注射用鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯的有關(guān)物質(zhì)研究

北京四環(huán)科寶制藥有限公司（100070）陳婧 方賢羅 陳紅燕 高萬(wàn)峰

鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯是甲砜霉素的衍生物，是氯霉素的同類(lèi)物，抗菌譜和抗菌作用與氯霉素相似。其水溶性好，當(dāng)溶液的pH值增高或受到體內(nèi)酶的作用后，迅速釋放出甲砜霉素而發(fā)揮作用[1]。鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯拓寬了甲砜霉素的臨床應(yīng)用，克服了其水溶性差的劣勢(shì)[2]。我們?cè)诖罅垦芯康幕A(chǔ)上建立了一種準(zhǔn)確快速檢測(cè)注射用鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯有關(guān)物質(zhì)的高效液相色譜法并對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行了歸屬研究，同時(shí)對(duì)自制樣品與市售樣品的雜質(zhì)水平進(jìn)行了對(duì)比。

1 儀器與試藥

島津LC Solution高效液相色譜儀（日本島津公司）；Sartorius PB-10型酸度計(jì)（德國(guó)賽多利斯公司）；CP225D型電子天平（德國(guó)賽多利斯公司）；甲醇為色譜純，水為純化水，其余試劑均為分析純。

2 HPLC測(cè)定方法的建立與驗(yàn)證

2.1 色譜條件的建立 經(jīng)試驗(yàn)，流動(dòng)相pH值對(duì)鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯主峰及其雜質(zhì)峰峰形、峰面積和分離度均有影響。對(duì)流動(dòng)相pH值為3.0和4.5的對(duì)比發(fā)現(xiàn)，前者明顯比后者峰型對(duì)稱性好，積分結(jié)果準(zhǔn)確，各雜質(zhì)峰與主成分峰分離度好。最終確認(rèn)以甲醇-0.05mol/L的磷酸二氫鉀溶液-三乙胺（20∶80∶0.05）用磷酸調(diào)節(jié)pH至3.0為流動(dòng)相，能保證各雜質(zhì)有效檢出。

2.2 溶液pH值對(duì)樣品穩(wěn)定性的影響 分別選用pH4.5流動(dòng)相、0.001 mol/L鹽酸、0.01mol/L鹽酸，以有關(guān)物質(zhì)為指標(biāo)，考察樣品配制后放置穩(wěn)定性情況。結(jié)果表明：不同pH值的溶劑對(duì)鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯的穩(wěn)定性有明顯影響。在pH值對(duì)雜質(zhì)的影響考察中發(fā)現(xiàn)，在考察的3h內(nèi)，在同一pH值條件下，有關(guān)物質(zhì)隨放置時(shí)間延長(zhǎng)而增長(zhǎng)，因此為保證結(jié)果準(zhǔn)確，有關(guān)物質(zhì)測(cè)定時(shí)樣品應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用；在考察的3h內(nèi)，隨著溶液pH值的降低，樣品在放置相同的時(shí)間內(nèi)，雜質(zhì)增長(zhǎng)幅度明顯降低，因此選用溶解樣品的溶劑為0.01mol/L鹽酸，能保證測(cè)定結(jié)果更加準(zhǔn)確。具體數(shù)據(jù)見(jiàn)附表1。

2.3 專(zhuān)屬性試驗(yàn) 取本品適量，進(jìn)行酸、堿、氧化、高溫、光照等條件的強(qiáng)制降解試驗(yàn)，考察降解產(chǎn)物等雜質(zhì)與主成分的分離情況。通過(guò)試驗(yàn)可知，在此色譜條件下，甲砜霉素甘氨酸酯峰與雜質(zhì)峰能夠完全分離，說(shuō)明此色譜條件可以完全滿足本品有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定。

2.4 雜質(zhì)研究 結(jié)合鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯原料的合成工藝，選擇甲砜霉素作為對(duì)照定位制劑中的雜質(zhì)。取甲砜霉素適量，配制成濃度約為10μg/mL的溶液，按有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法進(jìn)樣分析，根據(jù)參考文獻(xiàn)[1]中的相應(yīng)研究并結(jié)合實(shí)際檢測(cè)結(jié)果，可以確定與鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯的相對(duì)保留時(shí)間約為2.0左右的雜質(zhì)為甲砜霉素。

2.5 與市售制劑有關(guān)物質(zhì)對(duì)比研究 取市售的注射用鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯作為對(duì)照藥，與自制樣品，按上述有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)，記錄色譜圖（見(jiàn)附圖1～2），由色譜圖可以看出，市售樣品雜質(zhì)個(gè)數(shù)比自制樣品多，且市售樣品雜質(zhì)峰與主成分峰分離度不理想。按面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算，市售樣品最大單一雜質(zhì)和總雜質(zhì)均比自制樣品大。結(jié)果見(jiàn)附表2。

附圖1 自制樣品色譜圖

附圖2 市售樣品色譜圖

附表1 溶液穩(wěn)定性考察結(jié)果

附表2 自制樣品與市售樣品雜質(zhì)對(duì)比

3 討論

本文在對(duì)鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯的有關(guān)物質(zhì)色譜條件的流動(dòng)相的組成及其pH值的考察和對(duì)溶解樣品溶劑的pH值對(duì)樣品穩(wěn)定性的研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行了有關(guān)物質(zhì)的方法學(xué)的研究。證明本方法測(cè)定有關(guān)物質(zhì)，能保證各雜質(zhì)有效檢出，峰型對(duì)稱性好，積分結(jié)果準(zhǔn)確，且各雜質(zhì)峰與主成分峰分離度較好；可用于注射用鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯的質(zhì)量控制。結(jié)合鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯原料的合成工藝，選擇甲砜霉素作為對(duì)照定位制劑中的雜質(zhì)，研究表明與鹽酸甲砜霉素甘氨酸酯的相對(duì)保留時(shí)間約為2.0左右的雜質(zhì)為甲砜霉素。按上述選定的有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法檢驗(yàn)自制樣品與市售樣品，由對(duì)比數(shù)據(jù)可以看出，自制樣品的有關(guān)物質(zhì)明顯小于市售樣品。