銀屑病患者外周血 TL1A及其受體DcR3的表達

繆澤群　宋繼權　張麗芳　鄭楷平　宋　韜　盛晚香

銀屑病患者外周血 TL1A及其受體DcR3的表達

繆澤群宋繼權張麗芳鄭楷平宋韜盛晚香

目的： 檢測腫瘤壞死因子樣配體1A（TL1A）及其受體DcR3在尋常型銀屑病患者外周血中的表達。方法： 采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測30例尋常型銀屑病患者及30名健康對照者血清中TL1A及其受體DcR3的水平。結果： 銀屑病組外周血TL1A和DcR3水平分別為（478.21± 231.18）pg/mL和（638.31±310.73）pg/mL，顯著高于對照組的（125.67±82.85）pg/mL和（245.16± 111.52）pg/mL（均P＜0.05）。進行期患者TL1A和DcR3水平分別為（584.91±298.52）pg/mL和（860.41±402.78）pg/mL，顯著高于靜止期患者的（261.73±120.84）pg/mL和（467.34±225.16）pg/mL（均P＜0.05）；銀屑病患者組外周血TL1A與DcR3水平呈正相關。結論： 銀屑病患者外周血清TL1A及其受體DcR3水平顯著升高，TL1A可能通過與其受體DcR3結合參與銀屑病的發生與發展。

銀屑病； 腫瘤壞死因子樣配體1A； 誘騙受體3

腫瘤壞死因子樣配體1A（TNF-like ligand 1 aberrance，TL1A），屬于腫瘤壞死因子超家族成員 15 （tumornecrosisfactorsuperfamilymember15，TNFSF15）。TL1A通過與其受體結合影響機體免疫調節。近年研究發現，TL1A與其受體在腫瘤［1］、自身免疫性疾病［2］、炎性腸病［3］以及動脈粥樣硬化［4］等的發生發展中起到重要作用，誘導炎癥的發生發展過程，TL1A及其受體也可能在銀屑病發病機制中發揮作用，導致銀屑病患者表皮炎性細胞浸潤、角質細胞角化異常及真皮血管異常增生。TL1A主要由內皮細胞及淋巴細胞產生，TL1A除了以膜結合形式存在以外，同時也存在可溶性形式。TL1A擁有兩個受體，分別為DR3和DcR3，通過與其特定的受體相結合在炎癥中發揮不同的作用。TL1A與DR3結合促進炎癥的發生發展、誘導細胞凋亡、抑制腫瘤生長，還具有獨特的Th1及Th17極化特性，在Th1及Th17介導的免疫反應發生發展中發揮重要的作用［5，6］。本文選擇30例尋常型銀屑病患者為研究對象，采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測血清中TL1A及其受體DcR3的水平，研究TL1A及其受體DcR3在銀屑病中表達的相關性。

1　資料和方法

1.1研究對象 觀察組所有標本均來自本院2014 年1月至2014年12月門診及住院患者，經臨床及病理診斷為尋常型銀屑病的患者30例，其中進展期17例，靜止期13例；男18例，女12例，年齡18～82歲，平均（39.65±11.53）歲。納入標準：①PASI評分診斷為中、重度尋常型銀屑病；②3個月內無光療或光化學治療史；③2周內無糖皮質激素治療史；④6周內無維A酸類藥物、免疫調節劑及中藥等系統性抗銀屑病治療史；⑤經倫理委員會批準，患者知情同意并簽署書面文件。排除標準：①合并有著色性干皮病、皮肌炎、系統性紅斑狼瘡等其他免疫功能疾病；②妊娠期及哺乳期；③無嚴重肝腎功能損害、無糖尿病及心臟病。選取同期健康志愿者30例為對照組，其中男16例，女14例，年齡19～80歲，平均（38.71±10.86）歲。兩組間年齡和性別差異無統計學意義（P＞0.05）。

2　結果

2.1銀屑病患者組外周血TL1A、DcR3水平比較

銀屑病患者組外周血TL1A、DcR3水平顯著高于正常對照組（t=7.86，6.52，均P＜0.05）；進行期患者組外周血 TL1A、DcR3水平顯著高于靜止期（t=3.67，3.15，均P＜0.05），詳見表1。

表1　銀屑病患者組外周血TL1A、DcR3水平與正常對照組比較 （ˉx±s，pg/mL）

2.2TL1A與DcR3間相關性分析 銀屑病患者組外周血TL1A與DcR3水平呈正相關趨勢（r=0.347，P＜0.05）。

2.3銀屑病患者外周血TL1A、DcR3與PASI相關性分析 銀屑病患者組外周血TL1A水平與PASI無相關性（r=0.285，P＞0.05）；銀屑病患者組外周血DcR3水平與PASI呈正相關（r=0.372，P＜0.05）。

3　討論

TL1A與DcR3結合抑制細胞凋亡及自身免疫反應，介導慢性炎癥及血管增生［7］，促進Th2細胞功能等。DcR3是新發現的可溶性腫瘤壞死因子受體（TNFRSF6B），目前已知 DcR3的配體主要有 FasL （TNFSF6）、LIGHT（TNFSF14）、TL1A（TNFSF15），DcR3與這3種配體的親和力依次為：TL1A＞FasL＞LIGHT［8］。DcR3競爭性結合TL1A，而DcR3本身缺少跨膜結構域，兩者結合拮抗了TL1A-DR3介導的細胞凋亡信號，促炎介質的分泌，誘騙阻礙機體免疫系統的監視和清除。但DcR3并沒完全像其他TNFR超家族成員一樣觸發“反轉信號”調節細胞功能，DcR3阻斷DR3后繼續協同TL1A參與炎癥的發生發展［9］。此外，DcR3降低IL-2反應的生物活性，上調基質金屬蛋白酶-2mRNA的表達及活性，促進新生血管形成［10］。近來有報道顯示，血清或組織中DcR3水平可作為多種腫瘤及自身免疫性疾病的生物學標志物［11］。

我們的研究結果顯示，銀屑病患者外周血TL1A、DcR3水平顯著高于正常對照組，且進行期患者TL1A、DcR3水平顯著高于靜止期（P＜0.05），提示二者可能參與銀屑病的發生發展；銀屑病患者組外周血TL1A與DcR3水平呈正相關趨勢（P＜0.05），提示二者在銀屑病的發病機制中有一定的協同作用，TL1A可能作為銀屑病發病的啟動因子與DcR3結合介導炎癥反應，促使炎性細胞浸潤、表皮角質細胞角化異常及真皮血管異常增生。TL1A/DcR3在銀屑病發病機制中的作用還有待進一步研究，為新一代以受體為主的生物靶向治療的應用開發奠定理論基礎。

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［11］Lin WW，Hisieh SL.Decoy receptor 3：a pleiotropic immunomodulator and biomarker for inflammatory diseases，autoimmune diseases and cancer［J］.Biochem Pharmacol，2011，81（7）：838-847.

（收稿：2015-06-01 修回：2015-06-15）

The level of TL1A and its receptor DcR3 in the peripheral blood of patients with psoriasis vulgaris

MIAO Zequn，SONG Jiquan，ZHANG Lifang，ZHENG Kaiping，SONG Tao，SHENG Wanxiang.
Department of Dermatology，Zhongnan Hospital，Wuhan University，Wuhan 430071，China

Objective：To detect the level of TL1A and its receptor DcR3 in the peripheral blood of patients with psoriasis vulgaris.Methods：The level of serum L1A and its receptor DcR3 was detected by enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）in 30 patients with psoriasis vulgaris and 30 healthy controls.Results：The level of serum TL1A and its receptor DcR3 in the patients was（478.21±231.18）pg/mL and （638.31±310.73）pg/mL，which were higher than those in healthy controls（125.67±82.85 pg/mL and 45.16 ±111.52 pg/mL）（P＜0.05）and those in the patients of progressive stage were（584.91±298.52）pg/mL and （860.41±402.78）pg/mL，which were higher than those in the patients of stable stage（261.73±120.84 pg/ mL and 67.34±225.16 pg/mL）（P＜0.05）.The level of TL1A in the patients with psoriasis vulgaris was positively correlated with DcR3（P＜0.05）.Conclusion：The level of TL1A and its receptor DcR3 in the peripheral blood of patients with psoriasis vulgaris was significantly increased and TL1A may play important roles in the progress of psoriasis vulgaris by combining with its receptor DcR3.

psoriasis；TNF-like ligand 1 aberrance；decoy receptor 3

湖北省自然科學基金項目（編號：2014CFB360）

武漢大學中南醫院皮膚科，湖北武漢，430071

1.2實驗方法 采用雙抗體夾心ELISA法檢測血清中TL1A及其受體DcR3的水平。受檢者清晨空腹靜脈采血2 mL，3000 r/min離心分離血清，快速凍存于-20℃冰箱。Human TL1A ELISA Kit（美國 R&D公司），Human DcR3 ELISA Kit（美國R&D公司），嚴格按使用說明書操作。采用Bio-Rad550酶標儀（美國Bio-Rad公司）在450 nm處測A值，建立標準曲線求出樣品中的含量。

1.3采用銀屑病皮損面積和嚴重程度（psoriasis area and severity index，PASI）評分對皮損進行評價［1］。

1.4統計學方法 所有數據均用SPSS 15.0統計軟件進行處理，計量資料以均數±標準差（ˉx±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗。TL1A、DcR3與PASI評分的相關性及TL1A與DcR3間表達相關性分析采用Spearman等級相關分析，P＜0.05為差異有統計學意義。