菌草栽培赤芝培養基配方篩選

王錦鋒，林占熺

(1.福建農林大學園藝學院，福建福州 350002；2.國家菌草工程技術研究中心，福建福州 350002)

菌草栽培赤芝培養基配方篩選

王錦鋒1,2，林占熺2*

(1.福建農林大學園藝學院，福建福州 350002；2.國家菌草工程技術研究中心，福建福州 350002)

[目的]篩選合適的菌草栽培赤芝培養基配方。[方法]采用試管法對6種菌草、2種輔料進行配方篩選優化。對篩選配方中菌絲和子實體生長狀況進行觀察。[結果]適合菌草栽培Ga0801(赤芝)的 配方是1號(78%芒萁+20%麩皮+2%石膏)、2號(78%五節芒+20%麩皮+2%石膏)、6號(78%綠洲1號+20%麩皮+2%石膏)和10號(30%芒萁+48%類蘆+20%麩皮+2%石膏)配方，其中6號配方最優，該配方菌絲生長旺盛，原基形成時間早，子實體壯實，生物轉化率高。[結論]該試驗為菌草栽培赤芝的大規模市場栽培提供了科學依據。

菌草；靈芝；培養基；配方

靈芝(GanodermaLucidum)屬擔子菌綱多孔菌目多孔菌科靈芝屬[1]，是我國著名的藥用菌。隨著野生數量的日益減少，靈芝人工栽培技術已成為當前的研究重點[2-3]。傳統的椴木栽培對森林損耗非常大，考慮到環保和節約資源，靈芝的生產已由傳統的椴木栽培逐漸轉向代料栽培，而現今普遍用于栽培食用菌的棉籽殼農藥殘留過高或重金屬超標[4-5]，不符合綠色食品的要求且影響出口，制約了靈芝產業的發展。為了解決“菌林矛盾”這一問題，該試驗采用林占熺等[6-7]發明的菌草技術來栽培赤芝。已篩選出的可用于人工栽培食藥用菌的菌草多達46種，已篩選出適合菌草栽培的主要菌類品種有55種[8-10]。現在用于栽培靈芝的菌草主要是五節芒和芒萁，其他菌草栽培靈芝鮮見報道，因此關于其他菌草栽培培養基配方的篩選就顯得極為重要。筆者根據靈芝對培養基的營養要求并結合前人總結的經驗[11]，設計篩選方案并確定最佳菌草栽培赤芝的培養基配方，以期為其大規模市場栽培提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌。供試材料為芒萁、五節芒、象草、巨菌草、類蘆和綠洲1號。供試菌株Ga0801(赤芝)由福建農林大學菌草所提供。

1.1.2 儀器。SW-CJ-1F型超凈工作臺購于蘇州集團蘇州安泰技術有限公司。Blue pard生化培養箱購于上海一恒科學儀器有限公司。分析天平、立式滅菌鍋購于山東新華醫療器械股份有限公司。

1.2 方法 試驗于2015年在福建農林大學菌草研究所進行。菌草配方見表1。其中7號配方為已用于市場栽培的配方，此試驗中作為對照(CK)。

參照表1配制的16個配方，含水量控制在65%左右，拌料后裝入22 cm×19 cm試管，每支試管裝干料10 g，每個配方設5個重復，每個重復3支。放入立式高壓鍋中121 ℃滅菌2 h，冷卻至室溫接種，接種時利用打孔器接種，保證接種的菌塊大小相同。接完種將試管放入25 ℃恒溫培養箱培養。每3 d劃線1次，測定菌絲生長速度，記錄菌絲體長勢及原基形成時間。原基形成后，將試管移入溫度28 ℃、濕度85%的人工氣候室中培養，觀察并記錄子實體生長情況。

1.3 數據處理 利用SPSS 20軟件對菌絲生長速度進行單因素試驗統計分析。

2 結果與分析

2.1 培養基配方篩選 由表2可見，1號、2號、6號、10號配方與7號配方之間差異不顯著，菌絲生長旺盛，其中2號配方菌絲日均長速最大，生長最快。15號、3號、13號、14號、9號、12號、5號、11號、4號配方與7號配方之間存在顯著性差異，4號配方菌絲根本不吃料。6號配方與7號配方原基形成時間相同，為25 d，其他配方原基形成時間均大于25 d，但1號配方晚1 d，2號和10號配方晚2 d，與7號配方差異不明顯。其他配方均比7號配方晚至少3 d，差異較明顯，其中3號、4號及12號配方不形成原基。在生物轉化率方面，1號、2號、5號、6號、10號、11號、15號及16號配方生物轉化率均大于7號配方，其中6號配方生物轉化率最高，達52.78%。綜合分析顯示，1號、2號、6號和10號配方比較適合用于栽培，可進行下一步研究。

2.2 篩選配方中菌絲和子實體生長狀況 由圖1可知，對于Ga0801菌株，各配方表現都很好，菌絲濃密且白。不同配方栽培的菌株子實體生長狀況是有區別的(圖2)，成熟后都會產生孢子粉。

表1 菌草的培養基配方

表2 菌草培養基配方篩選結果(n=5)

注：同列不同小寫字母表示在0.05水平差異顯著，同列不同大寫字母表示在0.01水平差異顯著。“-”表示菌絲不生長，“+”表示菌絲的旺盛程度，越多表示越旺盛。

Note:Different lowercases and capital letters in the same column indicated significant differences at 0.05 and 0.01 levels,respectively.“-” indicated no growth.“+” represented the growth vigorous degree of mycelium and more “+” indicated more vigorous growth.

3 結論與討論

傳統的靈芝栽培采用椴木栽培。目前，靈芝栽培原料主要為雜木屑、棉籽殼、玉米芯等[12-13]。隨著靈芝產業規模的不斷擴大，原料短缺現象逐漸凸顯，木屑、棉籽殼等價格逐步攀升[14-16]，靈芝生產成本大幅提高，嚴重降低了芝農們的生產積極性。此外，大量的木屑需求間接地對森林資源和生態環境構成了威脅[17]，尋找新型代替原料就顯得極為重要。隨著菌草技術的發明，用菌草栽培靈芝不僅使生產成本大幅降低，還解決了“菌林矛盾”的問題。林占熺等[7]對菌草栽培靈芝可行性進行了研究。李娜[18]用菌草成功栽培了紫芝，并進行了營養成分的分析。王凱等[19]利用菌草栽培并觀察9種靈芝菌株的生長情況及成分研究。該試驗在前人的經驗基礎上采用新的菌草栽培靈芝。試驗結果表明，除了芒萁、五節芒外，類蘆和綠洲1號也適合用于靈芝栽培，且6號配方為單一菌草配方，簡單易于操作，很有發展前景，但是否可推向市場還需進一步研究。

圖1 1號、2號、6號、7號及10號配方菌絲生長情況Fig.1 Mycelium growth situations of formulas No.1,2,6,7 and 10

注：a.子實體成熟期；b.子實體生長期。Note:a.Mature stage of fruiting bodies; b.Growth stage of fruiting bodies.圖2 子實體生長情況Fig.2 Growth situation of the fruiting bodies

[1] 黃年來，林志彬，陳國良，等.中國食藥用菌學：下篇[M].上海:上海科學技術文獻出版社,2010.

[2] 陳秀炳，吳擢溪，劉葉高，等.靈芝短原木熟料栽培優良菌株選育研究[J].食用菌學報,1999,6(2):20-24.

[3] MISHRA A K,PANDEY A K,SINGH P,et al.Mycoparasites ofGanodermalucidum(Leyss:Fr) Karst and their botanical management[J].Proceedings of the national academy of sciences,India section B:Archives of biological sciences,2013,83(1):119-123.

[4] 胡桂仙,王小驪,董秀金,等.3種干食用菌中汞、砷、鉛、鎘重金屬的污染的檢測與評估[J].浙江農業學報,2011,23(2):349-352.

[5] CHEN S L,XU J,LIU C,et al.Genome sequence of the model medicinal mushroomGanodermalucidum[J].Nature communications,2012,3:913.

[6] 林占熺，林輝.菌草學[M].北京：中國農業科學技術出版社,2003.

[7] 林占熺.野草栽培食用菌[M].福州：福建科學技術出版社,1989.

[8] 方白玉,柯野,鄭秋樺.菌草栽培麒麟菇的培養基配方篩選[J].食用菌,2007，29(3):28.

[9] 戰琨友.菌草香菇培養基的篩選及與木屑香菇品質的比較研究[D].福州：福建農林大學,2003.

[10] 林興生,林衍銓,余應瑞，等.菌草工廠化栽培杏鮑菇研究[J].廣西科學院學報,2007,23(2):95-96.

[11] HSEU R S,WANG H H,WANG H F,et al.Differentiation and grouping of isolates of theGanodermalucidumcomplex by random amplified polymorphic DNA-PCR compared with grouping on the basis of internal transcribed spacer sequence[J].Applied and environmental microbiology,1996,62(4):1354-1363.

[12] 胡景平.黃土高原代料栽培靈芝篩選試驗研究[J].北方園藝,2008(3):228-229.

[13] 池小妹.我國靈芝人工栽培技術研究現狀[J].時珍國醫國藥,2005,16(8):791-792.

[14] 韋會平,劉正宇,譚楊梅,等.農作物秸稈栽培靈芝試驗效果評價[J].中國農學通報,2005,21(11):145-147.

[15] 任德珠,羅國慶,吳劍安,等.桑枝高產栽培靈芝技術[J].廣東蠶業,2002,36(2):39-43.

[16] 金鑫,黃文麗,李小林,等.不同果樹枝條栽培靈芝基質配方研究[J].中國農學通報,2015,31(36)：156-160.

[17] 劉明香,林忠寧,陳敏健,等.茶枝屑代料栽培對靈芝生物轉化率和質量的影響[J].福建農業學報,2011,26(5):742-746.

[18] 李娜.紫芝菌草栽培特性、化學成分及其多糖的研究[D].福州：福建農林大學,2011.

[19] 王凱,林占熺,曹劍虹.菌草栽培的9種靈芝菌株生長狀況和多糖含量比較[J].安徽農業科學,2012,40(12):10849-10852.

Screening of Culture Medium Formula forGanodermalucidumCultivated by JUNCAO

WANG Jin-feng1,2,LIN Zhan-xi2*

(1.College of Horticulture,Fujian Agriculture and Forestry University,Fujian,Fuzhou 350002; 2.China National Engineering Research Center of JUNCAO Technology,Fujian,Fuzhou 350002)

[Objective] To screen the culture medium formula forGanodermalucidumcultivated by JUNCAO.[Method] Six kinds of JUNCAO and two auxiliary materials were screened by test-tube method. The growth situations of hypha and fruiting body in selected formulas were observed.[Result] The suitable formulas forGanodermalucidum(Ga0801) cultivated by JUNCAO were No.1(78%D.dichotoma+20%bran+2% gesso), 2(78%M.floridulus+20% bran+2% gesso),6(78%P.oasis1+20% bran+2% gesso) and 10(30%D.dichotoma+48%N.regnaudiana+20% bran+2% gesso). Among them,formula No.6 was the optimal,which had vigorous mycelium growth,early formation of primordium,strong fruiting body and high biotransformation rate.[Conclusion] This research provides scientific basis for the large-scale market cultivation ofGanodermalucidumby JUNCAO.

JUNCAO;Ganodermalucidum; Culture medium; Formula

福建省科技廳重大專項(2014NZ0002-1)；福建省菌草生態產業協同創新中心攻關項目(JCXTGG08)。

王錦鋒(1990- )，男，福建寧德人，碩士研究生，研究方向：菌草栽培食藥用菌。*通訊作者，研究員，從事菌草技術研究和推廣工作。

2016-10-26

S 567.3+1

A

0517-6611(2016)35-0029-03