高效液相法測定尼莫地平片劑的含量

路明亮

摘要：目的 通過HPLC方法測定尼莫地平片劑的含量。方法 在色譜條件：選擇Diamonsil C18（200 mm×4.6 mm，5 μm）為色譜柱，流動相：甲醇∶水（68∶32），檢測波長238 nm，進樣量10 μl，1.0 ml/min流速，柱溫為室溫（25℃）條件下進行檢測。結果 尼莫地平在11.07～55.35 μg/ml范圍內線性關系良好，線性方程為：Y=6921.2X-4311.6（r=0.9994），平均回收率為100.97%，RSD=1.5%。結論 采用高效液相色譜方法，可有效評估尼莫地平片劑中尼莫地平的含量，本法簡單、靈敏度高、結果準確。

關鍵詞：HPLC法；尼莫地平；含量

尼莫地平（Nimodipine，NMD）為1，4雙氫吡啶類鈣通道拮抗劑，主要用于擴張腦血管及改善腦功能[1]，該藥難溶于水，屬脂溶性藥物[2]。尼莫地平片劑測定多以紫外分光光度法為主，但因該法存在有關物質方面干擾，專屬性較差[3]，本文由此出發考察高效液相法在其含量測定方面的應用效果。

1 資料與方法

1.1儀器與試藥 島津 LC-2010CHT 型高效液相色譜儀；超聲波清洗器；甲醇由霍尼韋爾貿易（上海）有限公司提供，為色譜醇；尼莫地平對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：160112-160223）；尼莫地平片（牡丹江靈泰藥業股份有限公司，國藥準字H23022380，規格：20 mg，批號：160123、160321、160628）。

1.2方法

1.2.1高效液相色譜法

1.2.1.1色譜條件 ①波長：選擇以流動相做空白對照，于200～400 nm波長下對尼莫地平對照品溶液進行全波長掃描，結果顯示在238 nm處尼莫地平有最大吸收；以空氣為對照，對流動相進行全波段掃描顯示，其在238 nm內基線平行，無干擾，故確定檢測波長238 nm。②色譜柱：選擇Agilent C18（150 mm×4.6 mm，5 μm），流動相：甲醇∶水（68∶32），檢測波長238 nm，進樣量10 μl，1.0 ml/min流速，柱溫為室溫（25℃）。

1.2.1.2溶液的制備 ①供試品溶液的制備：精密稱取10片尼莫地平片，粉碎后混合均勻，精密稱取上述供試品適量置于25 ml容量瓶中，加入流動相適量稀釋，搖勻至澄清后，稀釋至對應刻度，取適量溶液經微孔濾膜（0.25 μm）過濾后，待用。②對照品溶液的制備：采用十萬分之一天平稱取尼莫地平對照品11.07 mg于100 ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻即得。

1.2.1.3方法學驗證 ①精密度試驗：在相同色譜條件下，取對照品重復進樣6次，每次10 μl，分別測定峰面積，并計算6組數據所得的相對標準偏差RSD，結果為1.2%<2.0%，符合藥典規定[4]，提示本組方法精密度良好。②重復性試驗：選擇同批號尼莫地平片6份，精密稱定后，根據供試品“1.2.1.2①”項操作制備溶液，采用“1.2.1.1”項下色譜條件，進樣10 μl，采集6份樣品的色譜圖，計算溶液的相對標準偏差RSD=1.3%（<2.0%），符合標準規定，提示本組方法具有較好的重復性。③穩定性試驗：于2 h、4 h、8 h、12 h、24 h取尼莫地平供試品溶液，采用相同色譜條件，進樣10 μl，根據測得的色譜峰面積，供試品組RSD為1.6%<2.0%，提示供試品溶液在24 h內較為穩定。④回收率考察：取“1.2.1.2①”項供試液，保存至3個錐形瓶內，依次加尼莫地平對照品0.409 mg、1.231 mg和2.141 mg，根據“1.2.1.1”項色譜條件，進樣10 μl，對峰面積進行測定，得到回收率分別為101.11%、100.84%和100.97%，平均100.97%，RSD 1.5%，與藥典標準相符[4]。

1.2.1.4線性關系考察 采用移液管精密移取“1.2.1.2②”的尼莫地平對照品溶液1.0 ml、2.0 ml、3.0 ml、4.0 ml、5.0 ml于10 ml容量瓶中，使用流動相稀釋至刻度，澄清后，采用微孔濾膜過濾，得到系列標準溶液。結合對應色譜條件，進樣10 μl，測定樣品色譜峰面積，以峰面積和濃度為坐標，建立標準曲線，得到方程為：Y=6921.2X-4311.6（r=0.9994），提示尼莫地平濃度在11.07～55.35 μg/ml范圍內與峰面積存在良好的線性關系。

1.2.2樣品中尼莫地平含量測定 結合“1.2.1.1”項下色譜條件，分別測定尼莫地平對照品溶液與3批尼莫地平片供試品溶液，供試品制備同“1.2.1.2①”項操作，采用自身對照法對供試品內含有的尼莫地平含量進行測定。

2 結果

結果顯示，高效液相法測定尼莫地平片中，尼莫地平平均含量（與標識量比較）為（100.67±0.83）%，見表1。

3 討論

尼莫地平（C21H26N2O7）屬二氫吡啶類鈣拮抗劑，其在238 nm和234 nm的波長處均有吸收，但研究顯示前者的靈敏度比后者高，故本文選擇238 nm作為檢測波長。流動相選擇方面，由于尼莫地平幾乎不溶于水而溶于甲醇，美國藥典33版[5]中顯示其流動相為甲醇-四氫呋喃-水（20∶20∶60），考慮上述方法對四氫呋喃純度及色譜柱要求較高，故本文嘗試采用甲醇-水系統作為流動相備選，最終選擇甲醇-水（68∶32）作為流動相，此時尼莫地平與雜質分離度較高為4.1，且峰形較好，保留時間在7.5 min左右。需注意的是尼莫地平對光敏感，故在測定過程中注意避光操作及保存。

通過本文結果我們可知，高效液相色譜法測定尼莫地平準確性高、精密度好、重現性好和相關性均符合相關要求，可通過色譜柱作用將尼莫地平及其有關物質有效分離，提高測定的專屬性，值得推廣使用。

參考文獻：

[1]潘文，李豫，雷宇，等.高效液相色譜法同時測定血清中尼莫地平和尼群地平濃度[J].中國藥業，2012，21（2）：25-26.

[2]李帥，李文莉，廖彬，等.高效液相色譜法測定尼莫地平固體制劑的溶出度[J].中南藥學，2012，10（7）：494-497.

[3]郝桂明，華蓮，唐素芳.HPLC法測定尼莫地平軟膠囊的含量及有關物質[J].藥物分析雜志，2012，32（3）：464-467.

[4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：化學工業出版社，2010.

[5]Rajani B，Mukkanti K.Optimized and validated RP-HPLC method for estimation of nimodipine in tablet dosage form[J].International Journal of Research in Pharmacy and Chemistry，2014，4（1）：105-109.