選用8頭健康豬，采用兩周期隨機(jī)交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，單劑量靜脈注射或肌內(nèi)注射5%雙氯芬酸鈉注射液（2.5 mg·kg－1），高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)豬血漿中雙氯芬酸鈉濃度，采用DAS 2.1.1軟件對(duì)血藥濃度－時(shí)間數(shù)據(jù)進(jìn)行非房室模型分析，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。結(jié)果顯示，豬靜脈注射給藥的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)如下：消除半衰期（T1/2β）為（1.32±0.34）h，藥－時(shí)曲線下面積（AUC）為（55.50±5.50）（μg·mL－1）·h，平均滯留時(shí)間（MRT）為（1.60± 0.28）h，表觀分布容積（Vd）為（0.50±0.05）L·kg－1，總體清除率（CLB）為（0.26±0.04）L·（h·kg）－1。豬肌內(nèi)注射給藥的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)如下：峰時(shí)（Tmax）為（1.19±0.26）h，峰濃度（Cmax）為（11.61±5.99）μg·mL－1，T1/2β為（1.87±0.70）h，AUC為（43.17±7.77）（μg·mL－1）·h，MRT為（2.86±0.64）h，生物利用度（F）為（78.29± 14.81）%。結(jié)果提示，雙氯芬酸鈉注射液肌注給藥后在豬體內(nèi)具有吸收良好、達(dá)峰迅速、血藥峰濃度高、消除較快、生物利用度較高的藥物動(dòng)力學(xué)特征，臨床推薦給藥劑量為2.5mg·kg－1。

關(guān)鍵詞：雙氯芬酸鈉注射液；藥物動(dòng)力學(xué)；生物利用度；豬；高效液相色譜

過(guò)去幾十年，由于醫(yī)學(xué)、動(dòng)物福利及經(jīng)濟(jì)利益的驅(qū)動(dòng)，市場(chǎng)的需求，需要控制動(dòng)物的炎癥、疼痛及發(fā)熱，故批準(zhǔn)注冊(cè)的非甾體抗炎藥（nonsteroidal antiinflammatory drugs，NSAIDs）品種大量增加［1］。雙氯芬酸鈉（diclofenac sodium，DS）為芳基乙酸類非甾體抗炎藥［2］，其作用機(jī)制為抑制機(jī)體環(huán)加氧化酶的活性，減少與炎癥、疼痛和發(fā)熱有關(guān)的前列腺素的合成，從而產(chǎn)生抗炎、鎮(zhèn)痛和解熱作用。在人醫(yī)臨床，已上市的雙氯芬酸鈉產(chǎn)品包括片劑、膠囊劑、滴眼液、軟膏劑等劑型，常用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)痛、手術(shù)及創(chuàng)傷后疼痛等［3－4］。在獸醫(yī)臨床，國(guó)外批準(zhǔn)上市的雙氯芬酸鈉產(chǎn)品僅有1%脂質(zhì)體霜?jiǎng)⊿urpass?），局部給藥用于治療馬跗、腕、掌指骨、趾間關(guān)節(jié)和近指骨關(guān)節(jié)相關(guān)的疼痛和炎癥［5］，我國(guó)目前尚無(wú)獸用雙氯芬酸鈉制劑通過(guò)審批或上市，也未見(jiàn)相關(guān)研究和應(yīng)用報(bào)道。

雙氯芬酸鈉在人［6］和犬［7］、大鼠［8］、家兔［9］等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)研究報(bào)道較多，雙氯芬酸鈉在豬及其他食品動(dòng)物的藥物動(dòng)力學(xué)研究在國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)報(bào)道。煙臺(tái)綠葉動(dòng)物保健品有限公司研制了5%雙氯芬酸鈉注射液，前期臨床藥效學(xué)試驗(yàn)結(jié)果表明，該藥可用于豬的發(fā)熱性、炎癥疼痛性疾病的輔助治療，推薦用法用量為肌肉注射：豬一次量，2.5 mg·kg－1。作者根據(jù)農(nóng)業(yè)部《獸用化學(xué)藥物臨床藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)指導(dǎo)原則》［10］，采用兩周期隨機(jī)交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，通過(guò)靜脈注射和肌內(nèi)注射兩種給藥途徑，首次評(píng)價(jià)了國(guó)產(chǎn)雙氯芬酸鈉注射液在靶動(dòng)物豬體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征及其肌注給藥的生物利用度，為其臨床合理使用和新獸藥注冊(cè)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑

雙氯芬酸鈉注射液，規(guī)格100mL：5g，批號(hào)140605，煙臺(tái)綠葉動(dòng)物保健品有限公司提供；雙氯芬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品，含量99.9%，批號(hào)100334－200302，購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所；吲哚美辛標(biāo)準(zhǔn)品，含量99.9%，批號(hào)100258－200904，購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所；乙腈、甲醇為色譜純級(jí)，購(gòu)自美國(guó)TEDIA公司；乙醚、鹽酸、冰醋酸等為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?/p>

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent1260型高效液相色譜儀，配備高壓二元梯度泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、恒溫箱、VWD檢測(cè)器，美國(guó)Agilent公司產(chǎn)品；色譜柱，Thermo Hypersil（250 mm×4.6mm，5μm），美國(guó)Thermo公司產(chǎn)品；BS224S型電子分析天平，感量精度0.0001g，德國(guó)賽多利斯公司產(chǎn)品；HSC－24A型氮吹儀，天津市恒奧科技發(fā)展有限公司產(chǎn)品；TGL－16C型高速離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠產(chǎn)品。

1.3 試液配制

1.3.1 雙氯芬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和工作液配制精密稱取雙氯芬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品（經(jīng)105℃烘干至恒重）10mg于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定溶至刻度，配成質(zhì)量濃度為1 000μg·mL－1雙氯芬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，置4℃冰箱中保存。雙氯芬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液臨用前取儲(chǔ)備液，用70%甲醇倍比稀釋制成質(zhì)量濃度為0.625、1.25、6.25、12.5、25、62.5、125、250、500、1 000μg·mL－1的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.3.2 內(nèi)標(biāo)物工作液配制 精密稱取吲哚美辛標(biāo)準(zhǔn)品30mg，置10mL容量瓶中，加適量甲醇微溫溶解后定容至刻度，得質(zhì)量濃度為3mg·mL－1吲哚美辛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；取儲(chǔ)備液1mL置100mL容量瓶中，用70%甲醇稀釋定容，混勻后得濃度為30 μg·mL－1的吲哚美辛工作液。

1.3.3 流動(dòng)相配制 流動(dòng)相按以下比例配制，1.5%冰醋酸∶甲醇＝60∶40，混勻后經(jīng)0.45μm有機(jī)濾膜過(guò)濾并超聲脫氣20min，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.4 試驗(yàn)動(dòng)物

8頭健康斷奶約克白豬，體重20～25kg，公母各半。試驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)2周，臨床觀察表現(xiàn)健康。試驗(yàn)期間自由飲水和采食，飼喂不添加任何藥物的全價(jià)飼料。

1.5 給藥與血樣采集

采用兩周期隨機(jī)交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行雙氯芬酸鈉注射液在豬體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)研究。8頭健康試驗(yàn)豬隨機(jī)分成甲乙兩組，每組4頭（公母各半），第一周期甲組試驗(yàn)豬肌內(nèi)注射給藥，乙組試驗(yàn)豬靜脈注射給藥，給藥1次，劑量為2.5mg·kg－1；第二周期兩組試驗(yàn)豬交換給藥途徑，給藥劑量不變，兩周期間隔14d。豬前腔靜脈采血，給藥前采集血液制備空白血漿。給藥后在不同時(shí)間點(diǎn)采集血液，每次采血約5mL。靜注給藥的采血時(shí)間為0.08、0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、6、9、12、24、36h，肌注給藥的首個(gè)采血時(shí)間為0.25h，之后同靜注給藥。血樣采集后置于肝素化聚丙烯離心管內(nèi)，4 000r·min－1離心10 min后分離血漿，－20℃冰箱保存待測(cè)。

1.6 血漿中雙氯芬酸鈉檢測(cè)方法的建立

1.6.1 血漿樣品處理方法 準(zhǔn)確吸取血漿樣品0.5mL置于10mL具塞玻璃試管中，加入內(nèi)標(biāo)工作液20μL，渦旋1min；加入1mol·L－1的鹽酸溶液0.1mL使之酸化，渦旋30s；隨后加入5mL乙醚，渦旋2min，靜置10min待分層后轉(zhuǎn)移有機(jī)相4 mL至10mL玻璃試管中，37℃水浴條件下氮?dú)饬鞔蹈?，?00μL流動(dòng)相復(fù)溶，渦旋30s，轉(zhuǎn)移至1.5 mL指形管，13 000r·min－1離心10min，上清液經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾，濾液供HPLC分析測(cè)定。

1.6.2 色譜條件 色譜柱：苯基硅烷鍵合硅膠為填充劑，Thermo Hypersil（250mm×4.6mm，5 μm）；流動(dòng)相：1.5%冰醋酸∶甲醇＝60∶40；流速：1.0mL·min－1；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：20μL；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：λ＝275nm。

1.6.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線 取空白血漿適量，精密加入不同量的雙氯芬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液，使血漿中的藥物濃度分別為0.025、0.05、0.25、0.5、1、2.5、5、10、20、40μg·mL－1，按照“1.6.1”方法處理后進(jìn)行HPLC分析測(cè)定，以待測(cè)物峰面積（As）與內(nèi)標(biāo)物峰面積（Ai）的比值Y（Y＝As/Ai），對(duì)血漿藥物濃度（X）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程，每個(gè)濃度重復(fù)5次。

1.6.4 定量限（LOQ）和檢測(cè)限（LOD） 配制系列濃度的雙氯芬酸鈉血漿樣品，按照“1.6.1”方法處理后進(jìn)行HPLC分析測(cè)定，取信噪比（S/N）≥3時(shí)的雙氯芬酸鈉添加質(zhì)量濃度為最低檢測(cè)限；取S/N≥10時(shí)的雙氯芬酸鈉添加質(zhì)量濃度為定量限［11］。

1.6.5 回收率和精密度試驗(yàn) 取空白血漿適量，精密加入不同量的雙氯芬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液，配制高（10μg·mL－1）、中（2.5μg·mL－1）、低（0.05 μg·mL－1）3個(gè)質(zhì)量濃度的質(zhì)控樣品，進(jìn)行準(zhǔn)確度和精密度考察。質(zhì)控樣品按照“1.6.1”方法處理后進(jìn)行HPLC分析測(cè)定，將待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值Y代入當(dāng)天的標(biāo)準(zhǔn)曲線求得實(shí)測(cè)濃度。實(shí)測(cè)濃度與添加濃度之比即為相對(duì)回收率。每一濃度同日內(nèi)做5個(gè)平行樣品，連續(xù)進(jìn)行3個(gè)批次測(cè)定，求得日內(nèi)和日間變異系數(shù)（RSD）。

1.7 給藥后血漿樣品中雙氯芬酸血藥濃度的測(cè)定

給藥后采集的血漿樣品，按照“1.6.1”方法處理后進(jìn)行HPLC分析測(cè)定，將待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值Y并代入當(dāng)天的標(biāo)準(zhǔn)曲線，從而算出血漿中雙氯芬酸鈉的濃度。

1.8 數(shù)據(jù)分析處理

采用DAS 2.1.1軟件對(duì)血藥濃度－時(shí)間數(shù)據(jù)進(jìn)行非房室模型分析，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，然后用Excel軟件計(jì)算其平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（s）。以平均血藥濃度（C）對(duì)時(shí)間（t）繪制藥－時(shí)曲線圖。雙氯芬酸鈉注射液的肌內(nèi)注射和靜脈注射的給藥劑量相同，其絕對(duì)生物利用度（F）的計(jì)算公式：F＝（AUC肌注/AUC靜注）×100%。

2 結(jié) 果

2.1 雙氯芬酸鈉血藥濃度檢測(cè)方法

2.1.1 色譜行為 在本試驗(yàn)所建立的色譜分離條件下，空白血漿、加標(biāo)血漿、靜注和肌注給藥后血漿樣品的色譜圖見(jiàn)圖1。待測(cè)物（雙氯芬酸鈉）和內(nèi)標(biāo)物（吲哚美辛）與血漿中其他組分分離度好，且峰形尖銳，保留時(shí)間分別為5.9和7.7min左右，空白血漿在待測(cè)物和內(nèi)標(biāo)物的出峰處無(wú)明顯雜質(zhì)峰干擾，表明方法專屬性好。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍 血漿中雙氯芬酸鈉濃度在0.025～40.0μg·mL－1范圍內(nèi)，血漿藥物濃度（X）與待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值（Y）呈良好的線性關(guān)系（r＞0.99），標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程見(jiàn)表1。

2.1.3 檢測(cè)限和定量限 在所建立的檢測(cè)條件下，雙氯芬酸鈉在血漿中的檢測(cè)限（LOD）為0.015 μg·mL－1，定量限（LOQ）為0.025μg·mL－1。

2.1.4 回收率和精密度 在0.05、25、10.0 μg·mL－1三個(gè)添加質(zhì)量濃度下，血漿中雙氯芬酸鈉的相對(duì)回收率分別為（99.68±8.60）%、（104.01± 7.64）%、（89.45±3.30）%；批內(nèi)變異系數(shù)（n＝5）分別為11.89%、9.84%、5.67%，批間變異系數(shù)（n＝15）分別為17.61%、9.34%、6.48%。

圖1 雙氯芬酸鈉的HPLC色譜圖Fig.1 HPLC chromatogram of diclofenac sodium

表1 雙氯芬酸鈉血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程Table 1 Standard curve regression equation of diclofenac sodium in plasma

2.2 雙氯芬酸鈉注射液在豬體內(nèi)的血藥濃度和藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

豬單劑量（2.5mg·kg－1）靜脈注射和肌內(nèi)注射5%雙氯芬酸鈉注射液后實(shí)測(cè)的血藥濃度－時(shí)間數(shù)據(jù)見(jiàn)表2，藥－時(shí)曲線見(jiàn)圖2，主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見(jiàn)表3。雙氯芬酸鈉注射液靜注和肌注給藥在豬體內(nèi)的消除半衰期（T1/2β）分別為（1.32±0.34）h和（1.87±0.70）h，藥－時(shí)曲線下面積（AUC）分別為（55.50±5.50）（μg·mL－1）·h和（43.17±7.77）（μg·mL－1）·h。

2.3 雙氯芬酸鈉注射液的生物利用度

根據(jù)“1.8”中生物利用度計(jì)算公式和AUC參數(shù)值，計(jì)算得出豬肌內(nèi)注射5%雙氯芬酸鈉注射液的生物利用度為（78.29±14.81）%。

表2 豬單劑量靜脈注射和肌內(nèi)注射雙氯芬酸鈉注射液后的血藥濃度（±s，n＝8）Table 2 Plasma durg concentration of diclofenac sodium in swine after i.v.and i.m.administration（±s，n＝8）μg·mL－1

表2 豬單劑量靜脈注射和肌內(nèi)注射雙氯芬酸鈉注射液后的血藥濃度（±s，n＝8）Table 2 Plasma durg concentration of diclofenac sodium in swine after i.v.and i.m.administration（±s，n＝8）μg·mL－1

ND.未檢測(cè)到；－.無(wú)樣品ND.Not detected；－.No sample

時(shí)間/h Time lasma靜脈注射Intravenous administration　　肌內(nèi)注射血藥濃度Concentration in p Intramuscular administration 0.08 　37.66±7.53　?。?.25 　26.90±6.86 　6.43±1.46 0.5 　22.61±4.99 　8.06±2.79 1 　15.19±3.80 　10.28±5.59 1.5 　11.57±2.49 　10.98±5.47 2 　9.98±2.52 　9.35±5.65 3 　6.98±2.35 　6.99±4.81 4 　4.33±1.88 　5.13±3.24 6 　1.21±0.90 　2.89±2.34 9 　0.68（n＝1）　1.20±0.72 12 　0.10（n＝1）　0.63±0.41 24　ND 　0.31±0.28 ND 36－

圖2 豬靜注和肌注雙氯芬酸鈉注射液的血藥濃度－時(shí)間曲線Fig.2 Plasma durg concentration－time curve of diclofenac sodium in swine after i.v.and i.m.administration

表3 豬單劑量靜注和肌注雙氯芬酸鈉注射液的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)（±s，n＝8）Table 3 Pharmacokinetics parameters of diclofenac sodium injection in swine after intravenous or intramuscular administration at a single dose of 2.5mg·kg－1（±s，n＝8）

表3 豬單劑量靜注和肌注雙氯芬酸鈉注射液的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)（±s，n＝8）Table 3 Pharmacokinetics parameters of diclofenac sodium injection in swine after intravenous or intramuscular administration at a single dose of 2.5mg·kg－1（±s，n＝8）

－.無(wú)數(shù)據(jù)－.No data

參數(shù)Parameters單位Unit靜脈注射Intravenous administration肌內(nèi)注射Intramuscular administration T1/2β 0.50±0.05　?。環(huán) 　1.32±0.34 　1.87±0.70 Tmax　h　?。?.19±0.26 Cmax　　μg·mL－1　?。?1.61±5.99 AUC　　（μg·mL－1）·h 　55.50±5.50 　43.17±7.77 MRT 　h 　1.60±0.28 　2.86±0.64 CLB　L·（h·kg）－1 　0.26±0.04　?。璙d　L·kg－1

3 討 論

3.1 雙氯芬酸鈉血藥濃度測(cè)定方法

國(guó)內(nèi)外已報(bào)道的雙氯芬酸鈉血藥濃度測(cè)定方法有高效液相色譜法（HPLC）［12］、高效液相色譜－質(zhì)譜法（HPLC－MS）［13］、高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法（HPLC－MS/MS）［14］、超高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC－MS/MS）［7，15］、氣相色譜－質(zhì)譜法（GCMS）［16］等，本試驗(yàn)在文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上建立了HPLC內(nèi)標(biāo)法測(cè)定豬血漿中的雙氯芬酸鈉濃度，方法快速簡(jiǎn)便、靈敏準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)、重復(fù)性好。在血漿樣品的處理上，先用1mol·L－1鹽酸酸化血漿，再用乙醚沉淀蛋白質(zhì)和萃取藥物，乙醚在37℃水浴條件很快揮干，樣品處理時(shí)間短，操作簡(jiǎn)便，回收率高且雜質(zhì)峰少。采用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定，可以補(bǔ)償儀器及操作條件等細(xì)小變化帶來(lái)的影響，較外標(biāo)法定量更為準(zhǔn)確。以1.5%冰醋酸－甲醇為流動(dòng)相，待測(cè)物雙氯芬酸鈉與內(nèi)標(biāo)物吲哚美辛的色譜峰完全分開(kāi)，峰形尖銳，且保留時(shí)間相近，說(shuō)明流動(dòng)相和內(nèi)標(biāo)物選擇合理。在上述血漿樣品處理方法和色譜檢測(cè)條件下，血漿中雙氯芬酸鈉的回收率在85%以上，批內(nèi)變異系數(shù)小于15%，批間變異系數(shù)小于20%，達(dá)到農(nóng)業(yè)部《獸用化學(xué)藥物臨床藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)指導(dǎo)原則》中對(duì)色譜法測(cè)定血藥濃度的相關(guān)要求，表明本試驗(yàn)建立的血藥濃度檢測(cè)方法可用于雙氯芬酸鈉注射液在豬體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)研究。

3.2 豬單劑量靜脈注射雙氯芬酸鈉注射液的藥動(dòng)學(xué)特征

豬單劑量（2.5mg·kg－1）靜注雙氯芬酸鈉注射液后，消除半衰期（T1/2β）為（1.32±0.34）h，總體清除率（CLB）為（0.26±0.04）L·（h·kg）－1，平均滯留時(shí)間（MRT）為（1.60±0.28）h，表明雙氯芬酸鈉在豬體內(nèi)消除迅速。雙氯芬酸鈉消除半衰期短在其他物種上也有報(bào)道，如狗1.3h［17］、兔子2h［18］、小型豬2.4h［19］、駱駝2.35h［20］，人類是1.1～1.8h［21］。但雙氯芬酸鈉在大鼠體內(nèi)的消除半衰期較長(zhǎng)，可達(dá)15h［22］，這是種屬差異性所致。靜注給藥的表觀分布容積（Vd）為（0.50±0.05）L·kg－1，表明雙氯芬酸鈉在豬體內(nèi)分布較窄。雙氯芬酸鈉的表觀分布容積小，這與非甾體抗炎藥的血漿蛋白結(jié)合率高（95%～99%［1］）有關(guān)，藥物大多停留在血管，因而消除較快。非甾體抗炎藥與血漿蛋白的高結(jié)合率可使藥物在炎性滲出部位得以蓄積，因?yàn)檠仔詽B出物來(lái)源于血漿，富含血漿蛋白，故非甾體抗炎藥與血漿蛋白結(jié)合后可導(dǎo)致急性炎癥部位的藥物濃度往往高于血漿藥物濃度。正因?yàn)槟茉跐B出物中蓄積，非甾體抗炎藥在血藥濃度下降到有效血藥濃度之下時(shí)仍能維持較好的抗炎作用。

3.3 豬單劑量肌內(nèi)注射雙氯芬酸鈉注射液的藥動(dòng)學(xué)特征

豬單劑量（2.5mg·kg－1）肌注雙氯芬酸鈉注射液后，消除半衰期（T1/2β）為（1.87±0.70）h，滯留時(shí)間（MRT）為（2.86±0.64）h，消除速度較靜脈注射給藥慢，這與靜脈注射無(wú)吸收過(guò)程有關(guān)。達(dá)峰時(shí)間（Tmax）為（1.19±0.26）h，峰濃度（Cmax）為（11.61± 5.99）μg·mL－1，表明雙氯芬酸鈉注射液在注射部位藥物吸收迅速，達(dá)峰時(shí)間短，血漿藥物峰濃度高，臨床應(yīng)用可以快速起效。藥－時(shí)曲線下面積（AUC）為（43.17±7.77）（μg·mL－1）·h，絕對(duì)生物利用度（F）為（78.29±14.81）%，表明雙氯芬酸鈉注射液肌內(nèi)注射吸收程度良好，生物利用度較高，可供肌內(nèi)注射給藥。盡管雙氯芬酸鈉的消除半衰期較短，但其血漿藥物濃度較高，并且易在炎癥部位蓄積，也有體內(nèi)試驗(yàn)研究資料顯示其抑制炎性滲出物中前列腺素合成的最佳作用時(shí)間滯后于血漿峰濃度出現(xiàn)的時(shí)間［1］，說(shuō)明其藥效持續(xù)期長(zhǎng)于從血漿藥物濃度估算的藥效期，上述藥動(dòng)學(xué)特征有利于雙氯芬酸鈉在靶動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生強(qiáng)大的抗炎、鎮(zhèn)痛和解熱作用。

4 結(jié) 論

在前期臨床藥效試驗(yàn)確定推薦劑量的基礎(chǔ)上，首次評(píng)價(jià)了國(guó)產(chǎn)雙氯芬酸鈉注射液在靶動(dòng)物豬體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特征，為其新獸藥注冊(cè)和臨床合理使用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。國(guó)產(chǎn)雙氯芬酸鈉注射液肌注給藥后在豬體內(nèi)具有吸收良好、達(dá)峰迅速、血藥峰濃度高、消除較快、生物利用度較高的藥動(dòng)學(xué)特征，按臨床推薦劑量2.5mg·kg－1，可用于豬發(fā)熱性、炎癥疼痛性疾病的輔助治療。

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（編輯 白永平）

Pharmacokinetics and Bioavailability of Diclofenac Sodium Injection in Swine

YANG Hai－feng1，2，LI Yong－jun1，WANG Ya－qin2，ZHAO Shan－shan1，DONG Hao1，BU Shi－jin2*
（1.Jiangsu Agri－animal Husbandry Vocational College，Taizhou 225300，China；2.College of Veterinary Medicine，Yangzhou University，Yangzhou225009，China）

Abstract：Pharmacokinetics and bioavailability of diclofenac sodium injection were investigated in swine.A single intravenous（i.v.）or intramuscular（i.m.）administration of 5%diclofenac sodium injection at a dosage of 2.5mg·kg－1was performed in eight healthy pigs according to a twoperiod crossover design.The concentration of diclofenac sodium in plasma was determined by a high performance liquid chromatography method（HPLC）.The pharmacokinetic parameters were calculated by non－compartmental analysis with DAS 2.1.1software.The main pharmacokinetic parameters of diclofenac sodium injection in swine after a single intravenous administration were as follows：the elimination half time（T1/2β）was（1.32±0.34）h，area under the curve（AUC）was （55.50±5.50）（μg·mL－1）·h，mean residence time（MRT）was（1.60±0.28）h，apparent volume of distribution（Vd）was（0.50±0.05）L·kg－1，body clearance（CLB）was（0.26±0.04）L·（h·kg）－1.The main pharmacokinetic parameters of diclofenac sodium injection in swine after a single intramuscular administration were as follows：peak time（Tmax）was（1.19±0.26）h，peak concentration（Cmax）was（11.61±5.99）μg·mL－1，T1/2βwas（1.87±0.70）h，AUCwas（43.17±7.77）（μg·mL－1）·h，MRTwas（2.86±0.64）h，bioavailability（F）was（78.29±14.81）%.The results showed that the diclofenac sodium injection have pharmacokinetic characteristics of rapid absorption and elimination，high peak concentration and bioavailability in swine，and the clinical recommended dosage of diclofenac sodium injection is 2.5mg·kg－1.

Key words：diclofenac sodium injection；pharmacokinetics；bioavailability；swine；HPLC

中圖分類號(hào)：S859.7

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：0366－6964（2016）05－1001－08

doi：10.11843/j.issn.0366－6964.2016.05.018

收稿日期：2015－10－14

基金項(xiàng)目：江蘇省高校青藍(lán)工程資助項(xiàng)目；江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院科研項(xiàng)目（NSFPT201514）；江蘇省優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程項(xiàng)目

作者簡(jiǎn)介：楊海峰（1981－），男，江蘇海安人，講師，博士，主要從事獸醫(yī)藥理學(xué)與毒理學(xué)的研究，Tel：0523－86158187，E－mail：yhf8142@sina.com

*通信作者：卜仕金，教授，博士生導(dǎo)師，E－mail：pushijin@aliyun.com