血培養(yǎng)病原菌的臨床分布及耐藥性分析

鄧　耀,韋永瓊

(四川省成都市婦女兒童中心醫(yī)院檢驗科　60031)

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·臨床研究·

血培養(yǎng)病原菌的臨床分布及耐藥性分析

鄧耀,韋永瓊

(四川省成都市婦女兒童中心醫(yī)院檢驗科60031)

摘要:目的分析該院血培養(yǎng)陽性菌株的構成及藥敏情況，為臨床治療提供依據(jù)。方法對該院2014年1～8月3 342份血液標本進行培養(yǎng)，分離陽性病原菌進行鑒定及藥敏試驗。結果分離陽性菌101株，陽性率為3.02%，其中革蘭陰性菌53株，占52.48%；革蘭陽性菌38株，占37.62%；真菌4株，占3.96%。大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌產超廣譜β-內酰胺酶陽性率分別為29.27%和 33.3%。在凝固酶陰性葡萄球菌(MRSCN)和金黃色葡萄球菌(MRSA)中分別是68.42%和50.0%。結論目前該院血培養(yǎng)病原菌以革蘭陰性菌為主，對分離菌株進行耐藥監(jiān)測可對臨床抗菌治療提供科學依據(jù)，降低病死率。

關鍵詞:血培養(yǎng)；血流感染；病原菌；耐藥性

近年來隨著廣譜抗菌藥的大量應用，細菌的多重耐藥問題越來越嚴重，如何合理使用抗菌藥物已成為全球廣泛關注的問題。血流感染(BSI)是非常嚴重的全身性感染，是各種病原微生物和毒素侵入血循引起菌血癥、敗血癥、膿毒癥和導管相關性血流感染(CRBSI)等導致的全身多器官功能障礙綜合征(MODS)[1]。血液、骨髓培養(yǎng)檢出陽性病原菌是臨床診斷BSI的重要依據(jù)，由于大量抗菌藥物及侵襲性血管內裝置的廣泛應用，使血培養(yǎng)病原菌的分布和藥敏情況發(fā)生了變遷[2]，而各級醫(yī)療機構病種與用藥習慣上也存在差異，因此血培養(yǎng)及時、準確地分離病原菌，掌握耐藥性趨勢對臨床有針對性地抗菌治療至關重要。本文回顧性分析了本院血培養(yǎng)陽性菌株臨床分布及藥敏情況，現(xiàn)將結果報道如下。

1材料與方法

1.1標本來源3 342份血液標本來自本院2014年1～8月門診及住院患者，無菌條件下采集靜脈血，成人8～10 mL，兒童及嬰幼兒1～3 mL，注入血培養(yǎng)瓶中，及時送檢[3]。

1.2儀器與試劑采用法國梅里埃Bact /ALERT 3D 全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)及配套血培養(yǎng)瓶(分成人培養(yǎng)瓶及兒童培養(yǎng)瓶)，Vitek32全自動微生物分析/藥敏系統(tǒng)及配套的鑒定卡和藥敏卡。

1.3方法

1.3.1病原菌的分離血培養(yǎng)接收后立即按Bact/ALERT 3D操作程序上機培養(yǎng)監(jiān)測。儀器出現(xiàn)陽性報警時，轉種血平板、巧克力平板、麥康凱平板、沙保羅平板，同時直接涂片革蘭染色后報告危急值。平板置CO2培養(yǎng)箱，37 ℃培養(yǎng)18～24 h；分離培養(yǎng)檢測5 d 后顯示陰性瓶者卸瓶用血平板盲傳1次，放37 ℃培養(yǎng)24 h或48 h為無菌生長則報陰性。細菌培養(yǎng)與鑒定參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》要求進行[4]。

1.3.2病原菌的鑒定與藥敏試驗病原菌株分離純化后按儀器要求配制懸液，用Vitek32選擇相應鑒定卡和藥敏板條進行鑒定和藥敏試驗，試驗嚴格按操作說明進行，判斷標準遵循美國臨床和實驗室標準化協(xié)會(CLSI)M100最新規(guī)則。

1.4質控菌株儀器質控使用標準菌株為大腸埃希菌(ATCC25922)、銅綠假單胞菌(ATCC27853) 和金黃色葡萄球菌(MRSA，ATCC25923)。

1.5數(shù)據(jù)分析采用WHONET5.6軟件進行細菌分布和藥敏數(shù)據(jù)分析。

2結果

2.1菌株種類和構成3 342份血培養(yǎng)標本,陽性標本為101份,陽性率3.02%。其中革蘭陽性菌38株(37.62%)，革蘭陰性菌53株(52.48%)，真菌4株(3.96%)，革蘭陽性桿菌4株(3.96%)，見表1。

表1　血培養(yǎng)陽性菌株的種類和構成比

注：G-b代表革蘭陰性菌；G-c代表革蘭陰性球菌；G+b代表革蘭陽性桿菌；G+c代表革蘭陽性菌；F代表真菌；-表示無數(shù)據(jù)。

2.2血培養(yǎng)陽性的臨床分布血培養(yǎng)陽性菌株在本院14個主要科室的分布情況見表2，檢出陽性細菌主要以大腸埃希菌和表皮葡萄球菌為主。

2.3陽性菌株耐藥分析

2.3.1革蘭陽性菌耐藥性MRSA和凝固酶陰性葡萄球菌(MRSCN)的比例分別為50.0%和68.42%，未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素和利奈唑胺中介或耐藥的葡萄球菌。腸球菌對四環(huán)素耐藥性高，無萬古霉素耐藥。產單核李斯特菌對頭孢噻肟、克林霉素耐藥性高，對萬古霉素敏感。

表2　血培養(yǎng)陽性病原菌的臨床分布

2.3.2革蘭陰性菌耐藥性大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)的檢出率分別為29.27%和33.3%。大腸埃希菌對亞胺培南或厄他培南均敏感。銅綠假單胞菌對氨芐西林和復方磺胺甲噁唑、頭孢唑林的耐藥率皆為100.0%，對哌拉西林、妥布霉素和亞胺培南都敏感。

3討論

血流感染是臨床常見、嚴重的感染性疾病,具有起病急、病死率高的特點，是醫(yī)院內感染和死亡的主要原因之一，依靠血培養(yǎng)提供的陽性結果是診斷血流感染的金標準[5]。對血培養(yǎng)檢出的病原菌進行回顧性研究可指導臨床合理用藥，緩解院內感染壓力。本文統(tǒng)計陽性率為3.02%，比郝秀紅等[6]報道的結果低，但與蔣文強等[7]結果相近，可能與采血量、采血時機、采血前抗菌藥物使用，以及地域和人群類別等有關。本院血流感染革蘭陰性菌占優(yōu)勢，與黃越芳等[8]報道一致，也符合近年醫(yī)院感染主要病原菌的報道[6,9]。隨著抗菌藥物的廣泛應用，臨床血培養(yǎng)病原菌中凝固酶陰性的葡萄球菌(CNS)逐漸增多，這與臨床靜脈導管的使用增加有關,本研究結果也有相似的趨勢[2]，尤以表皮葡萄球菌最多(24.75%)。表皮葡萄球菌可產生大量的細胞間脂多糖黏附素與細胞外黏液樣物質,有助吸附導管表面[10]，同時由于兒童采血不順利、采血時間延長等可導致皮膚定植菌入血，提高檢出率，本院檢出率也符合該趨勢[1-2]。本文血培養(yǎng)病原菌以革蘭陰性菌為主，其中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌檢出率最高，而副傷寒沙門菌、傷寒沙門菌等常見致病菌明顯減少，這可能與衛(wèi)生條件改善，而侵入性醫(yī)療操作、病原菌交替、免疫缺損患者增多等因素有關。

革蘭陰性菌耐藥性增強與抗菌藥物的大量使用誘導產生ESBLs有關。產ESBLs菌是中心靜脈導管留置相關敗血癥的常見病原菌，本研究顯示亞胺培南或厄他培南對產ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌依然具有強大的抗菌作用，可作為治療首選藥物[2,6]。在革蘭陽性菌中CNS檢出率最高，以表皮葡萄球菌為主。CNS 為條件致病菌，但近年留置導管和醫(yī)用植入裝置等各種侵入性診療操作的廣泛使用使其成為重要的醫(yī)院感染病原菌，小兒免疫功能不全也是一個重要易感因素，尤其在引起新生兒敗血癥的病原菌中，CNS的重要性不容忽視[11]。而且表皮葡萄球菌可形成生物膜，使抗菌藥物難以達到良好效果。本院CNS對青霉素耐藥率達100%，對苯唑西林耐藥率達68.42%，未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素、利奈唑胺耐藥菌株，萬古霉素仍是目前治療CNS最有效的藥物[1]。但CNS也是血培養(yǎng)最常見的污染菌，充分考慮血培養(yǎng)報陽性時間和連續(xù)多瓶培養(yǎng)結果，由臨床醫(yī)師結合患者癥狀合考慮，排除污染還是很重要。

血培養(yǎng)是危重患者血行感染診斷及病情監(jiān)測的重要手段，血培養(yǎng)中病原菌耐藥率的增高勢必會影響臨床的治療,因此及時監(jiān)測病原菌變化及耐藥趨勢，指導臨床合理用藥至關重要。

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.13.041

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)13-1846-02

(收稿日期：2016-03-21修回日期：2016-05-30)