玫瑰糠疹患者外周血IL-17和IL-22的表達(dá)

周瓊艷　葉小磊　許素玲　彭　嵐

玫瑰糠疹患者外周血IL-17和IL-22的表達(dá)

周瓊艷1葉小磊2許素玲1彭嵐3

目的： 檢測外周血IL-17和IL-22在玫瑰糠疹患者中的水平。方法： 采取酶聯(lián)免疫（ELISA）雙抗體夾心法，檢測45例玫瑰糠疹急性期患者、45例恢復(fù)期患者和45名健康人外周血中IL-17和IL-22的水平。結(jié)果： 玫瑰糠疹急性期、恢復(fù)期患者與正常對照組外周血IL-17濃度分別為45.08±14.34 pg/mL，29.34±11.88 pg/mL和15.51±8.79 pg/mL。IL-22濃度分別為85.43±20.01 pg/mL，61.26±10.37 pg/mL和50.54±13.28 pg/mL。三組IL-17和IL-22水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論： 玫瑰糠疹急性期及恢復(fù)期患者均存在IL-17和IL-22的表達(dá)異常，該疾病可能存在Th17細(xì)胞亞群失衡。

玫瑰糠疹； ELISA； IL-17； IL-22

玫瑰糠疹（Pityriasis rosea，PR）是臨床常見的一種病因不明的急性炎癥性皮膚病，屬于丘疹鱗屑性皮膚病，其發(fā)病機(jī)制至今尚未闡明。Th17細(xì)胞因子是一種新的前炎癥性CD4+T效應(yīng)細(xì)胞，IL-17、IL-22是其所產(chǎn)生的代表性細(xì)胞因子［1］，在介導(dǎo)炎性反應(yīng)、紅斑鱗屑性皮膚病等的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。本實(shí)驗通過測定玫瑰糠疹急性期患者、恢復(fù)期患者和健康人血清中IL-17和IL-22的水平，探討Th17細(xì)胞相關(guān)因子與玫瑰糠疹發(fā)病機(jī)制中所起的作用。

1　資料與方法

1.1一般資料 PR急性期患者45例，均來自2013 年10月至2014年10月本院皮膚科門診，為初診患者，男21例，女24例，年齡17～46歲，平均（29.38± 7.28）歲。病程3～12天，平均（7.13±2.69）天。具有典型臨床表現(xiàn)：皮疹呈橢圓形，邊緣覆圈樣游離緣向內(nèi)的細(xì)薄鱗屑，長軸與皮紋平行，常伴不同程度瘙癢，部分患者可見母斑，皮疹多累及軀干、四肢近端［2］。PR恢復(fù)期患者45例，為本院同期收治的PR隨訪患者，病程20～48天，平均（33.56±6.99）天。同期隨機(jī)選取本院健康體檢者45名作為正常對照，恢復(fù)期患者及正常對照組性別、年齡與初診患者相比較無顯著性差異，具有可比性。研究對象均簽署知情同意書。1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) （1）有自身免疫性疾病、腫瘤、心肝腎等重大系統(tǒng)性、免疫性疾病及其他皮膚病者；（2）就診前3天服用抗組胺藥、1個月內(nèi)應(yīng)用糖皮質(zhì)激素、免疫調(diào)節(jié)劑者；（3）妊娠、哺乳期婦女；（4）玫瑰糠疹型藥疹。

1.3檢測方法 抽取正常對照組清晨靜息狀態(tài)下空腹靜脈血5 mL；PR急性期及恢復(fù)期患者同樣抽取清晨空腹靜脈血5 mL。注入試管中，1500 r/min離心10 min，吸取上層血清后置-80℃冰箱內(nèi)保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測研究對象血清中IL-17和IL-22水平，IL-17檢測試劑盒為RD sys-tem、貨號D1700，IL-22檢測試劑盒為RD system、貨號D2200，試驗步驟嚴(yán)格按試劑說明書操作。檢測儀器為Thermo MultiScan MK3酶標(biāo)儀。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，所得數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ˉx±s）表示，三組數(shù)據(jù)之間的比較采用單因素方差分析（ANOVA），P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1外周血中IL-17濃度測定 見表1。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，PR急性期組、PR恢復(fù)期組及正常對照組三組之間相互比較外周血 IL-17表達(dá)有顯著差異（P＜0.001）。

表1　IL-17和IL-22在3組外周血中的水平

2.2外周血中IL-22濃度測定 見表1。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，PR急性期組與正常對照組比較有顯著差異（P ＜0.001），PR恢復(fù)期組與正常對照組比較有差異（P＜0.01），PR急性期組與PR恢復(fù)期組比較有顯著差異（P＜0.001）。

3　討論

PR屬于紅斑丘疹鱗屑性皮膚病，有自限性，但病程較長，一般為6～8周，少數(shù)患者數(shù)月甚至數(shù)年不愈，有不同程度瘙癢，影響患者及家屬生活質(zhì)量，其病因尚不明確。Neoh等［3］從PR的母斑和繼發(fā)斑切取組織標(biāo)本進(jìn)行病理檢查后發(fā)現(xiàn)大多數(shù)標(biāo)本中存在淋巴細(xì)胞胞吐現(xiàn)象。免疫學(xué)分析發(fā)現(xiàn)皮損血管周圍大量抗HLA-DR單克隆抗體、抗T細(xì)胞抗體相關(guān)的淋巴細(xì)胞浸潤。T細(xì)胞作為獲得性免疫反應(yīng)最主要的成分，釋放出各種細(xì)胞因子，引起特異性免疫反應(yīng)，張曉光等［4］研究發(fā)現(xiàn)PR患者體內(nèi)存在Th1/Th2亞群的失衡，上調(diào)Th1細(xì)胞亞群的細(xì)胞因子占優(yōu)勢，其介導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)參與PR的發(fā)生、發(fā)展。

CD4+T細(xì)胞常稱為Th細(xì)胞，是免疫反應(yīng)的重要調(diào)控細(xì)胞，可促進(jìn)抗體產(chǎn)生和介導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)，主要是Th1和Th2兩個亞群。而近年來研究發(fā)現(xiàn)，人體內(nèi)存在一群不同于Th1和Th2的細(xì)胞亞群，分泌高水平的IL-17，被命名為Th17細(xì)胞，Th17誘導(dǎo)分化后，分泌IL-17、IL-17F、IL-21和IL-22，在自身免疫性疾病、感染、腫瘤、紅斑鱗屑性皮膚病如銀屑病中發(fā)揮重要作用［5-7］。Th1、Th2、Th17三者的相互調(diào)控，使效應(yīng)和抑制處于一種相對精細(xì)和復(fù)雜的平衡體系中。IL-17調(diào)節(jié)促炎性因子和趨化因子等的產(chǎn)生及分泌，在自身免疫性疾病和感染性疾病中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。IL-22可增強(qiáng)角質(zhì)細(xì)胞分泌多種抗微生物肽，以及多種與皮膚修復(fù)重建有關(guān)的蛋白酶，從而促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞的固有免疫應(yīng)答水平。

本研究通過ELISA檢測玫瑰糠疹患者和正常健康者的外周血Th17細(xì)胞相關(guān)因子IL-17和IL-22，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，玫瑰糠疹急性期、恢復(fù)期患者均明顯高于正常對照組，同時發(fā)現(xiàn)，急性期患者IL-17，IL-22的表達(dá)亦高于恢復(fù)期患者，提示玫瑰糠疹患者中外周血Th17細(xì)胞相關(guān)因子存在高表達(dá)，由此，我們推測Th17細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫可能與玫瑰糠疹的發(fā)病、病程發(fā)展及皮損的產(chǎn)生等起重要作用。

綜上所述，筆者認(rèn)為PR患者的發(fā)病機(jī)制與Th17細(xì)胞功能增強(qiáng)有關(guān)，進(jìn)一步深入研究Th17相關(guān)細(xì)胞因子對PR發(fā)病機(jī)制的研究及發(fā)現(xiàn)潛在治療靶點(diǎn)有較大意義。

［1］孫奇.IL-22—炎癥性疾病關(guān)鍵因子［J］.免疫學(xué)雜志，2011，27（9）：821-824.

［2］張學(xué)軍.皮膚性病學(xué)［M］.8版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2013.143.

［3］Neoh CY，Tan AW，Mohamed K，et al.Characterization of the inflammatory cel1 inflhrate in herald patches and fully developed eruptions of pityriasis rosea［J］.Clin Exp Dermatol，2010，35（3）：300-304.

［4］張曉光，李建英，王愛學(xué)，等.玫瑰糠疹和慢性蕁麻疹患者血清中IL-4和IL-12水平的研究［J］.中國麻風(fēng)皮膚病雜志，2012，28（4）：260-261.

［5］曾義斌，方芳，翁孟武.尋常疣患者外周血Th17細(xì)胞相關(guān)因子的表達(dá)及意義［J］.中國皮膚性病學(xué)雜志，2012，26 （8）：686-688.

［6］Li J，Li D，Tan Z.The expression of interleukin-17，interferon-gamma，and macrophage inflammatory protein-3 alpha Mr-NA in patients with psoriasis vulgaris［J］.J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci，2004，24（3）：294-296.

［7］Korn T，Bettel li E，Oukka M，et al.IL-17 and Th17 cells ［J］.Annu Rev Immunol，2009，27：485-517.

［8］趙世享，王培光，楊森.玫瑰糠疹的研究進(jìn)展［J］.國際皮膚性病學(xué)雜志，2012，38（1）：13-16.

（收稿：2015-03-03 修回：2015-07-21）

Expression of IL-17 and IL-22 in the patients with pityriasis rosea

ZHOU Qiongyan1，YE Xiaolei2，XU Suling1，PENG Lan3
1.Department of Dermatology，Affiliated Hospital of Medical College of Ningbo University，Ningbo 315020，China；2.Ningbo Institute of Medical Sciences，Ningbo 315020，China；3.Department of Clinical Laboratory，the Affiliated Hospital of Medical College of Ningbo University，Ningbo 315020，China；

Objective：To detect the serum level of IL-17 and IL-22 in patients with pityriasis rosea. Methods：The levels of IL-17 and IL-22 were detected by ELISA in patients with pityriasis rosea（45 patients at the active stage，45 patients at the recovery stage）and 45 healthy controls.Results：The levels of IL -17 of pityriasis rosea patients at active stage，recovery stage and healthy controls were（45.08±14.34）pg/ mL，（29.34±11.88）pg/mL and（15.51±8.79）pg/mL respectively，with significant differences among the three groups（P＜0.05）.The levels of IL-22 were（85.43±20.01）pg/mL，（61.26±10.37）pg/mL and （50.54±13.28）pg/mL respectively，with significant differences among the three groups（P＜0.05）. Conclusion：The expression of IL-17 and IL-22 of pityriasis rosea at active stage and recovery stage are both increased，which indicates an imbalance of Th17 cell subsets in pityriasis rosea.

pityriasis rosea；ELISA；IL-17；IL-22

寧波大學(xué)校級科研項目（編號：XYY13003）

1寧波大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院皮膚科，浙江寧波，315020

2寧波市醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所藥物與藥理研究室，浙江寧波，315020

3寧波大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗科，浙江寧波，315020