白靈菇液體菌種制備及應用

王金鳳　聶建軍

摘 要：運用液體菌種栽培技術，可以縮短白靈菇的制種時間，提高生產效率，本文淺析白靈菇液體菌種的制備及應用，擬對白靈菇的生產栽培提供借鑒意義。

關鍵詞：白靈菇；液體菌種；應用

中圖分類號：S646 文獻標識碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20160432020

白靈菇分布于歐亞非內陸荒漠半荒漠地區，生長發育于春末夏初，是一種優良的藥食兩用的大型肉質傘菌，有“牤牛肝菌”、“西天白靈芝”等美稱。受栽培周期長、只能出一潮菇、生物轉化率低等因素的制約，目前我國白靈菇的生產總量不足10萬t，相對于世界消費量已達2000萬t且日益增長的食用菌市場，白靈菇具有很大的市場開發潛力。

1 白靈菇液體菌種制備

1.1 實驗菌株

采用河北大學生命科學學院食藥用真菌研究所提供的母種，保持4℃以下低溫保存。

1.2 培養基

母種培養基：葡萄糖2.0%，土豆15.0%，麥麩5.0%，瓊脂2.0%。將土豆切片和麥麩共煮沸20min，使用4層紗布進行過濾，將葡萄糖和瓊脂投入濾液加水溶解，pH自然，0.1MPa，121℃滅菌20min。

液體培養基：豆餅粉1.0%，玉米粉2.0%，葡萄糖2.0%，酵母膏0.2%，KH2P04 0.1%，MgS04·7H2O 0.1%，pH自然，0.1MPa，121℃滅菌20min。

增稠劑：可以分別選用黃原膠、羧甲基纖維素、果膠、瓊脂等4種不會被菌絲分解的增稠劑調配液體培養基，經過試驗得知，濃度0.1%的黃原膠、濃度0.2%的羧甲基纖維素、濃度0.2%的果膠、濃度0.3%的瓊脂效果最好。

麥粒培養基：99%麥粒，l%石灰，1%石膏，KH2P04 0.1%，MgS04·7H2O0.1%。麥粒要求無霉變、無破損、無干癟，先用l%溫熱石灰水浸泡12h，煮沸后小火加熱30min，直至麥粒熟透而不破皮為止，撈出晾曬表皮無水，按照配方攪拌裝入玻璃瓶（注射液瓶），裝至瓶肩部，塞好瓶塞，保持0.15Mpa，溫度121～126℃，持續2h消毒殺菌。

栽培袋培養基：棉籽皮87%，麩皮10%，石灰1%，石膏1%，KH2P040.5%，MgS04·7H2O0.5%。采用聚丙烯袋或聚乙烯袋，每袋填裝干料400g，保持壓力0.15Mpa，溫度121℃持續消毒殺菌2.5h。

1.3 實驗儀器與設備

電子天平；電熱恒溫培養箱；冰箱；P270型普通搖床；超凈工作臺；立式壓力蒸氣消毒器等。

1.4 培育方法

白靈菇母種制作：把母種培養基切成斜面放置在試管中，將活化后的白靈菇菌種接種到試管中的培養基斜面，在電熱恒溫培養箱中保持25℃，待菌絲長滿試管，放入冰箱保持4℃保藏。

一、二級菌種培養：使用250mL三角形搖瓶稱量液體培養液100mL，放入lcm2活化24h的母種菌塊，設定搖床轉速為150轉/min，保持恒溫25℃，培養96h。完成一級菌種培養。使用250mL三角形搖瓶稱量液體培養液200mL，投入一級菌種10mL，設定搖床轉速為150轉/min，保持恒溫25℃，培養72h。完成二級菌種培養。

麥粒培養基的接種與培養：每個麥粒瓶接入10mL液體菌種，菌種接完后，在24℃黑暗的條件下培養，觀察萌發時間，菌絲覆蓋料面的時間，滿袋時間。

栽培袋培養基的接種與培養：每個栽培袋接入15mL液體菌種，菌種接完后，在24℃陰暗的條件下培養，觀察萌發時間，菌絲覆蓋料面的時間，滿袋時間。另外可以在每袋中放入40～50粒麥粒菌種作接種使用。

2 液體菌種與固體菌種生產周期比較

2.1 2種栽培模式的不同流程

傳統栽培模式：

母種→原種→麥粒培養基→栽培種→栽培袋→出菇

液體菌種栽培模式：母種→一級液體菌種→二級液體菌種→栽培袋→出菇；母種→一級液體菌種→二級液體菌種→麥粒培養基菌種→栽培袋→出菇。

2.2 不同栽培模式的生產時間

傳統栽培模式：由母種生產原種歷時15d，由原種接種麥粒培養基，菌種在麥粒培養基上生長12d制得栽培種，由栽培種接到栽培袋菌料中，菌絲滿袋歷時35d，菌絲后熟歷時30d進入出菇期，全過程需要92d。

液體菌種栽培模式：由母種到一級液體菌種歷時4d，由一級液體菌種到二級液體菌種歷時4d，由二級液體菌種直接接種栽培袋，直至菌絲滿袋歷時20d，菌絲后熟歷時30d進入出菇期，全過程需要58d；由母種到一級液體菌種歷時4d，由一級液體菌種到二級液體菌種歷時4d，由二級液體菌種接種麥粒培養基到菌絲滿瓶歷時8d，由麥粒菌種接種栽培袋到菌絲滿袋歷時35d，菌絲后熟歷時30d進入出菇期，全過程約需80d。

3 結 論

本文探討了白靈菇液體菌種的2種栽培模式，使用第一種模式，可以充分發揮白靈菇菌絲萌發快、分散性好、生長旺盛的優點，把栽培周期縮短37%；按照第二種模式，可以縮短10d以上。總之，液體菌種技術可以縮短白靈菇的生產周期，幫助種植戶節約生產成本，獲取更多的利益。

參考文獻

[1] 董玉蘭，李書生.白靈菇高活力液體菌種搖瓶發酵培養件的優化[J].北方園藝，2014（6）.