許裕紅

DOI:10.19392/j.cnki.16717341.201722210
摘要:作為原血常規主要儀器設備,血細胞分析儀可以提供眾多實驗指標,對診斷疾病具有重要意義,必須要保證其檢定結果的可靠性。
關鍵詞:血細胞分析儀;檢定方法;影響因素
血細胞分析儀在各級醫院中均得到了廣泛應用,是臨床疾病診斷與鑒別診斷重要支持,這樣就決定了血細胞分析儀檢定的重要性。就日常檢定工作來看,很多情況下會因為外部因素的干擾,而出現細胞計數不準確的情況,想要解決此類問題,前提是要明確問題發生原因,然后有針對性的采取措施進行優化,提高檢定過程的規范性,排除標準物質、人為操作以及儀器試劑等因素帶來的影響。
一、血細胞分析儀檢定影響因素
(一)儀器檢測技術
血細胞分析儀主要分為機械系統、細胞檢測系統、電學系統以及計算機控制系統等幾部分組成,且以檢測系統對最終檢定結果準確性影響最大。目前我國所用血細胞分析儀,檢測技術多為電阻抗檢測與光散射檢測,應將其作為主要影響因素進行分析。
1.電阻抗檢測
應用電阻抗檢測方法,即在待測稀釋液內設置一微孔,并在微孔兩端添加電壓電極,按照一定比例進行稀釋處理后,利用負壓吸引使其通過儀器微孔小管。與稀釋液相比血細胞電導性較低,這樣液體細胞顆粒在通過微孔時,電極間電阻將會出現瞬間變化,形成電脈沖信號,只需要完成電脈沖計數便可確定血細胞顆粒數量。其中,顆粒體積大小可以由脈沖幅度表示,通過對不同細胞對應脈沖幅度便可判斷細胞種類,最后通過放大、調節閾值、甄別、整形、計數后便可得到檢驗結果[1]。在整個過程中,雖然操作簡單快速,并且成本較低,但是因為設計因素的限制,并不能有效對細胞內部結構進行有效甄別,如果液體內幼稚白細胞數量較多,會很大程度上降低白細胞計數結果準確性。同樣核紅細胞增多時,對于白細胞分群與計數準確性降低。
2.光散射檢測
電阻抗檢測技術在實際應用中存在較大缺陷,在血細胞分析儀不斷更新背景下,光散射檢測實現了對電阻抗檢測技術的有效補充,可進一步提高檢測結果準確性。檢測過程中按照一定比例對待檢測血液進行稀釋處理,使其形成一個極細的液流穿過激光束,通過激光束照射,每個細胞均會產生光散射,由光電倍增管接收[2]。應用此種方法可以實現對白細胞進行詳細分類,包括三分類、五分類以及九分類。并且在進行紅細胞計數時,可以結合電阻抗方法對紅細胞體積進行三維空間分析,保證計數結果的準確性。同時,結合比色法對血紅蛋白計數,可以通過光散射法分析單個紅細胞血紅蛋白,可有效降低高白細胞等因素對血紅蛋白學比色的影響。
(二)儀器試劑影響
所用儀器試劑不同,也會對最終檢定結果產生影響,其中常見的儀器試劑包括稀釋液、溶血素以及清洗劑等。
1.稀釋液
血細胞分析儀計量鑒定,主要是利用稀釋液對血液細胞進行稀釋處理,避免出現聚集或粘連問題,同時還可以維持血液pH與ρ等理化指標的穩定。不同血細胞分析儀,對稀釋液的理化指標要求差異明顯,將電阻抗法應用到不同儀器上,設定的脈沖信號閾值存在差異。如果在實際檢定中,稀釋液理化指標不合格,必定會對檢測結果準確性產生影響,包括白細胞分類不細、血小板本底高等。因此需要合理選擇檢定用稀釋液,尤其是對于長時間放置的試劑,要避免因為重力沉降造成溶液不穩定性帶來的計數誤差較大問題的發生。
2.溶血素
通過應用溶血素來對血細胞進行溶解,便于白細胞的可靠計數,同時作用于白細胞膜,還可以使得白細胞膜穿孔,胞漿流失后進行內核檢測。對于溶血素的質量,多通過吸光度、吸收峰波長、pH值以及空白值等指標來衡量試劑質量。如果吸收峰波長、吸光度等不符合要求,將會對比色法測量血紅蛋白結果準確性產生影響。如果所用溶血素溶血不完全,無法對紅細胞造成有效破壞,會直接將紅細胞當做白細胞計數,使得最終白細胞計數增多。
3.清洗劑
主要利用清洗劑進行管道、計數池以及檢測小孔周圍沉積、污染蛋白的清除,可根據儀器要求在每次檢測完成或者關機時使用。市場上清洗劑質量偏差較大,應選擇活性酶含量多的清洗劑,可對管道、計數池所沉積蛋白進行可靠去除,但是此種試劑保質期較短,且成本高實用性較低。清洗劑效果往往需要經過一段時間后才能夠體現,如果所用清洗劑質量較差,將會造成管道、計數池發硬、變性、變色以及堵塞等,還會改變液體壓力,測量結果漂移,影響最終檢定結果準確性。在實際應用中,務必要選擇質量優良的清洗劑,爭取將系統誤差控制在最小。
二、血細胞分析儀示值誤差檢定分析
在對血細胞分析儀示值誤差進行檢定時,可以從儀器常用測量范圍內選擇3~5種不同濃度血細胞標準物質,且首次檢測必須要選擇5種,對其進行均勻混合后,連續測量5次,最后根據測定結果計算得到儀器示值相對誤差,△T。選擇絕對值最大△T作為儀器紅細胞技術濃度、白細胞計數濃度、血紅蛋白濃度以及血小板示值誤差檢定結果。其中,血細胞分析儀示值誤差計算公式為:
三、結語
血細胞分析儀為醫院血常規檢測的重要儀器,為保證其檢定結果的準確性,需要基于其技術特點,總結各影響因素,然后通過可靠措施進行調整優化,爭取為后續病情診斷以及治療提供可靠依據。
參考文獻:
[1]陳余君,馮瑤.血細胞分析儀計量檢定中細胞計數結果的影響因素[J].計量與測試技術,2011,38(11):911.
[2]趙鵬.血細胞分析儀主要技術指標超差的原因及“定期檢定”的重要性[J].甘肅科技縱橫,2007,(06):200.