生物組織中糖類、脂肪和蛋白質檢測鑒定的顯色反應機理探究

陳科云

摘要：論文旨在做好生物組織有機化合物的顯色反應原理，通過分析生物組織中糖類、脂類和蛋白質檢測鑒定顯色反應的機理，探討了可溶性還原糖鑒定的反應原理，明確了蛋白質鑒定反應原理，在雙縮脲試劑鑒定過程，實現肽鍵試劑的有效鑒定。在生物組織中糖類、脂肪和蛋白質檢測鑒定的顯色反應過程，還存在負反應，尤其是蛋白質鑒定過程，發生了蛋白質變性現象。在實驗操作過程，結合還原糖以及蛋白質的有效鑒定，現配現用斐林試劑，做好生物組織中糖類、脂肪和蛋白質的有效檢測，也要合理掌握滴加夜的滴加量和滴加濃度，避免出現過量和過快的滴加過程，同時也要避免出現負反應。

關鍵詞：生物組織；糖類；脂肪；蛋白質；顯色反應；檢測

G633.91

生物課程的教材改革越來越注重內容的創新，同時也要做好關鍵知識點的有效教學，對于生物組織中有機化合物的反應原理而言，更要分析三大有機化合物的顯色反應過程，盡可能的確定糖類、脂肪和蛋白質檢測中的不同顯色反應機理，總結注意事項，綜合提升生物知識儲備能力。對于生物組織中糖類、脂肪和蛋白質檢測鑒定的顯色反應機理究竟如何始終是生物老師教學高度重視的一個問題+[1]。因此論文對生物組織中糖類、脂肪和蛋白質阿金側鑒定的顯色反應機理進行研究有一定的現實意義。

一、生物組織中糖類、脂肪和蛋白質檢測鑒定的顯色反應

糖類、脂肪和蛋白質作為生物組織中的三大有機化合物，糖類中的淀粉一旦遇到碘，將會呈現出藍色，就可溶性還原糖而言，一旦和斐林試劑發生反應，有磚紅色沉淀，同時脂肪和蘇丹III反應，出現橘黃色的反應，和蘇丹IV反應，出現紅色。蛋白質一旦和雙縮脲試劑發生反應，將會出現紫色反應，這種顯色反應作用下，生物質中糖類可以進行有效的判定，同時也可以鑒定蛋白質和脂肪。

關于顯色反應原理的探究，始終是生物界高度重視的一個焦點，在有機化合物的處理過程，結合多種有機化合物的反應原理，借助于多種試劑實現有效的顯色反應處理，實現化合物的鑒定。關于染色劑的吸附顯色過程，主要是做好還原性糖和蛋白質的有效鑒定過程，分析和試劑發生的作用，并結合顯色現象，進而做好鑒定[2]。

基于可溶性還原糖鑒定的過程，確定類似反應原理，確定可溶性還原糖的結構，主要是可溶性還原糖存在醛基糖結構，同時也存在堿性果糖溶液和麥芽糖，葡萄糖和果糖作為同分異構體，而葡萄糖中一般有醛基，但是果糖具有酮基并沒有醛基，溶液稀釋的過程，出現了互變異構。

稀堿溶液用果糖稀釋的過程，出現了還原性的反應，同時還原性糖常伴有醛基反應，在和斐林試劑反應的時候，氫氧化銅和可溶性還原糖出現了氧化還原反應，而藍色氫氧化銅也伴有磚紅色氧化亞銅，這一反應的進行，還原糖存在。

脂肪鑒定的過程，蘇丹III一旦融入脂肪，溶解度比較大，脂肪生物組織得到有效的處理，同時對于酒精中的蘇丹III而言，和脂肪發生反應，脂肪呈現出橘黃色。關于蛋白質的鑒定過程，主要是確定雙縮脲的試劑成分，確定氫氧化鈉溶液以及質量濃度，進而實現硫酸銅溶液的分析，在堿性溶液作用下，往往和銅離子發生反應，并伴有紫紅色絡合物沉淀。

關于蛋白質鑒定的一種反應原理而言，主要是結合蛋白質鑒定的試劑，并借助于雙縮脲實際確定蛋白質顯色反應，雙縮脲分子一旦發生縮合反應，將會失去一分子氨，分子中和蛋白質一樣存在肽鍵，同時堿性溶液作用下，出現了大量的化學反應，并出現了紫色銅離子羅何物，基于肽鍵和物質反應過程，常伴有紫色銅離子絡合物，這一反應過程中需要分析生物組織蛋白質的存在。

二、 生物組織中糖類、脂肪和蛋白質檢測鑒定可能存在的負反應

基于生物組織中糖類、脂肪和蛋白質檢測鑒定中的問題分析，就要做好蘋果組織樣液的加熱過程，一旦加入斐林試劑之后，將會出現受熱現象，黑色沉淀逐步產生，斐林試劑也伴有黑色沉淀，主要是氫氧化銅逐步的分解了氧化銅，在磚紅色沉淀之后，也出現了變黑的現象，也即是氧化了氧化亞銅，進而出現了氧化銅[3]。鑒定蛋白質的時候，需要做好蛋清液的稀釋工作，逐步的滴加硫酸銅，乳白色沉淀逐步產生，在重金屬鹽出現變性之后，變小了實際的溶解度，同時實驗也伴有蛋白質的變性，這種蛋白質變性不僅僅和溫度有關，同時也和堿性強度有著直接的關聯，一旦過強受熱和過強堿性，都會導致蛋白質變性[4]。鑒定蛋白質的時候，需要控制硫酸銅的滴加速度，一旦有過量和過快的滴加速度，藍色沉淀產生，硫酸銅和氫氧化鈉出現了藍色氫氧化銅沉淀。

三、生物組織中糖類、脂肪和蛋白質檢測鑒定的相關注意事項

還原糖和蛋白質鑒定階段，就要避免出現負反應，保證有著規范化的操作。關于斐林試劑的使用，需要本著現配現用的基本原則，在斐林試劑以及蘋果組織樣液混合之后，實現充分的加熱處理。

蛋清液的稀釋之后，可以使用蒸餾水，避免蛋清液的加熱，同時鑒定的過程，避免滴加硫酸銅，需要充分均勻氫氧化鈉溶液，在硫酸銅滴加之后，避免有過快的滴加速度，進行邊滴加邊振蕩的過程。而硫酸銅溶液一旦為0.05g/mL時，就要滴加2滴左右，硫酸銅溶液的濃度為0.05g/mL事，就要滴加4滴左右。關于氫氧化鈉濃度而言，避免濃度的過大，確定氫氧化鈉的低濃度添加。

總而言之，生物組織中糖類、脂肪和蛋白質檢測鑒定時，就要分析三大有機物的反應過程，做好糖類、脂肪和蛋白質檢測鑒定的顯色原理分析，合理使用滴加夜，并結合不同化合物的基本反應要求，避免出現負反應。鑒定蛋白質的時候，需要做好蛋清液的稀釋工作，逐步的滴加硫酸銅，乳白色沉淀逐步產生。蛋白質的鑒定過程，主要是確定雙縮脲的試劑成分，確定氫氧化鈉溶液以及質量濃度，進而實現硫酸銅溶液的分析。對于斐林試劑的使用，需要本著現配現用的基本原則，在斐林試劑以及蘋果組織樣液混合之后，實現充分的加熱處理。

參考文獻：

[1]鄭琦琦，吳堅.基于NO2-顯色反應的抗濕性噴霧霧滴密度和大小的檢測體系[J].農業工程學報，2015，04（3）：107-112.

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[3]王子武，孫海榮.生物組織中幾種有機化合物的定量檢測[J].生物學教學，2016，41（5）：65-65，66.

[4]孫鵬飛，高獻禮，閆爽等.醬油二次沉淀蛋白質的分離、鑒定及氨基酸分析[J].食品工業科技，2014，35（5）：87-90.