順德地區(qū)421例甲真菌病致病菌分離培養(yǎng)分析

廣東省佛山市順德區(qū)慢性病防治中心（528300）黃英河 梁海東 趙偉峰 匡玉寶 陳榕 梁意引

甲真菌病是一種常見的慢性淺部真菌病，是由皮膚癬菌、酵母菌及其他絲狀真菌等致病菌侵犯甲板或甲下組織引起的一種傳染性疾病。其流行狀況因地區(qū)不同而存在較大的差異；隨著現(xiàn)今社會(huì)的發(fā)展，甲真菌病對患者生理功能、日常工作生活、心理狀態(tài)和社會(huì)活動(dòng)等產(chǎn)生的影響日趨引起人們的重視。為了解本地區(qū)甲真菌病致病菌的種類和構(gòu)成情況，觀察其流行病學(xué)特點(diǎn)，筆者收集2012年2月～2016年3月的到本中心就診而且甲屑真菌直接鏡檢為陽性的甲真菌病患者421例，對其病甲標(biāo)本作真菌分離培養(yǎng)以及鑒定分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 421例甲真菌病患者均臨床癥狀明顯，病甲真菌直接鏡檢陽性。其中，男186例，女235例，男女比例為1∶1.26，年齡3～92歲，平均35歲。

1.2 標(biāo)本采集 先用經(jīng)滅菌的棉簽蘸取無菌生理鹽水，對患者的病甲作適當(dāng)?shù)谋砻媲鍧崳儆媒?jīng)滅菌的鈍刀刮取病甲屑，放置于經(jīng)滅菌的小紙袋中。

1.3 真菌分離培養(yǎng) 用接種鉤挑取紙袋中的甲屑標(biāo)本，多點(diǎn)平行接種于含氯霉素的沙氏真菌平皿培養(yǎng)基中，置于25℃～27℃恒溫箱里培養(yǎng)2～4周，隔2天觀察一次，連續(xù)4周無菌生長為陰性。

1.4 菌種鑒定 絲狀型真菌主要根據(jù)菌落生長快慢、菌落形態(tài)、培養(yǎng)基顏色變化和小培養(yǎng)的鏡下結(jié)構(gòu)，以及在顯微鏡下大、小分生孢子形態(tài)特點(diǎn)等鑒定菌種。酵母類菌落則通過轉(zhuǎn)種念珠菌顯色培養(yǎng)基鑒定，嚴(yán)格按照說明書判讀結(jié)果，假如不能得到確切結(jié)果，則需要作法國梅里埃ATB分析鑒定。

2 結(jié)果

2.1 甲真菌病臨床分型：421例患者中，遠(yuǎn)端甲下型甲真菌病(DLSO)282例，全甲破壞型甲真菌病(TDO)59例，近端甲下型甲真菌病(PSO)26例，白色淺表型甲真菌病(SWO)54例，見附表1。

2.2 致病菌構(gòu)成：421例甲真菌病患者標(biāo)本分離培養(yǎng)中，培養(yǎng)陽性數(shù)為278例，陽性率為66.03%，構(gòu)成見附表2。

3 討論

甲真菌病的病原菌總體上分為皮膚癬菌、酵母菌和霉菌三類，其中皮膚癬菌無論是鏡檢陽性還是培養(yǎng)陽性均意味著是致病菌，對某些酵母菌和霉菌是致病菌還是污染菌，目前還沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。此外，由于皮膚癬菌往往生長緩慢，一些酵母菌或者霉菌則生長較快，容易掩蓋或者競爭抑制皮膚癬菌的生長，因此導(dǎo)致各實(shí)驗(yàn)室的報(bào)道結(jié)果相差很大。國內(nèi)學(xué)者提出，如分離酵母菌屬(白色念珠菌除外)或霉菌，則連續(xù)做2～3次培養(yǎng)，并結(jié)合甲病理作出判斷[1][2]。甲真菌病的易感染因素很多，包括原有癬病、甲外傷、糖尿病、潮濕環(huán)境、手足多汗者、免疫力低下或伴自身免疫性疾病、免疫抑制劑治療史等等。甲真菌病的發(fā)病也與職業(yè)有著密切相關(guān)，手工作業(yè)者、廚師、清潔行業(yè)等發(fā)病率相對偏高，特別是指(趾)甲美容師、足療浴足師自身發(fā)病率較高，而且還容易傳給服務(wù)對象。另外，甲真菌病的發(fā)生還與個(gè)人不良的衛(wèi)生生活習(xí)慣有關(guān),如使用公用拖鞋、洗腳盆、公共浴池、共用指甲鉗、常穿透氣性差的鞋等等。

附表1 421例患者甲真菌病臨床分型構(gòu)成比

附表2 278例甲真菌分離培養(yǎng)陽性致病菌的構(gòu)成比

從本次調(diào)查研究可以看出，在臨床分型上，DLSO型甲真菌病最常見，占66.98%，且趾甲受累情況稍多于指甲，該分布特征與國外文獻(xiàn)報(bào)道的流行規(guī)律相似[3][4]。而致病菌構(gòu)成上，主要致病菌為酵母菌(63.31%)，其次為皮膚癬菌(32.73%)，與張曉軍[5]，何艷嫦[6]等報(bào)道一致。然而從菌種來講，皮膚癬菌屬中的紅色毛癬菌最為常見(占30.21%)，其次為酵母菌屬中的白色念珠菌（占25.54%）。

大部分致甲真菌病的真菌對抗真菌藥敏感，因此只要明確感染菌種和傳播途徑，做到早預(yù)防、早治療、早診斷，則完全可以預(yù)防和治療。本調(diào)查的意義在為臨床診斷甲真菌病提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，有助于明確診斷，指導(dǎo)合理用藥，避免濫用抗真菌藥；對群眾和患者進(jìn)行健康宣傳教育，引導(dǎo)大家通過改變不良的個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣，以減少感染的機(jī)會(huì)。綜上所述，順德地區(qū)的甲真菌病的臨床分型以DLSO為主，致病菌以酵母菌為主，其次為皮膚癬菌；菌種以紅色毛癬菌，白色念珠菌，近平滑念珠菌最為常見。臨床上應(yīng)重視甲真菌分離培養(yǎng)，最好結(jié)合相應(yīng)的藥敏試驗(yàn)，慎重選擇相應(yīng)的抗真菌藥，提高甲真菌病的防治水平。