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鈣調激酶Ⅱ抑制劑在異動癥發生中的分子機制研究

2017-03-08 09:38:22朱忠方丁喜晴楊新新崔桂云花放沈霞
臨床神經病學雜志 2017年1期
關鍵詞:小鼠差異手術

朱忠方,丁喜晴,楊新新,崔桂云,花放,沈霞

·論著·

鈣調激酶Ⅱ抑制劑在異動癥發生中的分子機制研究

朱忠方,丁喜晴,楊新新,崔桂云,花放,沈霞

目的 探討鈣調激酶Ⅱ(CaMKⅡ)抑制劑在異動癥發生中的分子機制。方法 采用6-羥多巴胺立體定向注射至小鼠右側內側前腦束制備偏側帕金森病(PD)小鼠模型,將造模成功的PD小鼠分為PD組(n=11)、KN-92組(n=11)和KN-93組(n=11),并設假手術組(n=10)(在相同部位注射生理鹽水作為對照)。KN-92組和KN-93組給予左旋多巴(15 mg/kg) 和芐絲肼 (12 mg/kg) 腹腔注射,假手術組及PD組注射等量的生理鹽水,1次/d,持續14 d。在第11 d、12 d左旋多巴給藥前,KN-92組紋狀體給予KN-92處理,KN-93組紋狀體給予K-93處理(2 μl,濃度0.1 μg/μl),假手術組及PD組給予等量生理鹽水處理。在給藥的第1 d、3 d、5 d、8 d、10 d、13 d行異常不自主運動(AIM)評分。在給藥的第4 d、9 d、14 d行左前肢使用率的評價。采用Western blot法檢測損傷側紋狀體區環磷腺苷效應元件結合蛋白(CREB)、多巴胺和環磷腺苷調節的磷酸化蛋白-32(DARPP-32)及其磷酸化水平變化情況。 結果 假手術組治療前后左前肢使用率差異無統計學意義。PD組給藥后左前肢使用率逐漸下降,與治療前比較差異有統計學意義(P<0.01),KN-92組和KN-93組給藥后左前肢使用率逐漸升高,與治療前比較差異有統計學意義(P<0.01)。PD組、KN-92組和KN-93組給藥前左前肢使用率兩兩比較差異無統計學意義。PD組、KN-92組和KN-93組小鼠治療前及治療第4 d、9 d左前肢使用率均顯著低于假手術組,差異有統計學意義(P<0.01),PD組、KN-92組治療第14 d左前肢使用率均低于假手術組,差異有統計學意義(P<0.01),KN-93組治療第14 d左前肢使用率與假手術組比較差異無統計學意義。與PD組比較,KN-92組治療第4 d、9 d、14 d及KN-93組治療第4 d、9 d左前肢使用率顯著升高(均P<0.01)。與KN-92組比較,KN-93組第14 d左前肢使用率顯著升高(P<0.01)。KN-93組、KN-92組小鼠治療后第1 d、3 d、5 d、8 d、10 d AIM評分呈現逐漸增高趨勢,兩兩比較差異有統計學意義(均P<0.01)。治療后第14 d,KN-93組AIM評分明顯低于KN-92組(P<0.01),治療后第1 d、3 d、5 d、8 d、10 d,KN-93組AIM評分與KN-92組差異無統計學意義。與假手術組比較,PD組及KN-93組p-DARPP-32及p-CREB水平顯著降低(均P<0.01),KN-92組p-DARPP-32及p-CREB水平顯著升高(均P<0.01)。與PD組比較,KN-92組p-DARPP-32及p-CREB水平顯著升高(均P<0.01),KN-93組比較差異無統計學意義。KN-93組p-DARPP-32及p-CREB水平明顯低于KN-92組(均P<0.01)。結論 左旋多巴誘發的異動癥可能與CaMKⅡ有關,其抑制劑KN-93可能是治療PD引發的運動并發癥的一種新的治療方式。

帕金森??;運動并發癥;磷酸化;鈣調激酶Ⅱ;KN-93

帕金森病(PD)又名震顫麻痹,是一種常見的中老年人神經系統變性疾病[1]。PD的病因尚未完全明確,可能與年齡老化、環境因素、遺傳因素、氧化應激、自由基生成、興奮性氨基酸毒性、免疫異常、細胞凋亡等因素相關[2]。左旋多巴替代療法是PD治療發展史上一重要的里程碑[3]。然而左旋多巴治療PD的“蜜月期”是短暫的,一般是2~5年,之后會出現左旋多巴誘導的異動癥(LID)。……

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