冠心病患者血清中趨化因子CXC配體5的表達及其臨床意義

王環(huán)宇 張福宸 李大鵬 張立敏 張明亮

(佳木斯市中心醫(yī)院心內科，黑龍江 佳木斯 154002)

冠心病患者血清中趨化因子CXC配體5的表達及其臨床意義

王環(huán)宇 張福宸 李大鵬 張立敏 張明亮

(佳木斯市中心醫(yī)院心內科，黑龍江 佳木斯 154002)

目的 研究不同臨床類型冠心病(CHD)患者和正常人血清中趨化因子CXC配體(L)5蛋白的表達差異。方法 酶聯(lián)免疫吸附法檢測59例CHD患者和23例正常人血清中CXCL5蛋白的表達。結果 正常對照組、穩(wěn)定型心絞痛(SAP)組、不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)組和急性心肌梗死(AMI)組血清中的CXCL5蛋白水平分別為(63.47±5.67)、(64.37±7.26)、(69.74±7.99)和(70.84±9.44)ng/ml，與正常對照組和SAP組比較，UAP組和AMI組顯著增高(P< 0.05)；與血清CXCL5水平<60 ng/ml組比較，CHD組血清CXCL5水平>70 ng/ml組Gensini評分顯著增高(P<0.05)。結論 血清CXCL5水平與CHD病情具有相關性，其可能作用一個經典的炎癥因子參與CHD進程。檢測血清CXCL5的水平和針對CXCL5相關治療可為CHD的臨床診斷和治療提供新的標志物和靶點。

冠心病；趨化因子CXC配體(L)5；Gensini評分

研究表明〔1〕，近10年我國冠狀動脈硬化性心臟病(CHD)的發(fā)病率增加了2～3倍，而急性心肌梗死(AMI)病例增加了2倍以上。CHD的發(fā)病機制至今尚未完全闡明，目前認為其發(fā)病與多種因素相關，包括遺傳、環(huán)境、飲食習慣等。炎癥反應在CHD的形成與發(fā)展中亦扮演著重要角色〔2〕。趨化因子屬于細胞因子超家族中的一類小分子分泌性蛋白質，其可通過與其特異性的細胞膜表面G蛋白耦聯(lián)受體結合，吸引、活化及調節(jié)多種白細胞的遷移而參與炎癥反應和免疫應答〔3〕。本研究觀察不同臨床類型CHD患者和正常人血清中趨化因子CXC配體(L)5蛋白的表達差異，以期明確其在CHD的作用及其與CHD程度的相關性。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 2013年6月至2016年3月經佳木斯市中心醫(yī)院冠狀動脈造影確診的CHD病例59例，男28例，女31例；其中AMI 18例，不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)21例，穩(wěn)定型心絞痛(SAP)20例，年齡42～85(平均63.9)歲。排除先天性心臟病、自身免疫性疾病、風濕性疾病、感染性疾病及腫瘤患者。同期的體檢健康者23例作為正常對照組，男10例，女13例；年齡44～83(平均62.6)歲。各組年齡、性別構成無顯著差異(P>0.05)。

1.2 酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測CXCL5的表達 受檢者清晨空腹抽取靜脈血5 ml，3 000 r/min離心5 min，小心吸取上層血清，并于-80℃冰箱凍存?zhèn)溆谩４袠颖臼占戤吅螅肊LISA法檢測血清中CXCL5的表達情況，具體操作如下：將不同濃度的重組人CXCL5標準品0.1 ml依次加入96孔板中，同時將各樣本0.1 ml也分別加96孔板中，37℃孵育90 min；甩去板內液體，對著吸水紙拍幾下，勿洗；將兔抗人CXCL5一抗(1∶10 000)0.1 ml加入96孔板中，37℃孵育60 min；0.01 mol/L,磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌3×3 min；加入生物素標記小鼠抗兔IgG 0.1 ml，37℃孵育20 min；0.01 mol/L PBS洗滌3×3 min；加入二抗工作液，37℃孵育20 min，0.01 mol/L PBS洗滌5×3 min；每孔加入37℃平衡顯色液，37℃避光顯色20 min；每孔加入100 μl TBS終止液；酶標儀在450 nm處讀取OD值；繪制標準曲線，利用公式計算出各樣本濃度。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行方差分析和q檢驗。

2 結 果

2.1 CHD患者血清高表達CXCL5 與正常對照組〔(63.47±5.67)ng/ml〕和SAP組〔(64.37±7.26)ng/ml〕比較，UAP組〔(69.74±7.99)ng/ml〕和AMI組CXCL5蛋白表達〔(70.84±9.44)ng/ml〕顯著增高(P<0.05)。

2.2 CHD患者血清CXCL5濃度與Gensini積分呈正相關 CHD患者血清中CXCL5濃度與年齡不具有相關性，但與Gensini評分具有相關性，與血清CXCL5濃度<60 ng/ml亞組比較，CHD患者血清CXCL5濃度60～70和>70 ng/ml亞組的Gensini評分顯著增高(P< 0.05)。見表1。

CXCL5濃度(ng/ml)n年齡(歲)Gensini評分<601662.69±13.5952.19±10.6360～701762.47±13.1467.18±20.931)>702665.62±11.6065.72±18.861)

與<60 ng/ml比較：1)P<0.05

3 討 論

目前普遍認為CHD的發(fā)生與吸煙、高血壓、高血脂、糖尿病、肥胖等因素密切相關〔4，5〕。但也有研究表明動脈粥樣硬化也與炎癥反應有關，是一種慢性炎癥性疾，在動脈粥樣硬化斑塊中有包括巨噬細胞、淋巴細胞和肥大細胞等大量炎性細胞的浸潤，這些炎性細胞可通過分泌的各種細胞因子，參與動脈粥樣硬化的發(fā)展與演進過程〔6〕。根據(jù)羧基端兩個保守的半胱氨酸殘基的位置，趨化因子可被分為4個高保守的亞家族，它們分別為CXC、CC、C和CX3C等(C為半胱氨酸，X為任意氨基酸)。另外，依據(jù)是否存在谷氨酸-亮氨酸-精氨酸(ELR)結構，CXC亞家族可被進一步分為ELR+CXC和ELR-CXC兩類〔7〕。關于趨化因子與CHD的關系，國內外學者已經進行了大量研究，結果表明各類趨化因子在CHD形成和發(fā)展中的作用不盡相同〔8〕。作為一種多效性趨化因子，CXCL12可直接抑制血小板活化，而后者可加重動脈粥樣硬化的形成〔9〕。Yamaguchi等〔10〕研究顯示，CXCL12可經PI3K/Akt 信號通路參與心血管疾病的修復過程，其中包括心肌細胞修復、新生血管的形成和心肌梗死后心功能的恢復。由此可見，CXCL12可通過抑制血小板活化、促進新生血管的形成及恢復梗死后心臟功能等途徑，來抑制CHD的發(fā)展、改善CHD的癥狀。同樣，CCL21及其受體CCR7在動脈粥樣硬化斑塊的形成中也發(fā)揮抑制作用〔11〕。但與CXCL12和CCL21不同的是，CXCL16在CHD中可促進斑塊形成及不穩(wěn)性，甚至誘發(fā)斑塊出血和斑塊破裂〔12〕。CXCL5屬于ELR+CXCL類趨化因子，作為炎性因子，CXCL5可以參與先天性和后天性免疫應答，并在動脈粥樣硬化中發(fā)揮重要作用〔13，14〕。研究表明，CXCL5可通過調節(jié)巨噬細胞活化，增加膽固醇外流調節(jié)蛋白ABCA1的表達及增強巨噬細胞的膽固醇外流活性來調節(jié)泡沫細胞的形成，最終參與動脈粥樣硬化的發(fā)展〔13〕。另外，作為CXCL5的唯一特異性受體，CXCR2也已被報道在動脈粥樣硬化損傷進程中，參與巨噬細胞積蓄〔15〕。本研究結果提示，血清CXCL5的濃度與CHD病情具有相關性，其可能作用一個經典的炎癥因子參與了CHD的進程。檢測血清CXCL5的水平，可為CHD的臨床診斷和病程評估提供參考依據(jù)。

1 徐 偉，王俊棟，鄔俊峰，等.冠心病與炎癥反應的中西醫(yī)臨床研究進展〔J〕.中西醫(yī)結合心腦血管病雜志，2013；11(6)：741-4.

2 Ross R.Atherosclerosis--an inflammatory disease〔J〕.N Engl J Med，1999；340(2)：115-26.

3 Jang TL，Schaeffer AJ.The role of cytokines in prostatitis〔J〕.World J Urol，2003；2(21)：95-9.

4 Gruady SM.Consensus statement：role of therapy with ′statins′ in patient with hypertriglyceridemia〔J〕.Am J Cardiol，1998；81(4A)：1B-6B.

5 馬會利，胡桃紅，鄒建宏，等.國人男女冠心病發(fā)病危險因素分析〔J〕.心血管康復醫(yī)學雜志，2011；20(6)：517-9.

6 Shishehbor MH，Hazen SL.Inflammatory and oxidative markers in atherosclerosis：relationship to outcome〔J〕.Curr Atheroscler Rep，2004；6(3)：243-50.

7 Douglas MR，Morrison KE，Salmon M，etal.Why does inflammation persist：a dominant role for the stromal microenvironment〔J〕?Exp Rev Mol Med，2002；4(25)：1-18.

8 Burke-Gaffney A，Brooks AV，Bogle RG.Regulation of chemokine expression in atherosclerosis〔J〕.Vasc Pharmacol，2002；38(5)：283-92.

9 Stellos K，Bigalke B，Langer H，etal.Expression of stromal-cell derived factor-1 on circulating platelets is increased in patients with acute coronary syndrome and correlates with the number of CD34+progenitor cells〔J〕.Eur Heart J，2009；30(5)：584-93.

10 Yamaguchi J，Kusano KF，Masuo O，etal.Stromal cell-derived factor-1 effects on ex vivo expanded endothelial progenitor cell recruitment for ischemic neovascularization〔J〕.Circulation，2003；107(9)：1322-8.

11 Nickel T，Pfeiler S，Summo C，etal.OxLDL downregulates the dendritic cell homing factors CCR7 and CCL21〔J〕.Mediators Inflamm，2012；2012(2)：320953.

12 Huang M，Han Y，Zhang X，etal.An intron polymorphism in the CXCL16 gene is associated with increased risk of coronary artery disease in Chinese Han population：a large angiography-based study〔J〕.Atherosclerosis，2010；210(1)：160-5.

13 Rousselle A，Qadri F，Leukel L，etal.CXCL5 limits macrophage foam cell formation in atherosclerosis〔J〕.J Clin Invest，2013；123(3)：1343-7.

14 Sepuru KM，Poluri KM，Rajarathnam K.Solution structure of CXCL5-a novel chemokine and adipokine implicated in inflammation and obesity〔J〕.PLoS One，2014；9(4)：e93228.

15 Boisvert WA，Santiago R，Curtiss LK，etal.A leukocyte homologue of the IL-8 receptor CXCR-2 mediates the accumulation of macrophages in atherosclerotic lesions of LDL receptor-deficient mice〔J〕.J Clin Invest，1998；101(2)：353-63.

〔2016-03-17修回〕

(編輯 苑云杰)

張明亮(1977-)，男，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事心血管介入研究。

王環(huán)宇(1976-)，男，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事心血管介入研究。

R541.1

A

1005-9202(2017)07-1640-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.07.030