順德地區421例甲真菌病致病菌分離培養分析

廣東省佛山市順德區慢性病防治中心（528300）黃英河 梁海東 趙偉峰 匡玉寶 陳榕 梁意引

甲真菌病是一種常見的慢性淺部真菌病，是由皮膚癬菌、酵母菌及其他絲狀真菌等致病菌侵犯甲板或甲下組織引起的一種傳染性疾病。其流行狀況因地區不同而存在較大的差異；隨著現今社會的發展，甲真菌病對患者生理功能、日常工作生活、心理狀態和社會活動等產生的影響日趨引起人們的重視。為了解本地區甲真菌病致病菌的種類和構成情況，觀察其流行病學特點，筆者收集2012年2月～2016年3月的到本中心就診而且甲屑真菌直接鏡檢為陽性的甲真菌病患者421例，對其病甲標本作真菌分離培養以及鑒定分析，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源 421例甲真菌病患者均臨床癥狀明顯，病甲真菌直接鏡檢陽性。其中，男186例，女235例，男女比例為1∶1.26，年齡3～92歲，平均35歲。

1.2 標本采集 先用經滅菌的棉簽蘸取無菌生理鹽水，對患者的病甲作適當的表面清潔，再用經滅菌的鈍刀刮取病甲屑，放置于經滅菌的小紙袋中。

1.3 真菌分離培養 用接種鉤挑取紙袋中的甲屑標本，多點平行接種于含氯霉素的沙氏真菌平皿培養基中，置于25℃～27℃恒溫箱里培養2～4周，隔2天觀察一次，連續4周無菌生長為陰性。

1.4 菌種鑒定 絲狀型真菌主要根據菌落生長快慢、菌落形態、培養基顏色變化和小培養的鏡下結構，以及在顯微鏡下大、小分生孢子形態特點等鑒定菌種。酵母類菌落則通過轉種念珠菌顯色培養基鑒定，嚴格按照說明書判讀結果，假如不能得到確切結果，則需要作法國梅里埃ATB分析鑒定。

2 結果

2.1 甲真菌病臨床分型：421例患者中，遠端甲下型甲真菌病(DLSO)282例，全甲破壞型甲真菌病(TDO)59例，近端甲下型甲真菌病(PSO)26例，白色淺表型甲真菌病(SWO)54例，見附表1。

2.2 致病菌構成：421例甲真菌病患者標本分離培養中，培養陽性數為278例，陽性率為66.03%，構成見附表2。

3 討論

甲真菌病的病原菌總體上分為皮膚癬菌、酵母菌和霉菌三類，其中皮膚癬菌無論是鏡檢陽性還是培養陽性均意味著是致病菌，對某些酵母菌和霉菌是致病菌還是污染菌，目前還沒有統一標準。此外，由于皮膚癬菌往往生長緩慢，一些酵母菌或者霉菌則生長較快，容易掩蓋或者競爭抑制皮膚癬菌的生長，因此導致各實驗室的報道結果相差很大。國內學者提出，如分離酵母菌屬(白色念珠菌除外)或霉菌，則連續做2～3次培養，并結合甲病理作出判斷[1][2]。甲真菌病的易感染因素很多，包括原有癬病、甲外傷、糖尿病、潮濕環境、手足多汗者、免疫力低下或伴自身免疫性疾病、免疫抑制劑治療史等等。甲真菌病的發病也與職業有著密切相關，手工作業者、廚師、清潔行業等發病率相對偏高，特別是指(趾)甲美容師、足療浴足師自身發病率較高，而且還容易傳給服務對象。另外，甲真菌病的發生還與個人不良的衛生生活習慣有關,如使用公用拖鞋、洗腳盆、公共浴池、共用指甲鉗、常穿透氣性差的鞋等等。

附表1 421例患者甲真菌病臨床分型構成比

附表2 278例甲真菌分離培養陽性致病菌的構成比

從本次調查研究可以看出，在臨床分型上，DLSO型甲真菌病最常見，占66.98%，且趾甲受累情況稍多于指甲，該分布特征與國外文獻報道的流行規律相似[3][4]。而致病菌構成上，主要致病菌為酵母菌(63.31%)，其次為皮膚癬菌(32.73%)，與張曉軍[5]，何艷嫦[6]等報道一致。然而從菌種來講，皮膚癬菌屬中的紅色毛癬菌最為常見(占30.21%)，其次為酵母菌屬中的白色念珠菌（占25.54%）。

大部分致甲真菌病的真菌對抗真菌藥敏感，因此只要明確感染菌種和傳播途徑，做到早預防、早治療、早診斷，則完全可以預防和治療。本調查的意義在為臨床診斷甲真菌病提供實驗室依據，有助于明確診斷，指導合理用藥，避免濫用抗真菌藥；對群眾和患者進行健康宣傳教育，引導大家通過改變不良的個人衛生習慣，以減少感染的機會。綜上所述，順德地區的甲真菌病的臨床分型以DLSO為主，致病菌以酵母菌為主，其次為皮膚癬菌；菌種以紅色毛癬菌，白色念珠菌，近平滑念珠菌最為常見。臨床上應重視甲真菌分離培養，最好結合相應的藥敏試驗，慎重選擇相應的抗真菌藥，提高甲真菌病的防治水平。