GATA3在前列腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義

釵麗干　張帆

[摘要] 目的 探討GATA3在前列腺癌（PCa）組織中的表達(dá)并分析其與臨床病理特征的關(guān)系。 方法 選取2013年3月～2015年12月內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院病理科存檔的92例PCa穿刺活檢患者標(biāo)本為PCa組及患者年齡相匹配的60例良性前列腺增生（BPH）蠟塊為BPH組，采用免疫組化法檢測(cè)兩組中GATA3的表達(dá)情況。 結(jié)果 PCa組中GATA3的陽性表達(dá)率為83.70%，BPH組中GATA3陽性表達(dá)率為10.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。PCa組中GATA3蛋白表達(dá)的陽性率隨著Gleason評(píng)分增高、TNM分期越晚及血清PSA濃度增大而升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），而GATA3蛋白的表達(dá)陽性率在不同年齡組、淋巴結(jié)是否發(fā)生轉(zhuǎn)移間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。 結(jié)論 GATA3在PCa中高表達(dá)，提示其參與PCa的發(fā)展進(jìn)程。

[關(guān)鍵詞] 前列腺癌；良性前列腺增生；GATA3；免疫組化

[中圖分類號(hào)] R737.25 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2017）01（c）-0023-04

[Abstract] Objective To investigate the expression of GATA3 in prostate cancer （PCa） and its correlation with clinico-pathologic parameters. Methods 92 cases of PCa biopsy specimens in Department of Pathology， Inner Mongolia People′s Hospital from March 2013 to December 2015 were selected as PCa group， 60 wax blocks of BPH with age matched were selected as BPH group. Immunohistochemical method was used to detect the expression of GATA3 in two groups. Results The positive expression rate of GATA3 in PCa group was 83.70%， positive expression rate of GATA3 in BPH group was 10.00%， with statistical difference （P < 0.05）. The positive expression rate of GATA3 in PCa patients was positively related to the development of Gleason score， TNM stages and serum PSA concentration （P < 0.05）， but not to the age and with or without lymphatic metastasis （P > 0.05）. Conclusion The over-expression of GATA3 may play an important role in the pathogenesis of PCa.

[Key words] Prostate cancer； Benign prostatic hyperplasia； GATA3； Immunohistochemistry

前列腺癌（prostate cancer，PCa）是男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，約占男性全部癌癥種類的14%[1]。PCa的發(fā)病率及死亡率有顯著的地域性差異，歐美等發(fā)達(dá)國家的發(fā)病率及死亡率均高于發(fā)展中國家[2]。隨著我國社會(huì)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展以及整體醫(yī)療水平的提高，我國PCa的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年增高的趨勢(shì)[3]。早診斷、早發(fā)現(xiàn)、早治療PCa，可有效改善臨床預(yù)后，降低發(fā)病率及病死率。傳統(tǒng)的早期診斷PCa是通過檢測(cè)患者血清中前列腺特異性抗原（prostate specific antigen，PSA）水平來實(shí)現(xiàn)，但該方法的特異度及靈敏度均不高[4-5]。為此，尋找一種特異度及靈敏度均高的PCa早期診斷分子標(biāo)志物，對(duì)于PCa的診斷、預(yù)后及治療具有重要意義。作為GATA轉(zhuǎn)錄因子家族的GATA3，其羧基端具有2個(gè)鋅指模型結(jié)構(gòu)，發(fā)揮抑癌基因的作用，在維持內(nèi)皮細(xì)胞生物學(xué)功能方面具有重要作用[6-7]。研究表明，GATA3在許多組織和細(xì)胞如T淋巴細(xì)胞、胸腺細(xì)胞、乳腺的腺上皮細(xì)胞、交感神經(jīng)系統(tǒng)以及皮膚毛囊中，具有促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化的重要作用，同時(shí)在參與多種人類腫瘤的分級(jí)、分化、轉(zhuǎn)移進(jìn)程[8-10]。本研究將采用免疫組化法檢測(cè)GATA3在PCa及良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH）組織中的表達(dá)，分析其表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年3月～2015年12月內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院病理科存檔的92例PCa穿刺活檢患者標(biāo)本為PCa組及患者年齡相匹配的60例BPH蠟塊為BPH組，標(biāo)本經(jīng)兩名以上資深病理醫(yī)師確診。納入標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)《前列腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)》（WS336-2011）[11]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①曾接受抗雄激素及放療處理；②合并其他惡性腫瘤疾病；③既往有前列腺手術(shù)史及合并其他嚴(yán)重內(nèi)科疾病者。92例PCa患者均為男性，年齡48～86歲，平均（59.27±10.94）歲。病理類型：按照Gleason評(píng)分進(jìn)行病理分級(jí)[12]，高分化（Gleason 2～4分）22例；中分化（Gleason 5～7分）36例；低分化（Gleason 8～10分）34例。TNM臨床分期[13]：T1期30例，T2期22例，T3期30例，T4期10例；N0期84例，N1期8例；M0期82例，M1期10例。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化 石蠟標(biāo)本切片厚度為5 μm。采用免疫組化法檢測(cè)，經(jīng)脫蠟、脫水、抗原修復(fù)及染色，辣根過氧化物酶標(biāo)記，蘇木精復(fù)染等操作。實(shí)驗(yàn)步驟均嚴(yán)格按照試劑盒操作說明進(jìn)行。鼠抗人GATA3單克隆抗體為福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司產(chǎn)品（型號(hào)MAB-0142）。即用型快速免疫組化檢測(cè)試劑盒（鼠）為福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司產(chǎn)品（型號(hào)806180031）?？贵w滴度為1∶50。以試劑公司提供的陽性對(duì)照片作為陽性對(duì)照，以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.2.2 結(jié)果判定 GATA3蛋白因子主要表達(dá)于細(xì)胞核，呈棕黃色，背景不著色。由兩位有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師采用雙盲法獨(dú)立評(píng)估結(jié)果，均按照半定量積分法評(píng)分，每例均隨機(jī)觀察5個(gè)高倍視野（400×），進(jìn)行半定量積分判定。①按陽性細(xì)胞率：陽性細(xì)胞<5%為0分，5%～25%為1分，>25%～50%為2分，>50%～75%為3分，>75%為4分；②按細(xì)胞染色強(qiáng)度：無著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。將細(xì)胞陽性率與染色強(qiáng)度兩者積分相乘：0～1分為陰性（-），2～4分為弱陽性（+），5～8分為度陽性（++），9～12分為強(qiáng)陽性（+++）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)值在臨界狀態(tài)時(shí)采用四格表精確概率法，等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 GATA3在PCa及BPH組織中的表達(dá)

免疫組化染色結(jié)果顯示，GATA3蛋白著色于細(xì)胞核，呈現(xiàn)棕黃色陽性表達(dá)；PCa組患者中GATA3的陽性表達(dá)率高于BPH組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見圖1、表1。

2.2 PCa患者GATA3蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

PCa患者GATA3蛋白表達(dá)的陽性率隨著Gleason評(píng)分增高、TNM分期越晚及血清PSA濃度增大而升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），而GATA3蛋白的表達(dá)陽性率在不同年齡組、淋巴結(jié)是否發(fā)生轉(zhuǎn)移間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。見表2。

3 討論

近年來，PCa在我國的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。由于PCa的病程長(zhǎng)，起病隱匿，患者因尿路癥狀就診時(shí)發(fā)現(xiàn)，但往往已經(jīng)進(jìn)展到晚期，錯(cuò)過治療的最佳時(shí)期。所以，對(duì)于早期診斷PCa十分重要。目前我國對(duì)于PCa的診斷性初篩主要依靠于對(duì)血清PSA值的測(cè)試，但PSA值在灰區(qū)（4.0～10.0 ng/mL）時(shí)的靈敏度與特異度降低，則難以區(qū)分PCa與BPH[14-15]。

隨著PCa的分子生物學(xué)、腫瘤學(xué)以及免疫組化相關(guān)研究的發(fā)展，多種細(xì)胞因子、蛋白分子等共同參與PCa的發(fā)生和發(fā)展，與其預(yù)后評(píng)價(jià)有非常密切的關(guān)系。GATA3是GATA轉(zhuǎn)錄因子家族中的一員。研究表明，GATA3促進(jìn)多種組織的正常發(fā)育、分化及增殖，GATA3促進(jìn)T細(xì)胞的發(fā)展及向Th2細(xì)胞分化[16-17]。GATA3對(duì)于非造血細(xì)胞的發(fā)育同樣重要，如交感神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、脂肪細(xì)胞、耳蝸及毛囊等[18]。GATA3在腫瘤分化進(jìn)程中發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用，若其缺失，則會(huì)加速伴有大量GATA3陰性腫瘤細(xì)胞的腫瘤擴(kuò)散[19]。據(jù)報(bào)道，乳腺癌及結(jié)直腸癌組織中GATA3過表達(dá)且與腫瘤惡性進(jìn)程相關(guān)[20]。近期研究提示，GATA3在膀胱小細(xì)胞癌呈現(xiàn)陽性反應(yīng)，且在區(qū)分前列腺及膀胱起源的小細(xì)胞癌中具有潛在的診斷價(jià)值，同樣在非小細(xì)胞肺癌中也具有診斷價(jià)值[21]。

本研究中，免疫組化染色結(jié)果提示，GATA3主要定位于細(xì)胞核，呈現(xiàn)棕褐色陽性表達(dá)；與BPH組患者相比，PCa組中的GATA3的陽性表達(dá)率顯著升高。這說明GATA3在PCa的進(jìn)程中發(fā)揮重要作用。Liu等[22]曾采用免疫組化技術(shù)檢測(cè)GATA3在不同腫瘤及正常組織中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，86%的尿路上皮癌和94%的乳腺癌GATA3表達(dá)陽性，認(rèn)為GATA3可潛在作為乳腺及尿路上皮癌的特異性標(biāo)記。此外，本研究還表明，PCa患者中GATA3蛋白表達(dá)的陽性隨著Gleason評(píng)分增高、TNM分期越晚、血清PSA濃度增大而增強(qiáng)，這提示GATA3在PCa惡變進(jìn)程中扮演著重要角色；GATA3蛋白表達(dá)的陽性率在不同年齡組及淋巴結(jié)是否發(fā)生轉(zhuǎn)移間的表達(dá)差異不大，這也許與本研究納入樣本量偏少有關(guān)。

綜上所述，PCa組織中GATA3陽性表達(dá)率高于BPH組織，且隨著分化進(jìn)程，TNM分期越晚及PSA濃度增高而出現(xiàn)表達(dá)增強(qiáng)，提示GATA3可能對(duì)PCa的發(fā)生、發(fā)展起促進(jìn)作用，有望作為潛在的PCa診斷及治療的有效靶點(diǎn)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Gr■nberg H，Adolfsson J，Aly M，et al. Prostate cancer screening in men aged 50-69 years（STHLM3）：a prospective population-based diagnostic study [J]. Lancet Oncol，2015，16（16）：1667-1676.

[2] Akram ON，Mushtaq G，Kamal MA. An overview of current screening and management approaches for prostate cancer [J]. Curr Drug Metab，2015，16（8）：713-718.

[3] 齊金蕾，王黎君，周脈耕，等.1990～2013年中國男性前列腺癌疾病負(fù)擔(dān)分析[J].中華流行病學(xué)雜志，2016，37（6）：778-782.

[4] Prcic A，Begic E，Hiros M. Usefulness of total PSA value in prostate diseases diagnosis [J]. Acta Inform Med，2016，24（3）：156-161.

[5] Kirby R. The role of PSA in detection and management of prostate cancer [J]. Practitioner，2016，260（1792）：17-21，3.

[6] 謝軼群，裔海鷹，施俊義，等.GATA3在乳腺癌中的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系[J].中國癌癥雜志，2010，20（12）：911-914.

[7] Siddiqui MT，Seydafkan S，Cohen C. GATA3 expression in metastatic urothelial carcinoma in fine needle aspiration cell blocks：a review of 25 cases [J]. Diagn Cytopathol，2014，42（9）：809-815.

[8] Asselin-Labat ML，Sutherland KD，Barker H，et al. Gata-3 is an essential regulator of mammary-gland morphogenesis and luminal-cell differentiation [J]. Nat Cell Biol，2007，9（2）：201-209.

[9] Davis DG，Siddiqui MT，Oprea-Ilies G，et al. GATA-3 and FOXA1 expression is useful to differentiate breast carcinoma from other carcinomas [J]. Hum Pathol，2016，47（1）：26-31.

[10] Keshari RP，Wang W，Zhang Y，et al. Decreased expression of the GATA3 gene is associated with poor prognosis in primary gastric adenocarcinoma [J]. PLoS One，2014，9：e87195.

[11] 王行環(huán)，劉同族.提高認(rèn)識(shí)規(guī)范診療-《前列腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)》解讀[J].中國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理，2011，2（4）：25-27.

[12] Mai ZP，Yan WG，Li HZ，et al. Clinical characteristics and outcome of gleason score 10 prostate cancer on core biopsy treated by external radiotherapy and hormone therapy [J]. Chin Med Sci J，2015，30（2）：90-94.

[13] Wang Q，Zhang JG，Wang W. Expression and significance of S100P，CD147，and OCT4 in different prostate cancer tissue TNM stages [J]. Genet Mol Res，2015，14（2）：6844-6851.

[14] 吳杰，趙睿哲，黃源，等.PSA“灰區(qū)”前列腺癌預(yù)測(cè)模型及隨訪系統(tǒng)的建立[J].中華泌尿外科雜志，2016，37（4）：280-283.

[15] 王煒，李傳剛，劉輝，等.前列腺特異性抗原對(duì)前列腺癌診斷價(jià)值的探討[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，45（1）：61-65，69.

[16] Zhu YF，Hu JZ，Zhao PN，et al. All-transretinoic acid regulates Th1/Th2 balance in CD4+ T cells when GATA-3 is deficient [J]. Biomed Environ Sci，2013，26（9）：774-777.

[17] Kaufman CK，Zhou P，Pasolli HA，et al. GATA-3：an unexpected regulator of cell lineage determination in skin [J]. Genes Dev，2003，17（17）：2108-2122.

[18] Tsarovina K，Pattyn A，Stubbusch J，et al. Essential role of Gata transcription factors in sympathetic neuron development [J]. Development，2004，131（19）：4775-4786.

[19] Chou J，Provot S，Werb Z. GATA3 in development and cancer differentiation：cells GATA have it！ [J]. J Cell Physiol，2010，222（1）：42-49.

[20] Kouros-Mehr H，Bechis SK，Slorach EM，et al. GATA-3 links tumor differentiation and dissemination in a luminal breast cancer model [J]. Cancer Cell，2008，13（1）：141-152.

[21] Bezerra SM，Lotan TL，F(xiàn)araj SF，et al. GATA3 expression in small cell carcinoma of bladder and prostate and its potential role in determining primary tumor origin [J]. Hum Pathol，2014，45（5）：1682-1687.

[22] Liu H，Shi J，Wilkerson ML，et al. Immunohistochemical evaluation of GATA3 expression in tumors and normal tissues [J]. Am Soc Clin Pathol，2012，138（1）：57-64.

（收稿日期：2016-10-02 本文編輯：李亞聰）