天麻素在不同溶劑中穩定性的對比

楊雪萍，劉　衛，孫　昕，袁紅英

天麻素在不同溶劑中穩定性的對比

楊雪萍，劉衛，孫昕，袁紅英＊

目的考察天麻素在不同溶劑中的穩定性。方法利用HPLC法，對天麻素在稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈、水、乙腈-0.5%磷酸（3∶97）溶液中的穩定性進行分析。對在不同溶劑中天麻素及生成物的保留時間、峰面積積分值進行考察比較。結果天麻素在各溶劑中穩定性有較大差別，在水、乙腈-0.5%磷酸（3∶97）較穩定；在稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈中不穩定，分別不同程度的發生可逆反應，轉化成其他物質。結論天麻素在50%乙醇、50%甲醇、50%乙腈中不穩定，用以上溶劑作為天麻素提取溶劑時，需蒸干后以水復溶解。

天麻素；溶劑提取；穩定性

DOI:10.14172/j.issn1671-4008.2016.10.021

天麻素可恢復大腦皮質興奮與抑制過程的平衡失調［1］，具有鎮靜、安眠和鎮痛等中樞抑制作用。被用于治療神經衰弱及其綜合征和血管神經性頭痛等癥（如偏頭痛、枕骨大神經痛等），亦可用于腦外傷性綜合征、眩暈病如梅尼埃病、藥性眩暈、外傷性眩暈、突發性耳聾、前庭神經元炎、椎基底動脈供血不足等。目前常用劑型有片劑和注射劑，為臨床常用藥物。

天麻素可溶于水、乙醇、甲醇等溶劑［2，3］，試驗中常利用甲醇、乙醇、乙腈、水等作為溶劑制備天麻素供試品。在含量測定中發現天麻素以甲醇、乙醇、乙腈等為溶劑時，在220 nm波長下［4］，高效液相色譜圖中天麻素保留時間附近有未知干擾峰出現，影響天麻素的含量測定。為此對天麻素在以上溶劑中的穩定性進行考察。

1　材料與方法

1.1材料與儀器天麻素對照品（購自中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用110807-200205）；試驗所用甲醇（天津市永大化學試劑有限公司）、乙腈（天津市科密歐化學試劑有限公司）均為色譜純，乙醇（天津市百世化工有限公司）、磷酸（天津市化學試劑六廠）均為分析純，水為純水。安捷倫1200高效液相色譜儀 （四元泵、自動進樣），VWD檢測器，超聲清洗器（TCQ-25型），電子天平（AE-240型）

1.2實驗方法

1.2.1色譜條件及系統適應性［5，6］以十八烷基硅烷鍵和硅膠為填充劑；以乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為流動相；檢測波長為220 nm。

1.2.2供試品溶液制備取天麻素對照品適量5份，精密稱定，分別加乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）、稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈、水制成每1 ml含50 μg的溶液，備用。分別精密量取10 ml稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈作為溶劑的天麻素對照品溶液，于沸水浴上蒸干，再以水為溶劑分別轉移至10 ml量瓶，加水至刻度，搖勻，備用。

2　結果

2.1以稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈為溶劑的色譜峰對照考察在相同色譜條件下稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈作為溶劑的天麻素對照品分別產生保留時間不同的兩種物質。因不能確定峰的歸屬，根據保留時間將其命名為峰a、峰b（圖1）。

天麻素在以上三種溶劑中產生的物質的保留時間、峰面積積分值及峰面積積分值之和與濃度的比值均有較大差異。見表1。

圖 1　稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈為溶劑的天麻素對照品色譜圖

表 1　以稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈為溶劑的色譜峰a、b的保留時間及峰面積積分值

2.2以水、乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑的色譜峰對照考察以水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）作為溶劑的天麻素對照品，在相同色譜條件下，均只有一個色譜峰，但保留時間不同。見圖2。

圖 2　以水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑的天麻素對照品色譜圖

以水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑的天麻素，在相同色譜條件下保留時間不同，但峰面積積分值與天麻素對照品濃度比值相近。見表2。

表 2　以水、乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑天麻素的保留時間及峰面積積分值

2.3將對照品溶液蒸干復溶前后色譜峰對照考察精密量取蒸干后的水復溶溶液注入高效液相色譜儀［7］，對色譜圖進行觀察并對含量進行測定。三份以水為溶劑復溶后的溶液，在220 nm處均只有一個色譜峰，可與天麻素對照品相對應，未見其他色譜峰出現。以水為溶劑復溶后天麻素保留時間與以水為溶劑的對照品一致，峰面積積分值亦與以水為溶劑的對照品相差不大。見表3。

2.4在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中穩定性的考察［8］取以水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑的天麻素對照品溶液，標記為1、2，分別測定上述兩種對照品溶液放置0、4、8、12、24 h的峰面積積分值。由結果可知，以水為溶劑天麻素對照品溶液峰面積積分值平均值為8808.64，RSD=0.96%，以乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）為溶劑峰面積積分值平均值為8122.05，RSD=0.91%，表明天麻素在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中24 h內均穩定。見表4。

表 3　以水為溶劑復溶后天麻素的保留時間及峰面積積分值

編號　0 h　4 h　8 h　12 h　24 h 1　8786.63　8925.32　8717.19　8752.34　8861.71 2　8162.33　8004.75　8177.36　8171.64　8094.17

3　討論

根據圖1、表1，在稀乙醇溶液中，色譜峰a、b的峰面積積分值相當；在50%甲醇溶液中，色譜峰a的峰面積積分值小于色譜峰b；在50%乙腈溶液中，色譜峰a的峰面積積分值大于色譜峰b。根據在以上三種不同溶劑中天麻素色譜峰a、b的保留時間，天麻素在不同溶劑中的存在形式有較大差異。在以上三種不同溶劑中的天麻素的色譜峰，峰a的保留時間有較大差異、峰b的保留時間相近。根據以上三種不同溶劑中天麻素的色譜峰a、b的峰面積積分值及色譜峰a、b峰面積積分值之和與天麻素對照品濃度的比值，天麻素在不同溶劑中存在的形式差異較大。根據圖2、表2，天麻素在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中，在220 nm處只有一個吸收峰存在，沒有在此處有吸收的其他物質生成。天麻素在相同的色譜條件下，以不同的溶劑溶解保留時間有較大差異。峰面積積分值差別不大。根據表3，天麻素的稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈溶液，蒸干后以水為溶劑復溶，其天麻素保留時間及峰面積積分值均無大的變化，220 nm檢測，未產生除天麻素以外的色譜峰。根據表4，天麻素在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中，24 h內r值均小于1，穩定性良好。

天麻素在稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈三種不同溶劑中的存在形式發生變化，且各不相同。分析原因可能是天麻素與以上三種溶劑發生不同程度的反應生成了不同的物質［9］。在對上述溶液蒸干，以水為溶劑復溶后，進行高相液相檢測，檢測波長為220 nm時，均只有一個與天麻素對照品相對應的色譜峰，未見有其他色譜峰出現，提示天麻素在稀乙醇、50%甲醇、50%乙腈中發生的反應是可逆的。在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中，天麻素雖然保留時間不同，但未反應生成其他物質，根據穩定性考察結果，天麻素在水和乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）中，24 h內穩定性良好。天麻素測定過程中為減少雜質干擾，可能需要選擇甲醇、乙醇等溶劑提取制備供試品溶液。可將供試品溶液蒸干以水或乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）復溶的方法，避免天麻素與甲醇、乙醇等溶劑的可逆反應對含量造成的影響。

［1］劉衛，王中師，宋書偉，等.鉤藤總堿與天麻素聯用對自發性高血壓大鼠血壓和血壓變異性的影響［J］.中華高血壓雜志，2012，20（6）：570-574.

［2］國家藥典委員會.中國藥典2015年版：一部［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2015.

［3］劉玉紅，易進海，陳燕，等.RH-HPLC法測定天麻藥材中游離天麻素和總天麻素的含量［J］.藥物分析雜志，2010，30（1）：30-32.

［4］呂允鳳.微透析和高效液相色譜法測定大鼠腦內天麻素及天麻苷元含量［J］.實用藥物與臨床，2014，17（3）：326-329.

［5］國家藥典委員會.中國藥典2015年版：四部［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2015.

［6］陳超，郭建明.高效液相色譜法測定注射用天麻素的含量和有關物質［J］.海峽藥學，2011，23（12）：81-83.

［7］李曉琦，張光霽，申力，等.高效液相色譜法研究天麻素的理化性質及溶液穩定性［J］.中華中醫藥雜志，2014，29（3）：851-854.

［8］張麗，周政政，楊德智，等.HPLC法對天麻素純度標準物質的定值與不確定度研究［J］.中國藥師，2014，10（21）：92-94.

［9］李述智.高效液相色譜法測定天麻素注射液含量及有關物質［J］.廣州化工，2014，42（15）：158-161.

［2016-04-12收稿，2016-05-10修回］［本文編輯：劉一洋］

Research on stability of Gastrodin in different solvents

YANG Xue-ping①，LIU Wei，SUN Xin，et al.①Department of Pharmacy，the Pepole's Hospital of Fushan District，Yantai，Shandong 265500，China

ObjectiveTo investigate the stability of gastrodin in different solvents.MethodsHPLC method was used to analyse the stability of gastrodin's in 50%ethanol，50%methanol，50%methyl cyanides，water and methyl cyanides-0.5%phosphoric acid.Then the retention time and peak area of gastrodin in different solvents were compared.ResultsThere were great differences in stability of gastrodin in different solvents.In water and methyl cyanides-0.5%phosphoric acid no new substance was formed.But some transformed to other new substances in 50%ethanol，50%methanol，50%methyl cyanides.ConclusionGastrodin is of instability in 50%ethanol，50%methanol，50%methyl cyanides.If using those as solvent，it should be evaporated and dissolved by water.

Gastrodin；Extraction solvent；Stability

R917

A

265500山東煙臺，煙臺市福山區人民醫院（楊雪萍）；271000山東泰安，解放軍88醫院藥劑科（劉衛，孫昕，袁紅英）

袁紅英，Email：tayuanhongying@163.com