我國不同地方品種雞(Gallusgallusdomesticus)對柔嫩艾美耳球蟲的易感性

李建梅，劉　梅，沈欣悅，程　旭，季正劍，劉丹丹，殷建玫，尤素蘭，蘇一軍，陶建平，戴亞斌*

(1.中國農業科學院家禽研究所，揚州 225125；2.揚州大學獸醫學院 禽類預防醫學教育部重點實驗室，揚州 225009)

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我國不同地方品種雞(Gallusgallusdomesticus)對柔嫩艾美耳球蟲的易感性

李建梅1，劉梅1，沈欣悅1，程旭1，季正劍2，劉丹丹2，殷建玫1，尤素蘭1，蘇一軍1，陶建平2，戴亞斌1*

(1.中國農業科學院家禽研究所，揚州 225125；2.揚州大學獸醫學院 禽類預防醫學教育部重點實驗室，揚州 225009)

旨在比較不同品種雞(Gallusgallusdomesticus)對柔嫩艾美耳球蟲的易感性差異。選取26日齡無球蟲感染的24個我國地方品種雞和國外引進品種隱性白羽雞各45只，分別分為2個感染組和1個非感染對照組，每組15只。感染組每只雞嗉囊內接種1×105個孢子化柔嫩艾美耳球蟲卵囊，基于感染雞的死亡率、相對增重率、腸道病變記分、卵囊產量和抗球蟲指數(ACI)等指標，評價不同雞種對柔嫩艾美耳球蟲的易感性。25個雞種中，狼山雞、藏雞、大骨雞、蕭山雞、文昌雞、安義瓦灰雞、白耳黃雞、仙居雞、大圍山微型雞和金湖烏鳳雞易感性最低，ACI介于56.80～85.76，表現為未發生死亡或死亡率低，相對增重率高，腸道病變記分低，但卵囊產量相對較高(藏雞除外)。隱性白羽雞、清遠麻雞、惠陽胡須雞、固始雞、北京油雞、瓢雞和汶上蘆花雞易感性最高，ACI介于-11.64～18.67之間，表現為死亡率較高(北京油雞除外)，相對增重率較低，腸道病變記分和卵囊產量較高(固始雞除外)。其余8個品種易感性中等，ACI介于29.81～53.36。不同品種雞對柔嫩艾美耳球蟲的易感性存在較大的差異，且肉用型品種較蛋肉兼用型品種易感性高。

地方雞種；隱性白羽雞；柔嫩艾美耳球蟲；易感性

雞球蟲病(coccidiosis)是由寄生于腸消化道上皮細胞的艾美耳屬(Eimeria)球蟲引起的一種寄生性原蟲病。在雞的各類疾病中，球蟲病發病率最高，是嚴重危害養禽業的禽病之一。該病病原有堆型艾美耳球蟲(Eimeriaacervulina)、布氏艾美耳球蟲(E.brunetti)、巨型艾美耳球蟲(E.maxima)、和緩艾美耳球蟲(E.mitis)、毒害艾美耳球蟲(E.necatrix)、早熟艾美耳球蟲(E.praecox)和柔嫩艾美耳球蟲(E.tenella)等7個種[1]，其中柔嫩艾美耳球蟲可引起3～6周齡雛雞發生急性盲腸球蟲病，是致病性最強、流行最為普遍的蟲種[2]。目前雞球蟲病的防治主要依賴于藥物防治和免疫預防，但是由于球蟲耐藥性蟲株的不斷出現，以及人們對藥物殘留問題的日益關注和政府對抗球蟲藥物的使用限制越來越嚴格，使得藥物防治雞球蟲病面臨困境；同時由于球蟲生活史復雜，不同蟲種間沒有或僅有少部分的交叉保護力，即使同種不同蟲株間交叉保護效果也不甚明顯，因而通過免疫接種途徑防治球蟲病效果并不顯著。因此，迫切需要尋找新的策略來防控該病。近年來，隨著寄生蟲與宿主間相互作用機制研究不斷深入，分子生物學和基因工程技術的不斷發展，基于品種(系)本身的抗病遺傳特性而選育出抗球蟲病雞種可能會發展成為一種新的球蟲病防控手段。雞品種(系)本身的遺傳特性決定了其對一些疾病具有遺傳抗性或易感性，比如傳染性法氏囊病、馬立克病、沙門菌病等[3-6]。國內外的一些研究也證實不同品種(系)雞在對球蟲病的遺傳抗性或易感性上存在較大的差異[7-11]。我國擁有豐富的雞品種資源，其外貌特征、遺傳特性、生產性能各異，已成為世界家禽育種優秀的物質資源。較之于引進品種，我國地方雞種還具有較強的適應性和抗病性。目前，國內研究多限于地方雞種的遺傳多樣性及生產性能評價，而在抗病性評價方面鮮有報道。在抗球蟲病方面，僅見文昌雞[10]以及鹿苑雞、固始雞、北京油雞和大骨雞[11]等我國少數幾個地方雞種的抗柔嫩艾美耳球蟲性能評價的報道。為此，本研究對國家級地方雞種基因庫(江蘇)保存的25個品種雞的抗柔嫩艾美耳球蟲性能進行評價，旨在篩選出在球蟲遺傳抗性上具有明顯差異的雞種，為球蟲與宿主之間的相互作用機制深入研究以及抗球蟲病育種素材選擇奠定良好的工作基礎，同時進一步豐富我國地方雞種質資源的基礎資料，為它們優良性狀基因的挖掘和利用提供依據。

1　材料與方法

1.1試驗動物

1日齡清遠麻雞、瓢雞、固始雞、惠陽胡須雞、瑯琊雞、茶花雞、汶上蘆花雞、狼山雞、北京油雞、河南斗雞、泰和雞、安義瓦灰雞、大骨雞、金湖烏鳳雞、文昌雞、淮南麻雞、仙居雞、邊雞、鹿苑雞、蕭山雞、壽光雞、白耳黃雞、大圍山微型雞、藏雞和隱性白羽雞等25個雞種(Gallusgallusdomesticus)由國家級地方雞種基因庫(江蘇)提供，其中隱性白羽雞原產于法國，屬快大型白羽肉雞，其余24個雞種均為我國地方雞種。出殼后運回實驗室，飼養在無球蟲的環境中，飼喂不含任何抗球蟲藥的全價飼料。試驗開始前，采用常規方法鏡檢有無球蟲卵囊，確認無球蟲卵囊污染后，方可用于試驗。

1.2試驗蟲株

柔嫩艾美耳球蟲(E.tenella)孢子化卵囊由揚州大學獸醫學院寄生蟲教研室保存。

1.3試驗設計與分組

25日齡時將所有試驗雞逐只稱重并編號，挑選體況相近的各品種雞各45只，分為2個感染組和1個非感染對照組，每組15只。感染組和非感染對照組分籠飼養，感染組每只雞經嗉囊接種1 mL(含1×105個)柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊懸液，非感染對照組每只雞接種PBS 1 mL。接種后每天觀察雞的精神狀態、飲欲、食欲、糞便與發病情況。對死亡雞立即進行稱重和剖檢，確定是否死于球蟲病。感染后6～8 d，每天2次分別收集各組的全部糞便，用麥克馬斯特法(McMaster’s method)進行卵囊計數。接種后第8天末，稱重并剖殺所有存活雞，取盲腸，觀察腸道病變并記分，同時取盲腸及其內容物，勻漿并用胃蛋白酶消化，采用麥克馬斯特法對勻漿中的卵囊數量進行計數。

1.4評價指標

1.4.1血便記分參照N.F.Morehouse等[12]的標準進行評分，即從感染后第4天開始，每天2次觀察各組雞血便數。按24 h內平均每只雞血便數最多的一次進行記分，記分標準：糞便正常記0分；1、2、3堆血便分別記1、2、3分，4堆以上記4分。

1.4.2死亡率接種柔嫩艾美耳球蟲卵囊后，觀察記錄各組死亡雞數，并進行剖檢以確定是否死于盲腸球蟲病。死亡率=(試驗結束時每組死亡雞數÷試驗開始時每組雞數)×100%。

1.4.3相對增重率相對增重率=(感染組平均增重÷非感染對照組平均增重)×100%。

1.4.4病變記分腸道病變記分參照J. Johnson和W.M. Reid[13]的標準。兩側盲腸病變不一致時，以嚴重的一側為準。盲腸正常并且無肉眼病變，記0分；盲腸壁有很少量散在淤血點，但腸壁不增厚，內容物正常，記1分；盲腸壁增厚，盲腸內容物明顯帶血，病變數量較多，記2分；盲腸內容物多量帶血或有盲腸芯，盲腸壁肥厚明顯，記3分；盲腸因充滿大量血液或腸芯而明顯腫大，外觀呈醬色，記4分。死于球蟲病雞記4分。

1.4.5抗球蟲指數(ACI)ACI=(相對增重率+成活率)-(病變值+卵囊值)。其中，成活率=(試驗結束時每組存活的雞數÷試驗開始時每組雞數)×100 %；病變值=平均病變記分×10；卵囊值參照文獻的計算方法[11]，即把收集的各感染組感染后6～8 d糞中卵囊數與該組盲腸剖檢消化后勻漿內卵囊數相加，分別求出每組每只雞的平均卵囊數，按標準扣分[14]。判定標準：ACI≥180判為高抗，160～179判為中抗，<160判為易感。

1.5數據處理與分析

用SPSS軟件對各品種雞的感染組和非感染對照組數據進行t檢驗；對各品種間體重及腸道病變記分數據進行單因素方差分析；對各品種間死亡率進行Fisher’s檢驗；對死亡率、相對增重率、腸道病變記分、ACI值等數據進行相關分析(P<0.05)。

2　結　果

2.1臨床觀察

各感染組雞自感染后第4天起先后表現典型的臨床癥狀，表現為精神不振、飲食欲下降、喜扎堆。有的雞翅下垂、縮頭閉眼、羽毛逆立、排鮮紅色血便，有的甚至出現死亡，剖檢感染后第4～5天死亡的雞盲腸腫大呈暗紅色，腸腔內充滿紅色血液和脫落的黏膜碎片，黏膜潰瘍出血。感染5 d以后死亡的雞剖檢發現盲腸內容物逐漸變黏稠，至感染后第7天開始形成盲腸芯，內有凝血及充滿干酪樣的物質，腸壁增厚，有的內有出血點。試驗期間，各品種雞非感染對照組中除一只壽光雞死亡外，其余試驗雞在整個試驗期間精神狀態良好、飲欲食欲正常。死亡的壽光雞經剖檢確認并非死于球蟲病。試驗結束時對各非感染對照組進行糞檢，均未見球蟲卵囊。

2.2血便記分

所有品種雞的感染組均于感染后第4天始有血便排出，其中仙居雞、文昌雞、固始雞早在感染后3.5 d即排出血便。除狼山雞血便高峰期為感染后第6天外，其余品種雞均為感染后第5天。不同品種雞排血便嚴重程度存在差異。從血便高峰期(24 h內)平均血便堆數來看，固始雞最多(11.43堆·只-1)，藏雞和鹿苑雞最少(3.53和3.84堆·只-1)，其余各品種介于與4.07～9.38堆·只-1之間(圖1)。按照血便記分標準，除藏雞和鹿苑雞分別記3.53和3.84分外，其余品種皆記4分。試驗期間，所有品種雞的非感染對照組均無血便排出。

圖1　血便高峰期平均每只雞血便數Fig.1　Mean number of bloody stool of per chicken on peak day

2.3死亡率

試驗結果顯示，不同品種雞間的死亡率存在較大差異。隱性白羽雞死亡率最高(40%)，其次為瓢雞(33.33%)；藏雞、白耳黃雞和大圍山微型雞等3個品種未見死亡；其它品種雞的死亡率為3.33%～30%(圖2)。藏雞、白耳黃雞和大圍山微型雞的死亡率與瓢雞、隱性白羽雞、清遠麻雞、固始雞和惠陽胡須雞差異顯著(P<0.05)，與其余品種無顯著差異(P>0.05)；鹿苑雞、蕭山雞、壽光雞死亡率與除固始雞、瓢雞、清遠麻雞和隱性白羽雞外的品種差異不顯著(P>0.05)；大骨雞、金湖烏鳳雞、文昌雞、淮南麻雞、仙居雞、邊雞和安義瓦灰雞等的死亡率與瓢雞和隱性白羽雞差異顯著(P<0.05)，與其余品種差異不顯著(P>0.05)；泰和雞、斗雞、北京油雞、狼山雞的死亡率與除隱性白羽雞外的品種差異不顯著(P>0.05)。此外，不同品種雞在死亡時間上也有一定的差異。在出現死亡的25個品種中，隱性白羽雞、瓢雞、汶上蘆花雞、固始雞等于感染后第4天即開始出現死亡，河南斗雞和北京油雞為第6天，狼山雞和安義瓦灰雞為第7天，而金湖烏鳳雞則在第8天才出現死亡，其余品種均為第5天。

圖2　各品種雞感染球蟲后的死亡率Fig.2　Mortality of different chicken breed after inoculating E.tenella

2.4相對增重率

攻蟲前，同一品種雞感染組與非感染對照組間平均體重相近，差異不顯著(P>0.05)，但不同品種雞間平均體重差異顯著(P<0.05)，其中大圍山微型雞、茶花雞、白耳黃雞、固始雞、泰和雞、清遠麻雞、藏雞等體重顯著低于隱性白羽雞、壽光雞、鹿苑雞、惠陽胡須雞、淮南麻雞、蕭山雞、大骨雞、瓢雞、文昌雞、瑯琊雞、邊雞、汶上蘆花雞、金湖烏鳳雞等(P<0.05)。試驗結束時，瑯琊雞和狼山雞感染組與非感染對照組間平均體重無顯著差異(P>0.05)，其余各品種雞感染組與非感染對照組間差異顯著(P<0.05)(表1)。

25個品種雞中狼山雞和文昌雞相對增重率最高，達60.0%以上，惠陽胡須雞、北京油雞、隱性白羽雞、固始雞、清遠麻雞、汶上蘆花雞和邊雞等相對增重率低于10.0%，其余品種雞介于11.82%～47.39%之間(表1)。

表1相對增重率

Table 1Relative weight gain rate

品種Breed組別Group初始體重(x-±s)/gInitialbodyweight(g)終末體重(x-±s)/gFinalbodyweight(g)平均增重(x-±s)/gMeanweightgain(g)相對增重率/%Relativeweightgainrate(%)隱性白羽雞RecessivewhiteI283.00±11.69a290.23±17.53a7.23±8.63a4.36C261.45±16.27a427.15±29.43b165.70±13.98b100清遠麻雞QingyuanpartridgeI149.00±4.07a146.40±10.31a3.88±2.81a5.00C146.33±13.44a223.89±21.93b77.56±9.23b100瓢雞PiaoI231.15±8.19a246.67±8.87a15.52±4.85a11.82C247.67±14.34a379.00±26.64b131.33±14.71b100固始雞GushiI146.57±10.34a143.71±11.31a4.00±1.32a4.74C144.44±7.19a228.78±9.26b84.33±3.27b100惠陽胡須雞HuiyangbeardedI254.30±6.43a254.33±8.45a0.03±4.50a0.03C245.10±8.57a351.55±13.87b106.45±7.12b100瑯琊雞LangyaI214.70±3.50a247.90±12.72a33.20±12.40a38.69C215.90±17.39a301.70±28.77a85.80±11.66b100茶花雞ChahuaI127.40±2.99a138.00±5.81a10.60±6.69a19.83C127.89±7.77a181.33±12.89b53.44±8.85b100汶上蘆花雞WenshangbarredI199.40±4.63a205.40±12.76a6.00±10.77a7.38C199.78±8.54a281.11±13.55b81.33±6.72b100狼山雞LangshanI175.40±4.01a219.80±11.31a44.40±10.24a61.76C166.00±13.18a237.89±22.56a71.89±10.33b100北京油雞BeijingoilI180.60±5.76a176.90±10.88a4.50±1.80a0.67C178.90±7.66a245.70±13.91b66.80±7.07b100河南斗雞HenangameI180.78±7.27a190.33±6.70a9.56±4.50a15.24C181.40±5.26a244.10±7.57b62.70±4.84b100

(轉下頁 Carried forward)

I.感染組；C.非感染對照組。同列數據標有不同字母者差異顯著(P<0.05)I.infected group；C.control group.Means followed by the different letters within the same column are different significantly (P<0.05)

2.5病變記分

各品種雞感染組中，白耳黃雞腸道病變記分最低，為1.60，其次為河南斗雞(1.70)；隱性白羽雞最高，為3.60；淮南麻雞、邊雞、壽光雞、北京油雞、惠陽胡須雞、清遠麻雞、瓢雞、汶上蘆花雞等腸道病變也較嚴重，為3.1～3.4，其余品種雞為2.1～2.9。

白耳黃雞腸道病變記分與河南斗雞和仙居雞相比，差異不顯著(P>0.05)，與其余品種雞相比差異顯著(P<0.05)；隱性白羽雞腸道病變記分顯著高于除瑯琊雞、固始雞、淮南麻雞、邊雞、壽光雞、北京油雞、惠陽胡須雞、清遠麻雞、瓢雞和汶上蘆花雞等以外的其余品種雞(P<0.05)(圖3)。所有品種雞的非感染對照組腸道均未見明顯病變。

柱上無相同字母者差異顯著(P<0.05)Bars with no common letters differ significantly (P<0.05)圖3　各品種雞感染球蟲后的平均腸道病變記分Fig.3　Mean lesion score of different chicken breed after inoculating E.tenella

2.6卵囊產量

所有品種雞感染組均有卵囊排出，根據扣分標準，卵囊值皆為40，但不同品種雞的卵囊產量差異較大(圖4)。固始雞、瑯琊雞、茶花雞、藏雞的卵囊產量較低，低于17.2×106個·只-1，而鹿苑雞、瓢雞、惠陽胡須雞等卵囊產量較高，分別為106.2×106、190.3×106、264.8×106個·只-1。大圍山微型雞、仙居雞、邊雞、壽光雞為22.7×106～ 28.7×106個·只-1；安義瓦灰雞、河南斗雞、金湖烏鳳雞、大骨雞、白耳黃雞、汶上蘆花雞、清遠麻雞、蕭山雞、泰和雞為31.5×106～ 39.8×106個·只-1；狼山雞和北京油雞分別為46.2×106和49.1×106個·只-1；文昌雞為58.6×106個·只-1；隱性白羽雞為68.1×106個·只-1；淮南麻雞為79.4×106個·只-1。試驗期間，各品種雞非感染對照組均無球蟲卵囊排出。

2.7ACI

所有品種雞的ACI值均低于160(圖5)，按照評判標準，均屬對球蟲易感，但不同品種雞間ACI值差異較大，表明不同品種雞對球蟲的易感程度存在較大的差異。在所有試驗品種中隱性白羽雞ACI值最低，為負值，表明其易感性最高。其余24個品種的ACI值高低依次為狼山雞、文昌雞、大骨雞、安義瓦灰雞、蕭山雞、金湖烏鳳雞、白耳黃雞、藏雞、仙居雞、大圍山微型雞、鹿苑雞、瑯琊雞、河南斗雞、泰和雞、壽光雞、茶花雞、淮南麻雞、邊雞、北京油雞、汶上蘆花雞、固始雞、瓢雞、惠陽胡須雞、清遠麻雞。

2.8相關性分析

血便堆數、死亡率、腸道病變記分、相對增重率、卵囊產量、ACI等各項評價參數的相關性分析結果顯示：血便堆數與死亡率、腸道病變記分、卵囊產量、相對增重率、ACI等評價指標間并無相關關系；死亡率與腸道病變記分顯著正相關，相關系數為0.54；與相對增重率低度負相關，相關系數為-0.44；卵囊產量與血便堆數、死亡率、腸道病變記分、相對增重率、ACI等評價參數間并無明顯的相關性；ACI與死亡率和腸道病變記分呈顯著負相關，相關系數分別為-0.79和-0.62，與相對增重率高度正相關，相關系數達0.88。

圖4　各品種雞感染球蟲后的卵囊產量Fig.4　Oocyst production of different chicken breed after inoculating E.tenella

圖5　各品種雞抗球蟲指數Fig.5　Anticoccidial index (ACI) of different chicken breed

3　討　論

本研究選用由國家級地方雞種基因庫(江蘇)保存的25個品種雞進行了柔嫩艾美耳球蟲感染試驗，基于血便記分、死亡率、相對增重率、病變記分、卵囊產量、ACI值等指標，探討了不同品種雞對球蟲的易感性差異。

所有品種雞感染柔嫩艾美耳球蟲后均表現出盲腸球蟲病典型的血便癥狀，但不同品種雞血便嚴重程度(包括排血便的開始時間、血便數量和持續時間)存在一定程度的差異，這可能是因柔嫩艾美耳球蟲在不同品種雞體內裂殖生殖階段裂殖體形成時間、裂殖子逸出速度、裂殖生殖代次不同所致。總體來看，血便嚴重程度與死亡率、腸道病變記分、卵囊產量、相對增重率等各項評價指標間并無相關關系。固始雞排血便時間最早，血便數量最多，但卵囊產量卻較低。金湖烏鳳雞和汶上蘆花雞血便持續時間較短，但汶上蘆花雞死亡率、腸道病變記分卻較高。因此，雖然血便嚴重程度在一定程度上可間接反映不同品種間易感性上的差異，但一般不以此作為評判指標，僅將其視為感染發病的依據。

目前，國內外研究工作者主要是采用死亡率、增重、平均腸道病變記分和卵囊產量等4個指標評價不同品種(系)雞對球蟲的易感性。理論上講，這4個指標間應有很強相關性，即：死亡率、腸道病變記分和卵囊產量三者之間呈正相關關系，而它們均與增重呈負相關。但在實際試驗中，結果并不盡然。其中，死亡率和增重的經濟意義較高，是在抗病性評價中不可或缺的2個指標。M.H.Pinard-Van Der Laan等[7]根據雞感染柔嫩艾美耳球蟲后的死亡率、增重和腸道病變記分等指標比較了2個埃及品系(Mandarah和Fayoumi)、1個洛島紅品系和2個白萊航品系(WLB21和WLDW)等5個遠交品系雞對球蟲的抗性或易感性，證實不同品系間對柔嫩艾美耳球蟲的抗性存在較大的差異，其中Fayoumi系雞抵抗力最強，感染后未發生死亡，腸道病變記分低，增重較對照組僅下降了30%；WLDW系雞最易感，感染球蟲后死亡率達27%，增重較對照組下降了85%；并認為感染雞增重與死亡率和腸道病變記分呈負相關關系。本研究中相對增重率與死亡率間低度負相關，而與腸道病變記分并無相關關系。然而，N.Bumstead和B.Millard[8]根據死亡率、增重和卵囊產量評價了7個近交品系雞對柔嫩艾美耳球蟲和巨型艾美耳球蟲的遺傳抗性。雖然不同品系間死亡率、增重和卵囊產量差異很大，但死亡率并不與增重呈負相關，也就是說死亡率高的品系并不是增重最低的品系，表明增重不宜單獨作為抗性選擇指標。

腸道病變記分反映了球蟲對雞腸道的生理性損害程度，通常認為是評價不同品種(系)雞對球蟲易感性或抗性的一個良好指標。一些研究結果表明柔嫩艾美耳球蟲感染雞的腸道病變記分與增重呈負相關[7，15-16]，而D.P.Conway等[17]、L.A.Caron等[9]研究了不同雞種感染柔嫩艾美耳球蟲后其增重和腸道病變記分之間的關系，發現二者之間負相關性很弱。本研究中，腸道病變記分與相對增重率間無明顯的負相關。隱性白羽雞、汶上蘆花雞、清遠麻雞、北京油雞及惠陽胡須雞等平均腸道病變記分與相對增重率間呈負相關，但在大多數品種雞中相關性較差。如白耳黃雞和斗雞平均腸道病變記分最低，相對增重率并不高。此外，本研究中腸道病變記分與死亡率顯著正相關。如清遠麻雞、瓢雞、惠陽胡須雞、固始雞、隱性白羽雞死亡率較高，其腸道病變記分也較嚴重。

卵囊產量體現了球蟲在動物體內的繁殖能力，間接反映雞對球蟲易感程度，也是評價不同品種(系)雞對球蟲的易感性的一個重要指標。S.Lee等[18]和D.K.Kim等[19]研究表明卵囊產量與增重負相關，而N.Bumstead和B.Millard[8]、D.F.Zhang等[20]則發現兩者無相關性，本研究結果支持后者的觀點。固始雞、瑯琊雞、茶花雞卵囊產量較低，但固始雞死亡率較高，而相對增重率較低；狼山雞和文昌雞相對增重率較高，卵囊產量也較高；此外，卵囊產量與腸道病變記分之間也不完全正相關。如：隱性白羽雞腸道病變記分最高，但卵囊產量卻并不是最高；白耳黃雞和斗雞腸道病變記分最低，但卵囊產量卻較高。由于卵囊計數在不同時間間隔內存在很大的變異性，因此以卵囊產量作為評價不同品種(系)雞對雞球蟲感染的易感性或抗性的指標也存在一定的局限性[21]。

鑒于評價指標間相關性分析以及試驗結果的復雜性，本研究中作者引入抗球蟲指數(ACI)作為評價不同品種(系)雞對柔嫩艾美耳球蟲的易感性或抗性的指標，以期達到全面、準確評價不同品種(系)雞對球蟲易感性的目的。ACI綜合了存活率、增重、腸道病變、卵囊產量、糞便記分等多項參數，通常認為是評價雞球蟲耐藥性或藥物效力的最可靠的指標[20，22]。但是，不同的研究者在計算ACI時所采用的參數指標、計算方法和評定標準不盡相同。本研究根據目前國內外通行的方法，采用存活率、增重、病變記分和卵囊產量等4個參數計算ACI，據此評價不同品種(系)雞對雞球蟲的易感性或抗性。結果所有參試品種雞的ACI均低于160，表明它們對球蟲均易感，但不同品種間ACI差異較大，說明它們在對球蟲的易感程度上存在較大的差異。

本研究基于ACI值，可將25個品種雞對球蟲的易感性分為三個層次。狼山雞、藏雞、大骨雞、蕭山雞、文昌雞、安義瓦灰雞、白耳黃雞、仙居雞、大圍山微型雞和金湖烏鳳雞等10個品種的易感性低，表現為ACI值較高，未發生死亡或死亡率低，相對增重率較高，腸道病變記分較低，但除藏雞外卵囊產量均較高。隱性白羽雞、清遠麻雞、惠陽胡須雞、固始雞、北京油雞、瓢雞和汶上蘆花雞等7個品種的易感性高，表現為ACI值較低，除北京油雞外死亡率較高，相對增重率較低，除固始雞外腸道病變記分和卵囊產量均較高。其余8個品種的易感性中等。

4　結　論

不同品種雞對柔嫩艾美耳球蟲的易感性存在較大差異。在參試的25個品種中，狼山雞、藏雞、大骨雞、蕭山雞、文昌雞、安義瓦灰雞、白耳黃雞、仙居雞、大圍山微型雞和金湖烏鳳雞等品種易感性低，而隱性白羽雞、清遠麻雞、惠陽胡須雞、固始雞、北京油雞、瓢雞、汶上蘆花雞等品種易感性高。

研究結果還表明，隱性白羽雞、清遠麻雞、惠陽胡須雞等肉用型品種較蛋肉兼用型品種易感，且以引進品種隱性白羽雞易感性最高，這從一定程度上反映出我國地方雞種具有較強的抗病力。不同品種雞對球蟲感染易感性差異的原因可能與雞種本身遺傳背景密切相關，如先天性免疫應答能力、機體免疫因子、生化遺傳標記及生長繁殖性能等。

[1]MCDOUGALD L R.Intestinal protozoa important to poultry[J].PoultSci，1998，77(8)：1156-1158.

[2]ZHANG L，LIU R，MA L，et al.Eimeriatenella：expression profiling of toll-like receptors and associated cytokines in the cecum of infected day-old and three-week old SPF chickens[J].ExpParasitol，2012，130(4)：442-448.

[3]HASSAN M K，AFIFY M，ALY M M.Susceptibility of vaccinated and unvaccinated Egyptian chickens to very virulent infectious bursal disease virus[J].AvianPathol，2002，31(2)：149-156.

[4]ZEKARIAS B，TER HUURNE A A，LANDMAN W J，et al.Immunological basis of differences in disease resistance in the chicken[J].VetRes，2002，33(2)：109-125.

[5]MALEK M，HASENSTEIN J R，LAMONT S J.Analysis of chicken TLR4，CD28，MIF，MD-2，and LITAF genes in aSalmonellaenteritidisresource population[J].PoultSci，2004，83(4)：544-549.

[6]WIGLEY P.Genetic resistance toSalmonellainfection in domestic animals[J].ResVetSci，2004，76(3)：165-169.

[7]PINARD-VAN DER LAAN M H，MONVOISIN J L，PERY P，et al.Comparison of outbred lines of chickens for resistance to experimental infection with coccidiosis (Eimeriatenella)[J].PoultSci，1998，77(2)：185-191.

[8]BUMSTEAD N，MILLARD B.Genetics of resistance to coccidiosis：Response of inbred chicken lines to infection byEimeriatenellaandEimeriamaxima[J].BrPoultSci，1987，28(4)：705-715.

[9]CARON L A，ABPLANALP H，TAYLOR R L Jr.Resistance，susceptibility，and immunity toEimeriatenellain major histocompatibility (B) complex congenic lines[J].PoultSci，1997，76(5)：677-682.

[10]韓新疇.文昌雞、AA雞、海蘭雞和三黃雞對柔嫩艾美耳球蟲易感性研究[J].中獸醫醫藥雜志，2007，41(1)：39-40.

HAN X C.Study on susceptibility of Wenchang，AA，Hyline and three buff chickens toEimeriatenellainfection[J].JournalofTraditionalChineseVeterinaryMedicine，2007，41(1)：39-40.(in Chinese)

[11]竇新紅，童海兵，許明，等.不同品種地方雞對柔嫩艾美球蟲的易感性分析[J].畜牧與獸醫，2009，41(12)：7-9.

DOU X H，TONG H B，XU M，et al.Susceptibilities of four local breeds of chickens toEimeriatenellainfection[J].AnimalHusbandry&VeterinaryMedicine，2009，41(12)：7-9.(in Chinese)

[12]MOREHOUSE N F，BARON R R.Coccidiosis：evaluation of coccidiostats by mortality，weight gains，and fecal scores[J].ExpParasitol，1970，28(1)：25-29.

[13]JOHNSON J，REID W M.Anticoccidial drugs：lesion scoring techniques in battery and floor-pen experiments with chickens[J].ExpParasitol，1970，28(1)：30-36.

[14]索勛，李國清.雞球蟲病學[M].北京：中國農業大學出版社，1998.

SUO X，LI G Q.Coccidia and Coccidiosis of Domestic Fowl[M].Beijing：China Agricultural University Publishing House，1998.(in Chinese)

[15]MEDAROVA Z，BRILES W E，TAYLOR R L Jr.Resistance，susceptibility，and immunity to cecal coccidiosis：effects of B complex and alloantigen system L[J].PoultSci，2003，82(7)：1113-1117.

[16]SWAGGERTY C L，GENOVESE K J，HE H，et al.Broiler breeders with an efficient innate immune response are more resistant toEimeriatenella[J].PoultSci，2011，90(5)：1014-1019.

[17]CONWAY D P，MCKENZIE M E，DAYTON A D.Relationship of coccidial lesion scores and weight gain in infections ofEimeriaacervulina，E.maximaandE.tenellain broilers[J].AvianPathol，1990，19(3)：489-496.

[18]LEE S，LILLEHOJ H S，PARK D W，et al.Effects of Pediococcus-and Saccharomyces-based probiotic (MitoMax?) on coccidiosis in broiler chickens[J].CompImmunolMicrobiolInfectDis，2007，30(4)：261-268.

[19]KIM D K，LILLEHOJ H S，HONG Y H，et al.Immune-related gene expression in two B-complex disparate genetically inbred Fayoumi chicken lines followingEimeriamaximainfection[J].PoultSci，2008，87(3)：433-443.

[20]ZHANG D F，SUN B B，YUE Y Y，et al.Anticoccidial activity of traditional Chinese herbal Dichroa febrifuga Lour.extract againstEimeriatenellainfection in chickens[J].ParasitolRes，2012，111(6)：2229-2233.

[21]REID W M.Relative value of oocysts counts in evaluating anticoccidial activity[J].AvianDis，1975，19(4)：802-811.

[22]WANG Z，SHEN J，SUO X，et al.Experimentally induced monensin-resistantEimeriatenellaand membrane fluidity of sporozoites[J].VetParasitol，2006，138(3-4)：186-193.

(編輯白永平)

The Susceptibility of Chinese Indigenous Chicken Breeds (Gallusgallusdomesticus) toEimeriatenellaInfection

LI Jian-mei1，LIU Mei1，SHEN Xin-yue1，CHENG Xu1，JI Zheng-jian2，LIU Dan-dan2，YIN Jian-mei1，YOU Su-lan1，SU Yi-jun1,TAO Jian-ping2，DAI Ya-bin1*

(1.PoultryInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Yangzhou225125，China；2.MinistryofEducationKeyLaboratoryforAvianPreventiveMedicine，CollegeofVeterinaryMedicine，YangzhouUniversity，Yangzhou225009，China)

This study was conducted to investigate the difference in susceptibility toEimeriatenellainfection among different chicken breeds (Gallusgallusdomesticus).Twenty-six-day-old，coccidia-free chickens of 24 Chinese indigenous chicken breeds and one commercial breed，recessive white，were divided into two infected groups and one non-infected control group randomly，15 chickens each group.The infected groups were inoculated into crop with 1×105sporulatedE.tenellaoocysts per bird.The mortality，relative rate of weight gain，cecal lesion scores，oocyst production and anticoccidial index (ACI) were measured as parameters for evaluation of the susceptibility of different breeds.Among 25 breeds，Langshan，Tibetan，Big bone，Xiaoshan，Wenchang，Anyi tile-like，Buff baier，Xianju，Daweishan mini and Jinhu silky chickens appeared clearly as the least susceptible，with the ACIs ranging from 56.80 to 85.76，showing no death or lower mortality，lower lesion score and higher relative rate of weight gain than other breeds，though higher oocyst production was found in those breeds except Tibetan chicken.Recessive white，Qingyuan partridge，Huiyang bearded，Gushi，Beijing oil，Piao and Wenshang barred chickens were the most susceptible with the ACIs ranging from -11.64 to 18.67，showing higher mortality (except Beijing oil chicken)，lower relative rate of gain，higher lesion scores and higher oocysts production (except Gushi chicken) than other breeds.The rest of the 8 breeds showed moderate susceptibility with the ACIs ranging from 29.81 to 53.36.There are significant differences in the susceptibility toE.tenellainfection among different chicken breeds.And the meat type breeds showed higher susceptibility than eggs and meat breeds.

Chinese indigenous chicken breed；recessive white chicken；Eimeriatenella；susceptibility

10.11843/j.issn.0366-6964.2016.10.019

2016-04-25

國家重點研發計劃重點專項(2016YFD0501600)；江蘇省重點研發計劃(現代農業)重點項目(BE2016347)；江蘇省動物預防醫學重點實驗室開放課題(K13042)

李建梅(1985-)，女，白族，云南大理人，助理研究員，碩士，主要從事家禽寄生蟲病的防治研究，E-mail: jianmeili157@sina.com

戴亞斌，E-mail：ybdai@163.com

S852.723;S855.9

A

0366-6964(2016)10-2098-10