血培養病原菌分布及耐藥性分析

張靜會

(天津市寶坻區人民醫院檢驗科，天津寶坻301800)

血培養病原菌分布及耐藥性分析

張靜會

(天津市寶坻區人民醫院檢驗科，天津寶坻301800)

目的分析我院2014年1月-2015年12月血培養病原菌分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供依據。方法4064份住院患者血培養標本經BacT/ALERT 3D自動化血培養儀及配套血培養瓶培養，VITEK-2 Compact全自動微生物鑒定藥敏系統及真菌ATB FUNGUS 3進行菌株鑒定和耐藥性檢測。結果血培養標本分離出病原菌共517株，檢出率為12. 72%，其中革蘭陰性桿菌286株(55.32%)，革蘭陽性球菌214株(41.39%)，真菌11株(2.13%)，革蘭陽性桿菌6株（1.16%）。檢出率位于前9位的分離菌依次為大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌、鮑曼不動桿菌、肺炎鏈球菌、糞腸球菌、屎腸球菌、銅綠假單胞菌。藥敏試驗結果顯示：金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌對萬古霉素、利奈唑胺耐藥率均為0%；大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對頭孢哌酮/舒巴坦、亞胺培南的耐藥率均為0%；銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌耐藥率較高。結論血培養病原菌種類較多，以革蘭陰性桿菌為主，耐藥性差異較大，應及時監測血培養病原菌菌種及耐藥性的變化，防止抗菌藥物濫用，減少不合理的經驗性治療。

血培養；病原菌；耐藥性

血流感染(BSI)是一種嚴重的全身感染性疾病，病情復雜、進展迅速。血培養是診斷血流感染的“金標準”[1]。近年來，隨著器官移植、腫瘤化療患者的增加，各種介入性檢查治療和導管置留的普遍應用，人口老齡化、免疫缺陷人群的出現以及廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑的廣泛應用，臨床發生血流感染的患者逐年增加，因此掌握血培養病原菌的分布和病原菌的耐藥性對血流感染的診斷和治療具有重要的意義，早期恰當的初始抗菌治療對降低發病率和病死率至關重要。本文選擇天津市寶坻區人民醫院2014年1月-2015年12月年共4064份住院患者血培養結果進行分析總結，為臨床提供用藥依據并進行耐藥現狀分析。

1 材料與方法

1.1 標本來源2014年1月-2015年12月我院各科4064例住院患者送檢血培養標本，分離病原菌517株（剔除同一患者2次分離出同一菌株者不重復記入，只統計初次分離菌株）。

1.2 儀器與試劑BacT/ALERT 3D自動化血培養儀及配套血培養瓶、VITEK-2 Compact全自動微生物鑒定藥敏系統及ATB FUNGUS 3真菌藥敏板條等為生物梅里埃公司產品。藥敏試驗紙片為北京天壇藥物生物技術開發公司生產，培養基為天津金章科技發展有限公司生產。

1.3 方法

1.3.1 標本的采集及培養參照《血培養檢測規范化操作》[2]進行標本的正確采集，采集量一般為成人8～10ml注入需氧和厭氧瓶各1份，兒童1～3ml注入兒童需氧瓶，在患者發熱初期或有感染癥狀時抽取立刻送微生物室。置BacT/ALERT 3D自動化血培養儀中培養，儀器報警提示陽性時立即轉種相應培養基，同時進行革蘭染色并電話報告臨床[3]，分離培養18～24h后進行細菌鑒定和藥敏[4]。補充藥敏采用CLSI推薦的紙片擴散法（K-B法）進行，判定標準根據CLSI2014年標準進行判讀。

1.3.2 鑒定和藥敏試驗使用VITEK-2 Compact全自動微生物鑒定藥敏系統及真菌ATB FUNGUS 3藥敏板條對分離出的細菌和真菌進行鑒定和藥敏試驗。

1.3.3 質控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、克柔念珠菌ATCC6258，由天津市臨床檢驗中心提供。

2 結果

2.1 血培養陽性標本菌株的分布及構成血培養分離病原菌分布情況：4064例患者的血培養中分離出病原菌517株，陽性檢出率為12.72%（剔除同一患者2次分離出同一菌株者不重復記入，只統計初次分離菌株）。其中革蘭陰性桿菌286株(55.32%)，革蘭陽性球菌214株(41.39%)，真菌11株(2.13%)，革蘭陽性桿菌6株（1.16%）。見表1。

表1 2014年1月-2015年12月血培養病原菌分布

2.2 革蘭陰性桿菌耐藥率大腸埃希菌共檢出166株，其中ESBLs大腸埃希菌為60株（36.14%）。肺炎克雷伯菌共檢出57株，其中產ESBLs肺炎克雷伯菌9株（15.79%）。具體耐藥率詳見表2。

表2 革蘭陰性桿菌耐藥率（%）

2.3 革蘭陽性球菌耐藥率見表3。

3 討論

近年來，由于各種抗生素、免疫抑制劑、外科手術等侵襲性操作和介入治療手段的應用，致使血流感染的發生率呈明顯上升趨勢[5]。血培養是血流感染診斷、治療和病情監測的關鍵，對臨床醫生合理使用抗菌藥物，控制血流感染具有十分重要的臨床意義[6]。我院2014年1月-2015年12月，共分離出517株病原菌，血培養的陽性率為12.72%。本文血培養檢測結果與文獻報道的血培養凝固酶陰性葡萄球菌檢出率高于大腸埃希菌的結果不盡相同[7-9]。

分離的革蘭陽性菌主要為葡萄球菌屬，其中凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)占大多數。有學者發現血培養中CNS有27%引起BSI，37%可能引起感染，36%為污染菌。應綜合報警時間、多套血培養結果和患者對治療的反應來對致病CNS和污染CNS作進一步的判斷，同時也要規范血培養標本的采集，嚴格無菌操作降低污染率，減少污染對CNS抗菌藥物的使用。

根據藥敏結果顯示，葡萄球菌屬對青霉素的耐藥率普遍在80%以上，呈高耐藥性，金黃色葡萄球菌中MRSA的檢出率也比較高，主要原因在于青霉素類藥物的廣泛應用，使葡萄球菌產生β－內酰胺酶和PBPs性質的改變，從而大大降低了其與青霉素的親和力，表現出耐藥性，這種耐藥機制一但產生，葡萄球菌對幾乎所有的β－內酰胺類抗生素(如青霉素類、頭孢菌素類、氨曲南、碳青霉烯類等)耐藥。未發現耐萬古霉素的葡萄球菌，因此對葡萄球菌引起的感染可選用糖肽類抗生素。但國外已有對萬古霉素耐藥的報道[10]。肺炎鏈球菌對左氧氟沙星及頭孢噻肟耐藥率較低，對青霉素及萬古霉素耐藥率為0%。糞腸球菌對利奈唑胺和萬古霉素耐藥率為0%，對呋喃妥因、氨芐西林、青霉素、左氧氟沙星和莫西沙星耐藥率較低。

本文腸桿菌科細菌中以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌屬細菌最為常見，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌屬細菌常由于產ESBLs而對第一、二、三代頭孢菌素、氨曲南及β－內酰胺類抗生素耐藥。血培養中銅綠假單胞菌在ICU患者中更為常見，常發生在有嚴重原發病或免疫缺陷患者中，繼發于醫院獲得性肺炎，尤其是呼吸機相關肺炎者多見，其病勢兇險，病死率高。鮑曼不動桿菌近些年耐藥率呈現明顯上升趨勢，對大部分抗生素的耐藥率均在50%以上，主要分離于ICU患者，大部分為醫院獲得性感染，醫護人員加強院感意識，認真執行手衛生，可有效控制院感的發生。

總之，臨床大量使用各類抗菌藥物，導致細菌的耐藥率不斷上升，應引起高度的重視。因此，了解血流感染病原菌的耐藥性對指導臨床用藥有重要的意義[11]。

表3 革蘭陽性球菌耐藥率（%）

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R446.5，Q939.92

A

1674-1129(2017)02-0257-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.02.040

2016-10-12；

2016-11-14)