Hemotype全自動血型分析儀在血站血型檢測中的應用

王 梓

（沈陽中心血站，遼寧 沈陽 110067）

Hemotype全自動血型分析儀在血站血型檢測中的應用

王 梓

（沈陽中心血站，遼寧 沈陽 110067）

目的 探討Hemotype全自動血型儀在血站血型工作中的應用價值。方法 采用Hemotype全自動血型儀對11298例獻血者樣本進行ABO、Rh（D）血型及鹽水不規則抗體鑒定，并與手工法對比。結果 11298份樣本全自動血型儀ABO一次定型準確率為99.9%（11287/11298），手工法ABO一次準確定型率為99.7%（11268/11298），兩種方法比較差異有統計學意義（P＜0.05）；Rh（D）血型正確率均為100%；兩種方法比較O細胞凝集陽性率：0.08%、0.009%，差異有統計學意義（P＜0.05）。結論 全自動血型儀鑒定結果準確可靠，能永久保存；其實驗操作規范標準化，降低了人為錯誤發生；并且它更易于檢出不規則抗體，適于血站大批量血型檢測。

全自動血型儀；ABO血型；Rh（D）；鹽水不規則抗體

血型是血站檢測最重要的環節之一，血型鑒定的準確與否直接關系到受血者的生命安全。本血站多年來一直采用紙片法鑒定ABO正反定型，檢測流程是由體采科檢驗人員在采血前做正定型，檢驗科標本接收人員留取血袋樣本做正反定型，最后檢驗科血型崗人員做血管樣本的ABO及Rh（D）血型鑒定。雖然三次血型檢測大大降低了血型鑒定的錯誤率，但由于檢測過程人為操作且結果由人肉眼判斷，故人為因素不可避免地影響了最終鑒定結果。故本血站于2013年開始采用全自動血型儀進行血型檢測，并與傳統手工法平行試驗比對，現將結果報道如下。

1　材料與方法

1.1樣本來源：本站于2014年3月采集的11298份日常無償獻血者樣本。樣本用EDTA-K2抗凝。

1.2儀器與試劑：Hemotype全自動血型分析儀（意大利GSG公司）；平板振蕩器（Heidolph公司）；一次性96孔U形板（北京漢泰旭和公司）；單克隆抗A抗B血型定型試劑（北京金豪）；人ABO反定型紅細胞試劑（北京金豪）；抗D（IgM+IgG）血型定型試劑（Dominion Biologcials Limited）；現代血站管理軟件檢驗模塊（唐山現代）；TECAN RSP 200全自動加樣儀（瑞士TECAN公司）。

1.3方法

1.3.1ABO血型鑒定紙片法見《全國臨床檢驗操作規程》［1］；Rh（D）鑒定采用RSP加樣儀及96孔U形板檢測。對于可疑、正反不符、O細胞凝集、Rh（D）陰性樣本送血型室用血型血清學方法確認，方法參見文獻［2］。

1.3.2全自動血型儀將紅細胞懸液30 μL（在預稀釋微板孔內加0.9%生理鹽水200 μL，再加入6 μL紅細胞混勻）和血漿30 μL各3孔分配至96孔U形板內，然后分別加入單克隆抗-A、抗-B血型試劑30 μL、抗D血型試劑30 μL以及ABO反定型紅細胞試劑30 μL（每板可檢測16份樣本）；經血型儀孵育、離心后震蕩2次，然后放入判讀系統進行拍照判讀；最后由軟件自動匯總上傳結果到局域網。同樣對于可疑、正反不符、O細胞凝集、Rh（D）陰性樣本送血型室進一步確認。離心、振蕩、孵育參數設置見表1。

表1　離心、振蕩、孵育參數設置

1.4質量控制：每批樣本檢測前都用AB（+）、O（-）質控血清（北京漢泰旭和公司）做ABO、Rh（D）血型試劑的符合性試驗以控制試劑質量。

1.5統計學處理：采用SPSS19.0軟件對數據進行χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結 果

Hemotype全自動血型儀與手工紙片法血型鑒定結果比較見表2、表3。由表2可見兩種方法比較ABO一次準確定型差異有統計學意義（χ2=8.35，P＜0.05）；由表3可見O細胞凝集差異有統計學意義（χ2=6.4，P＜0.05）。兩種方法Rh（D）鑒定都為100%。

3　討 論

血型鑒定的經典方法是試管法，但此方法操作費時費力，難以大批量檢測樣本，故本血站一直采用紙片法檢測血型。雖然3次檢測以及在檢測過程中如遇任何疑難血型都必須送血型室做最終鑒定可以保證定型正確率，但紙片法結果的肉眼觀測，還是會給檢測帶來很大的錯型風險。并且由于最終結果無法保存，也會給血型溯源帶來困難。

Hemotype全自動血型儀的檢測原理即為試管法，使用U形微板代替試管，樣本和試劑分配完后離心，經過第一次快速振蕩可使沒有凝集的紅細胞在微板孔內均勻分布，再經過第二次慢速振蕩，可使弱凝集微小顆粒再次聚攏至中央凝集點，以達到充分凝集的效果。Hmotype全自動血型儀從加樣到最終判讀全部由電腦控制，實現了操作標準化、自動化，避免了人為錯誤發生［3］。且其結果與實驗室軟件系統連接，可自動匯總、保存于計算機內，便于核對，提高了工作效率和準確率。

表2　血型儀與手工法試驗結果比較

表3　O細胞凝集與正反不符血型室鑒定結果比較

從表2看，全自動血型儀對11298份樣本進行ABO一次定型準確率為99.9%，高于手工法99.7%，并且本研究全自動血型儀法結果高于國內許多文獻報道［4］，也高于國外一些文獻報道［5-6］。Rh（D）血型一次定型準確率均為100%。故全自動血型儀做血型鑒定可靠性好。從表3看全自動血型儀檢出的O細胞凝集經血型室確認后，其陽性率高于手工法（0.08%＞0.009%），說明全自動血型儀做鹽水不規則抗體初篩更易發現不規則抗體。而紅細胞血型不規則抗體是引起血型鑒定、交叉配血困難、輸血不良反應的主要原因之一［7］。故檢出鹽水不規則抗體大大增加了輸血安全性。

全自動血型儀法無法一次準確定型有11例，重新經血型儀鑒定后有8例樣本正反不符，3例為正常血型，其無法一次通過檢測的原因都是因為這3個血樣管內有細小凝塊。故用全自動血型儀進行血型鑒定，血樣管須充分抗凝，未充分抗凝的樣本不僅會造成結果假陽性，還會使加樣針堵塞，給檢測工作帶來困難［8］。另外表3中手工法30例正反不符最后全部送血型室鑒定，其中只有一例是亞型，可見手工法中即使工作人員肉眼無法完全肯定結果即送血型室確認，仍舊有2例亞型被漏檢，此時只有通過醫院交叉配血被發現［9］。而全自動血型儀法正反不符經血型室確認有5例為正常血型，假陽性率占62.5%，歸其原因有以下幾點：①微板有污染。②血樣未充分抗凝。③樣本溶血或脂血。④紅細胞抗原弱或丟失。⑤血清定型減弱或無反應［10］。故使用血型儀時需注意以上幾點。

Hemotype全自動血型儀每小時可檢測144例樣本，由于每個微形板上有16例樣本，故每1～16例樣本的檢測時間大概為7 min。對于少量樣本，血型儀在時間上是不具有優勢的，但是目前本血站每天檢測量平均為300例血樣，所以使用全自動血型儀可明顯提高本站工作人員的檢測效率。值得一提的是，無論是血樣還是試劑，全自動血型儀的加樣量都遠遠小于手工操作，這不僅便于本科室進行血樣的其他檢測、留樣，而且在一定程度上節約了試劑成本。

當然全自動血型儀的結果圖片還是需要人工核對，所以在使用血型儀過程中仍需工作人員嚴格按照SOP操作，認真核對，維護好儀器，提高責任心，避免因血型錯誤而造成的輸血事故。

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R457.1+1

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1671-8194（2016）26-0023-02