紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2在診斷地中海貧血中的應用

何柯新，王會敏，麥靜雯，邱萍英，徐鵬，張燁梓，洪劍浩，林裕龍

（1廣州醫科大學附屬腦科醫院／廣州市惠愛醫院，廣東 廣州510370；2廣州中醫藥大學第二附屬醫院／廣東省中醫院，廣東 廣州510120）

紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2在診斷地中海貧血中的應用

何柯新1，王會敏2，麥靜雯1，邱萍英1，徐鵬1，張燁梓1，洪劍浩1，林裕龍1

（1廣州醫科大學附屬腦科醫院／廣州市惠愛醫院，廣東 廣州510370；2廣州中醫藥大學第二附屬醫院／廣東省中醫院，廣東 廣州510120）

目的探討紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2在診斷地中海貧血中的應用價值。方法采用回顧性分析的方法，分析同時進行地中海貧血篩查及基因診斷的930例患者的檢查結果，并將其分為對照組、貧血組、α－地貧組和β－地貧組。結果地貧組與貧血組在MCV和MCH方面差異無統計學意義 （P＞0.05），在紅細胞脆性方面差異有統計學意義 （P＜0.05）；ROC曲線下的面積中，α－地貧組中所有參數的面積均未達到90%，β－地貧組中紅細胞脆性和HbA2的面積均達到90%，而MCV和MCH的面積較小；紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2在α－地貧組中的最佳診斷截斷值分別為：50.50、71.65、23.25、2.65，在β－地貧中的最佳診斷截斷值分別為48.50、71.05、23.10、3.55。結論紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2四個參數在診斷地中海貧血方面有一定的作用，多個參數綜合考慮可為臨床診斷地中海貧血提供更準確的參考依據。

地中海貧血；紅細胞脆性；MCV；MCH；HbA2

地中海貧血是基因突變或缺失導致珠蛋白鏈合成障礙，進而造成α和β鏈比例失衡所引起的遺傳性溶血性貧血［1］，在廣東、廣西及海南省較為常見［2］。基因診斷是目前診斷地貧的金標準，但技術要求高，費用昂貴，不適宜做常規檢測方法廣泛應用于臨床篩查、診斷［3］。血紅蛋白電泳結合紅細胞參數的運用克服了這些弊端，為臨床患者提供了簡便快速的篩查方法。本研究收集2012年至2015年同時進行地貧篩查和地貧基因診斷的患者930例，結合紅細胞相關參數進行分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2012年8月到2015年12月來我院做地貧篩查同時做地貧基因的患者930例，其中男性294例，女性636例；年齡1～91歲，中位年齡31歲。

1.2 儀器BioRad Variant II血紅蛋白電泳儀，日本 Sysmex XE－5000全自動血細胞分析儀，BS－800生化分析儀。

1.3 檢測方法①紅細胞參數測定：抽取靜脈血2 mL于EDTAK2抗凝真空采血管，用XE－5000進行血常規CBC模式的檢測，上機前使用XE配套質控品進行質控檢測。②血紅蛋白電泳：將EDTA－K2抗凝血顛倒混勻后直接放在Bio－Rad Variant II血紅蛋白電泳儀上進行檢測，每批試驗均用廠家配套質控品做質控，嚴格按照操作說明進行操作。③基因檢測：枸櫞酸鈉抗凝管采血2 mL，使用深圳亞能生物技術有限公司提供的試劑進行DNA提取和基因診斷，α－地貧采用跨越斷裂點的PCR技術檢測3種缺失，β－地貧采用PCR－膜反向點雜交技術檢測17種基因位點突變。嚴格按照儀器說明書進行操作。④紅細胞脆性檢測：將EDTA－K2抗凝血用生理鹽水配制成5%的紅細胞懸液，在BS－800生化分析儀上進行紅細胞脆性檢測，采用武漢市長立生物有限責任公司提供的紅細胞脆性測定試劑盒。

1.4 分組將所有樣本分為正常對照組 （未涉及到致貧血的因素）、貧血組 （排除基因診斷為地貧患者，排除有諸如缺鐵、缺乏葉酸、懷孕、腎病等因素的貧血患者）及經過基因診斷確診的α－地貧組和β－地貧組。

1.5 統計學處理用SPSS 19.0統計軟件，數據以±s表示，組間比較行多個獨立樣本的非參數檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義；分別對紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2做ROC曲線。

2 結果

2.1 紅細胞脆性、MCV、MCH和HbA2的檢測結果貧血組與地貧組的各項指標與對照組比較，差異均有統計學意義 （P＜0.05）；地貧組與貧血組在MCV和MCH方面差異無統計學意義 （P＞0.05）；在紅細胞脆性方面，地貧組與貧血組差異有統計學意義 （P＜0.05），α－地貧與β－地貧組間的差異無統計學意義 （P＞0.05）；HbA2方面，貧血組與α－地貧組的差異無統計學意義，其余各組間差異均有統計學意義 （P＜0.05）。見表1。

2.2 ROC曲線下的面積ROC曲線下的面積中，α－地貧組中所有參數的面積均未達到90%；β－地貧組中紅細胞脆性和HbA2的面積均達到90%，而MCV和MCH的面積較小。見表2。

2.3 紅細胞脆性、MCV、MCH和HbA2的診斷截斷值紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2的在α－地貧組中的最佳診斷截斷值分別為50.50、71.65、23.25、2.65，β－地貧分別為48.50、71.05、23.10、3.55，所對應的靈敏度、特異度及Youden指數見表3。

表1 紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2的試驗結果 （±s）

表1 紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2的試驗結果 （±s）

組別 n 紅細胞脆性（%） MCV MCH HbA2 α－地貧組 300 44±16.6 67.8±7.4 21.3±2.8 2.3±0.4 β－地貧組 210 39±12.9 64.6±5.9 20.5±1.9 6.1±6.4貧血組 193 60±12 68.8±6.8 20.1±3.1 2.2±0.3對照組 227 73±15 85.0±9.1 28±3.9 3±1.4

表2 紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2 ROC曲線下的面積結果

表3 紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2的診斷截斷值

3 討論

地中海貧血是由于血紅蛋白珠蛋白鏈合成部分或完全受抑而引起的遺傳性慢性溶血性貧血，除血紅蛋白成分、含量及電荷情況發生改變外，幼紅細胞利用鐵也發生障礙，主要是原卟啉與鐵結合障礙，血象也會發生相應的變化，主要表現為小細胞低色素性貧血、MCV降低。此外，多余的珠蛋白鏈沉附于紅細胞內表面，使紅細胞膜滲透張力增加，脆性降低。據相關報道［4－6］顯示，MCV、紅細胞脆性及血紅蛋白電泳含量檢測對地貧攜帶者的篩查有一定價值。

從表1看出，貧血組與地貧組的各項指標與對照組比較，差異均有統計學意義，提示可通過四個參數來區分地貧及貧血患者和正常人群；MCV、MCH結合紅細胞脆性可區分地貧和貧血患者；β－地貧患者的HbA2值明顯高于其他組，因此HbA2含量的升高可作為診斷β－地貧的特異性指標。表2顯示，紅細胞脆性和MCV在診斷α－地貧時的準確性中等 （曲線下的面積 ＜90%）；而紅細胞脆性和HbA2在診斷β－地貧時準確性較高，尤以HbA2為最好 （面積達到了0.997）。表3顯示用ROC曲線反映靈敏度與特異性之和的Youden指數，其中HbA2≥3.55作為診斷β－地貧的指標，Youden指數最高，與馮桂玲等［7］的研究結果相似。而其他參數在診斷兩種地貧中的Youden指數較低，沒有很好的特異性與靈敏度。

綜上所述，紅細胞脆性、MCV、MCH、HbA2在診斷地中海貧血方面有一定的作用，仍要多個參數綜合考慮，以便為臨床診斷地中海貧血提供更準確的參考依據。

[1]劉玲,蔣瑋瑩,許世艷,等.廣東地區地中海貧血致病基因的基因型及β珠蛋白基因多態性研究 [J].中華血液學雜志,2013,34(7): 595－599.

[2]Zheng CG,Liu M,Du J,et al.Molecular spectrum of α－and β－globin gene mutations detected in the population of Guangxi Zhuang Autonomous Region,People′s Republic of China[J].Hemoglobin,2011, 35(1):28－39.

[3]何英,張銀輝,吳潤香,等.紅細胞平均體積、脆性以及毛細管血紅蛋白電泳聯合檢測在產前地中海貧血診斷中的價值 [J].國際檢驗醫學雜志,2013,34(19):2521－2523.

[4]丁高儂,鄭雁堅,王治偉.MCV、MCH和RDW對孕前篩查地中海貧血的意義 [J].白求恩軍醫學院學報,2011,9(3):163－165.

[5]Sirichotiyakul S,Wanapirak C,Srisupundit K,et al.A comparison of the accuracy of the corpuscular fragility and mean corpuscular volume tests for the alpha－thalassemia 1 and beta－thalassemia traits[J].Int J Gynaecol Obstet,2009,107(1):26－29.

[6]Mamtani M,Jawahirani A,Das K,et al.Bias－corrected diagnostic performance of the naked eye single tube red cell osmotic fragility test (NESTROFT):An effective screening tool for β－thalassemia[J].Hematology,2006,11(4):277－286.

[7]馮桂玲,林楨,林敏,等.ROC曲線評價β地中海貧血血紅蛋白A2的診斷價值 [J].實用醫學雜志,2013,29(13):2187－2189.

（責任編輯：鐘婷婷）

The Application of Erythrocyte Fragility,MCV,MCH and HbA2 in the Diagnosis of Thalassemia

HE Kexin1,WANG Huimin2,MAI Jingwen1,QIU Pingying1,XU Peng1,ZHANG Yezi1,HONG Jianhao1,LIN Yulong1(1The Affiliated Brain Hospital of Guangzhou Medical University/Guangzhou Huiai Hospital,Guangzhou 510370,China;2The Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of TCM/Guangdong Provincial Hospital of TCM,Guangzhou 510120,China)

ObjectiveTo explore the clinical value of erythrocyte fragility,MCV,MCH and HbA2 in the diagnosis of thalassemia.MethodsThe examination results of930 patients with thalassemia screening and gene diagnosis in our hospital were analyzed retrospectively, and all cases were divided into control group,anemia group,alpha thalassemia group and beta thalassemia group.ResultsThere was no statistically difference in MCV and MCH between thalassemia group and anemia group,but there was a significant difference in erythrocyte fragility(P＜0.05).The areas of ROC curve did not reach 90%in alpha thalassemia group,but the areas of ROC curve reached 90%in erythrocyte fragility and HbA2 of beta thalassemia group,and the areas of ROC curve were smaller in MCV and MCH.The cutoff values were 50.50,71.65,23.25,2.65 respectively in erythrocyte fragility,MCV,MCH,HbA2 of alpha thalassemia group,and 48.50,71.05,23.10, 3.55 in beta thalassemia group.ConclusionsErythrocyte fragility,MCV,MCH and HbA2 have certain value in the diagnosis of the thalassemia,which will provide a more accurate reference for clinical diagnosis of thalassemia.

Thalassemia;Erythrocyte fragility;MCV;MCH;HbA2

R556

：A

10.3969/j.issn.1674-4659.2017.02.0181

2016－08－11

2016－10－12

廣東省中醫藥局科研項目 “綠茶提取物靶向HIF－α的抗阿爾茨海默病Aβ生成及其機制的研究” （項目編號：20161092）

何柯新 （1982－），男，碩士研究生學歷，主管技師，主要研究領域：臨床生物化學與生物化學檢驗。