電鍉針循經(jīng)感傳治療偏頭痛的療效觀察及機制探析

謝佳更　王　順

(1 黑龍江中醫(yī)藥大學，哈爾濱，150040； 2 黑龍江省中醫(yī)藥科學院，哈爾濱，150000)

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針灸經(jīng)絡

電鍉針循經(jīng)感傳治療偏頭痛的療效觀察及機制探析

謝佳更1王順2

(1 黑龍江中醫(yī)藥大學，哈爾濱，150040； 2 黑龍江省中醫(yī)藥科學院，哈爾濱，150000)

目的：觀察電鍉針循經(jīng)感傳對偏頭痛的臨床療效及部分機制探討。方法：將本院2014年1月至2015年1月80例偏頭痛患者納入研究，隨機分為常規(guī)組和觀察組，各40例。常規(guī)組采用電鍉針非經(jīng)非穴，觀察組采用電鍉針循經(jīng)感傳手法，治療1次/d，約30 min/次，5次/周，2組均連續(xù)治療四周，治療第2周、第4周時比較2組患者偏頭痛發(fā)作次數(shù)、頭痛天數(shù)、McGill疼痛評分、焦慮和抑郁自評量表評分，同時比較2組治療前后BDNF濃度變化。結果：1)治療2周后2組患者偏頭痛發(fā)作次數(shù)、McGill疼痛評分、明顯減少、頭痛天數(shù)較治療前縮短，此時2組各指標差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；2)治療4周后2組患者上述治療繼續(xù)改善，此時觀察組改善的趨勢較對照組明顯(P<0.05)；3)治療后2組患者外周血BDNF濃度均較治療前明顯下降，其中觀察組下降的趨勢更明顯(P<0.05)。結論：電鍉針循經(jīng)感傳可明顯改善偏頭痛癥狀，且具有明顯持續(xù)效應，這可能與其可降低患者BDNF有關。

偏頭痛；電鍉針；循經(jīng)感傳；BDNF

偏頭痛是一種臨床常見的慢性神經(jīng)血管性疾病，世界衛(wèi)生組織明確指出偏頭痛已經(jīng)成為最嚴重的慢性功能障礙性疾病之一[1-5]。20世紀50年代研究人員發(fā)現(xiàn)約有15%～20%人群針刺治療時，會產(chǎn)生循經(jīng)感傳現(xiàn)象，經(jīng)過特殊電刺激后高達95%人群可存在隱性循經(jīng)感傳，且這一結果是可重復驗證的。電鍉針是鍉針的基礎上加用中低頻電刺激，該療法被證實具有明顯的鎮(zhèn)痛、抗炎、抗疲勞和抗緊張等多效應，目前尚無臨床資料觀察電鍉針以循經(jīng)感傳針法對偏頭痛的的療效，因此本團隊進行一系列研究，對電鍉針循經(jīng)感傳對偏頭痛的臨床療效進行觀察并探討其部分機制，報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料本院2014年1月至2015年1月80例偏頭痛患者納入研究，其中男48例，女32例，年齡21～76歲，平均年齡(36.6±11.26)歲，病程1年～10年，平均病程(4.3±1.1)年。頭痛次數(shù)2～7次，平均(4.6±2.23)次，頭痛天數(shù)2～9 d，平均(5.4±2.62)d，McGill疼痛評分4～9分，平均(5.7±1.93)分。SAS評分35～57分，平均(44.6±7.35)分，SDS評分33～56分，平均(44.1±6.42)分。80例患者隨機分為對照組及觀察組，2組患者在年齡、性別、病程、頭痛次數(shù)、頭痛天數(shù)、VAS評分、焦慮抑郁評分等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2診斷標準參照2004年國際頭痛學會制定的“頭痛疾患國際分類”中無先兆型偏頭痛的診斷標準：1)至少5次發(fā)作；2)頭痛發(fā)作持續(xù)4～72 h(未治療或治療不成功)；3)頭痛至少具備以下特點中的2條：a.單側;b.搏動性;c.疼痛程度為中度或重度;d.日常體力活動可以加劇或造成避免日常體力活動(如散步或爬樓梯)；在頭痛期間至少具備以下中的1條:a.惡心和/或嘔吐;b.畏光和畏聲；c.不歸因于其他疾患。

1.3治療方法2組患者均采用仰臥位，對照組用電鍉針針刺風池穴(針尖向鼻尖方向斜刺20～30 mm)、率谷穴(向下平刺13～25 mm)，針刺經(jīng)穴得氣后予調(diào)節(jié)頻率1～20 Hz，電針30 min/次，1次/d，治療5次/周。觀察組先針刺風池穴，針尖向鼻尖方向斜刺20～30 mm，得氣往率谷穴感傳后起針，再針刺率谷穴，向下平刺13～25 mm。針刺經(jīng)穴得氣后予調(diào)節(jié)頻率1～20 Hz，電針30 min/次，1次/d，治療5次/周。

1.4各組治療前及治療后BDNF的濃度檢測方法取患者治療前及治療1個月外周抗凝血5 mL，用人淋巴細胞分離液提取外周血單核細胞(PBMC，1×106/mL)200 μL，置于含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基中，加入刺激劑佛波醇乙酯(PMA)及離子霉素、莫能霉素等工作液并混勻，置于37 ℃，5%CO2。培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4～6 h。用磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗，離心收集細胞，將收集的細胞加入100 μL裂解液，4 ℃持續(xù)振搖30 min，離心(12 000 r/min，20 min)后，將上清轉(zhuǎn)人預冷的離心管，考馬斯亮蘭法測定蛋白濃度。灌使用10%分離膠灌膠，待膠凝固后，在分離膠上加入5%濃縮膠，放上樣梳子；取已制備好的細胞蛋白，每孔上樣量20 μL，不足20 μL者用IP細胞裂解液補足，70 V電泳40 min，Marker通過濃縮膠后，110 V電泳2 h，電泳后用380 mA電流將蛋白轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素濾膜，濾膜經(jīng)30 g/L脫脂奶粉封閉1 h后，剪膜，根據(jù)分子量分開后分別以加1∶500稀釋的一抗(BDNF)及內(nèi)參抗體(β-actin，1∶3 000)室溫孵育2 h，洗膜3次以1∶500稀釋二抗，孵育2 h后，驅(qū)除膜表面氣泡，ECL發(fā)光液發(fā)光后X線片曝光，掃描記錄結果Quantity One軟件進行半定量比較分析，計算各標本目的蛋白與β-actin灰度比。操作方法嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.5簡易McGill疼痛評分包括疼痛分級指數(shù)(PRI)、目測類比定級法(VAS)和現(xiàn)有疼痛強度(PPI)3部分，總分60分，得分越高，疼痛程度越重

1.6統(tǒng)計學方法采用SPSS 16.0軟件進行數(shù)據(jù)分析,計量資料采用(均數(shù)±標準差)表示。先使用Shapiro-Wilk test對數(shù)據(jù)正態(tài)性進行檢測，并用Levene test分析方差齊性。本研究數(shù)據(jù)使用Student，St-Test進行檢驗，P<0.05時視為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

2.12組治療前后偏頭痛發(fā)作狀況、McGill疼痛評分、焦慮和抑郁自評量表評分的比較治療2周后2組患者偏頭痛發(fā)作次數(shù)、McGill疼痛評分均明顯減少、頭痛天數(shù)較治療前縮短，此時2組各指標無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；治療4周后2組患者上述治療繼續(xù)改善，此時觀察組改善的趨勢較對照組明顯(P<0.05)。見表1。

表1　2組治療前后偏頭痛狀況比較±s)

注：*表示與治療前比較P<0.05;△表示與同時期對照組比較P<0.05。

表2　2組治療前后疼痛評分及負面情緒積分比較±s)

*表示與治療前比較P<0.05;△表示與同時期對照組比較P<0.05。

2.22組治療前后外周血BDNF蛋白的表達用Western blotting對不同治療組患者人外周血單核細胞BDNF蛋白進行檢測，結果發(fā)現(xiàn)：2組治療前BDNF蛋白表達無明顯統(tǒng)計學意義(P>0.05)；治療4周后，觀察組的BDNF蛋白濃度低于對照組(P<0.05)。見表3、圖1。

表3　2組治療前后BDNF/內(nèi)參(IOD比值)的情況

圖1　2組治療前后BDNF濃度變化比較

3　討論

到目前為止，針灸對偏頭痛的療效被不斷證實，但臨床多對其療效進行觀察，至于偏頭痛的發(fā)病及針刺發(fā)揮療效的機制目前尚未完全闡明，其中三叉神經(jīng)血管反射學說被認為是目前解釋偏頭痛發(fā)病機制的主流學說，三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)的神經(jīng)元主要發(fā)揮疼痛信號初級傳入的功能，是目前研究該病的熱點所在。近年來，國內(nèi)外學者對BDNF/TrkB信號通路在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疼痛發(fā)病過程中的作用進行了大量研究，表明BDNF在中樞敏化過程中起到關鍵作用，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)疼痛產(chǎn)生途徑中的一個重要神經(jīng)傳導因子[3-5]。有實驗指出，BDNF的表達上調(diào)參與了偏頭痛的發(fā)生發(fā)展，可能與偏頭痛發(fā)病機制中的中樞敏化有關，有學者研究發(fā)現(xiàn)偏頭痛大鼠腦組織中的BDNF過度表達，表明BDNF可能參與了偏頭痛痛覺信號的傳導，在偏頭痛發(fā)病機制中發(fā)揮作用[6-7]。鄧惠慧[8]探討頭痛寧膠囊治療偏頭痛的作用機制，研究結果提示頭痛寧膠囊能夠改善偏頭痛大鼠的煩躁行為，其機制可能是通過下調(diào)BDNF蛋白的表達水平來達到防治偏頭痛的作用[8]。在本研究中我們利用不同針灸方法治療偏頭痛患者，結果顯示其確有明顯療效，不但減少患者偏頭痛發(fā)作次數(shù)、發(fā)作天數(shù)，并且顯著下調(diào)了患者的McGill疼痛評分及焦慮抑郁狀態(tài)。于此同時我們發(fā)現(xiàn)偏頭痛患者在臨床癥狀改善的同時外周血BDNF的濃度均出現(xiàn)了下調(diào)，BDNF最初作為一種促進外周神經(jīng)元修復的因子而被廣泛研究，隨著研究深入研究人員發(fā)現(xiàn)BDNF在傷害性疼痛信息傳遞中亦具有重要作用，其濃度升高的現(xiàn)象可見于各類神經(jīng)痛的動物模型中，而偏頭痛是由三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)神經(jīng)元傳入疼痛信號，在丘腦部整理疼痛信號后透射至大腦皮質(zhì)，而BDNF在此過程中扮演重要傳導角色，并且以不同形式發(fā)揮中樞敏化效應，從而增強了疼痛信號[9-11]，因此我們認為針灸治療偏頭痛的機制與下調(diào)BDNF蛋白有關。

在本研究中我們比對了2種針灸手法，結果顯示接受循經(jīng)感傳手法的患者偏頭痛改善較常規(guī)手法患者明顯。早在《靈樞·邪氣臟腑病形》一書中古人就對循經(jīng)感傳進行描述，《素問·寶命全形論》中將循經(jīng)感傳形容為“見其烏烏，見其稷稷，徒見其飛，不知其誰”，明代針灸家楊繼洲在《針灸大成》中指出：“有病道遠者，必先使氣直到病所”，他認為使用特定的針刺手法促使針感傳導至病變部位，這是針灸發(fā)揮治療效果的關鍵，且應以“寧失其穴，勿失其經(jīng)，寧失其時，勿失其氣”為針灸治療原則。20世紀50年代我國研究人員發(fā)現(xiàn)針刺時循經(jīng)感傳現(xiàn)象可跨越身體多個部位，與單一神經(jīng)、淋巴管或者大血管等分布不存在直接關系，研究人員認為針刺引起的興奮信號在中樞神經(jīng)系統(tǒng)進行擴散，從而出現(xiàn)了感傳現(xiàn)象，這正是所謂的“中樞興奮擴散學說”[12-13]。隨著研究的不斷深入，又有研究人員[14]通過經(jīng)絡敏感人腦電圖進行記錄，發(fā)現(xiàn)發(fā)生感傳時受試人員的顱內(nèi)并未有放電現(xiàn)象，因此“中樞興奮擴散學說”逐漸受到質(zhì)疑，但至目前尚無明確定論。隨著分子生物學研究的不斷深入，逐漸有學者用其解釋循經(jīng)感傳現(xiàn)象的發(fā)生，此次研究我們發(fā)現(xiàn)運用循經(jīng)感傳治療后患者在改善偏頭痛癥狀的同時，其外周血BDNF的下調(diào)幅度較常規(guī)取穴法明顯，因此我們認為循經(jīng)感傳可增強針刺下調(diào)BDNF的濃度，從而增強其療效。

由此，電鍉針可明顯緩解偏頭痛臨床癥狀，通過循經(jīng)感傳手法可增強電鍉針的療效，改善患者焦慮

狀態(tài)，提高生活質(zhì)量，其作用機制可能與下降BDNF的表達有關。

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(2016-03-07收稿責任編輯：徐穎)

The curative Effect Observation and Mechanism Analysis of Electric Arrowhead Needle Propagated Sensation Along Channel in the Treatment of Migraine

Xie Jiageng1，Wang Shun2

(1HeilongjianguniversityofChinesemedicineHeilongjiang，Harbin150040,China；2HeilongjiangacademyoftraditionalChinesemedicineHeilongjiang,Harbin150000,China)

Objective:To observe the curative effect and part of the mechanism discussion of electric arrowhead needle propagated sensation along channel in the treatment of migraine.Methods:Eighty cases of patients with migraine in our hospital during January 2014-January 2015 were included in the study，randomly divided into the conventional group and the observation group，40 cases in each group.The conventional group used electric arrowhead needle with non-acupoint，the observation group used electric arrowhead needle propagated sensation along channel，1 time/day，30 min/time，5 times a week，both of the two groups had continuous treatment for 4 weeks，at the time of the 2nd week，the 4th week after the treatment，compared the two groups of patients with migraine attack frequency，headache days，McGill scores，Anxiety and depression self rating scale score，contemporary compared BDNF concentration changes before and after treatment of the two groups.Results:1)2 weeks after the treatment，both of the two groups of patients with migraine，McGill scores were with obvious reduction，the headache days were shortened，the various indicators of the two groups were with no statistical differences(P>0.05);2)4 weeks after treatment，the indicators in both the two groups continue improved，the improved trend of the observation group were significantly than the control group(P<0.05).3)Peripheral blood concentrations of BDNF in the patients of the two groups were significantly decreased after treatment，the downward trend in the observation group was more obvious(P<0.05).Conclusion:Electric arrowhead needle propagated sensation along channel can obviously improve the symptoms of migraine，and with obvious persisitency effect，this may be related to the reduction of BDNF in the patients.

Migraine;Electric arrowhead needle;Propagated sensation along channel;BDNF

黑龍江省醫(yī)藥衛(wèi)生科研攻關項目(編號：201103245)

謝佳更(1988.01—)，女，在讀博士，住院醫(yī)師，研究方向：針灸防治中風病的研究，E-mail：254257112@qq.com

王順(1965.08—)，男，博士，主任醫(yī)師，研究方向：針灸防治中風病的研究，Tel：(0451)87588511，E-mail：254257112@qq.com

R246

A doi：10.3969/j.issn.1673-7202.2016.07.044