臨床微生物檢驗和細菌耐藥性監測

朱 江

臨床微生物檢驗和細菌耐藥性監測

朱 江

目的探討臨床微生物檢驗和細菌耐藥性監測情況。方法回顧性選取2015年7月至2016年7月沈陽市紅十字會醫院重點科室的生物標本涉及的非重復分離菌株193株，綜合分析其檢驗情況及細菌耐藥性，并評估其微生物標本檢驗、細菌藥敏試驗結果。結果①本組193株致病菌中，耐藥菌株占19.2%。其中ICU的耐藥菌株所占比例最高，為25.7%；其次是外科，耐藥菌株占22.8%；兒科耐藥菌株占12.9%；內科耐藥菌株占12.5%。②革蘭陽性菌共120株，占62.2%；革蘭陰性菌共73株，占37.8%；其中凝固酶陰性葡萄球菌所占比例最高，為33.7%，其次是金黃色葡萄球菌，占16.1%，再次是銅綠假單胞菌，占10.4%；其余菌株所占比例均相對較低，其中大腸埃希菌占8.8%，不動桿菌屬占7.7%，克雷伯菌屬占6.2%，枸緣酸菌屬占4.7%，腸桿菌屬占4.7%，變形桿菌屬占3.1%，腸球菌占2.6%，其他菌種占2.1%。結論對醫院內抗菌藥物實施規范化管理的前提下，還需不斷提升檢驗人員的微生物檢驗、細菌耐藥性檢測中的操作技能水平，從而逐步完善醫院臨床微生物實驗室，提升整體質量管理水準。

臨床微生物檢驗；細菌耐藥性；監測情況；細菌藥敏試驗

為進一步減少細菌耐藥性，規范國內醫療行為，保證患者合理應用抗生素，國家衛生和計劃生育委員會制定了《抗菌藥物臨床指導原則》[1]。醫護人員有必要貫徹落實、執行該原則，各級醫院需充分重視臨床生物監測工作，提升整體病原學的監測水平，正確培養并鑒定院內微生物，持續規范、改善細菌藥物敏感試驗的檢測方法，及時、準確地將試驗結果報告給醫師處理，從而為臨床合理應用抗菌藥物奠定基礎，積極改善患者預后[2]。本研究就臨床微生物檢驗、細菌耐藥性監測情況進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性選取2015年7月至2016年7月沈陽市紅十字會醫院重點科室的生物標本涉及的非重復分離菌株193株，均為各科室送檢的痰液、尿液、血液、膿性分泌物等標本，同一患者多次送檢的同一項標本僅記錄一次。對全部菌株進行抗菌藥物敏感試驗。培養基使用Mueller-Hinton瓊脂，抗菌藥物紙片由OXOID公司提供。

1.2 檢測方法應用Kirby-Bauter紙片擴散法進行細菌鑒定，選用大腸埃希菌ATCC 25922、銅綠假單胞菌ATCC 27853、黃色葡萄球菌ATCC 25923、肺炎鏈球菌ATCC 49619作為質控菌株。其中大腸埃希菌、產酸克雷伯菌、肺炎克雷伯菌等產生的超廣譜β-內酰胺酶菌株則均經酶抑制劑進行增效確證實驗、抗菌藥物敏感試驗紙片篩選檢測。

1.3 觀察指標統計醫院重點科室微生物標本檢驗結果和耐藥性細菌的科室分布情況；統計本組致病菌株的菌種分布。

1.4 統計學分析采用SPSS 19.0統計軟件進行數據處理，計數資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 醫院重點科室微生物標本檢驗結果和耐藥性細菌的科室分布情況本組193株致病菌中，耐藥菌株占19.2%。其中，重癥監護病房（ICU）病房的耐藥菌株所占比例最高，為25.7%；其次是外科，耐藥菌株占22.8%；兒科耐藥菌株占12.9%，內科耐藥菌株占12.5%。見表1。

表1 醫院重點科室微生物標本檢驗結果和耐藥性細菌的科室分布情況

2.2 本組致病菌株的菌種分布本組193株致病菌中，革蘭陽性菌共120株，占62.2%；革蘭陰性菌共73株，占37.8%。其中，凝固酶陰性葡萄球菌所占比率最高，其次是金黃色葡萄球菌。見表2。

表2193 株致病菌株的菌種分布

3 討論

多重耐藥菌新特征研究是目前臨床微生物檢驗工作中的重點，需對臨床微生物檢驗和細菌耐藥性監測給予高度重視，對微生物檢驗人員也提出了高質量、高水平要求。細菌出現耐藥表現后，對于抗菌藥物發揮的抑菌、滅菌作用可產生抵抗，從而降低抗菌藥物的治療作用。細菌耐藥性可以分為天然耐藥性和獲得耐藥性。通常細菌本身已存在天然耐藥性，是其自身染色體相關基因所致，有一定的遺傳性表現，從而表現出該種類型的耐藥性[3]。獲得耐藥性主要是由于長期使用抗生素，敏感菌株被殺滅，耐藥菌株大量繁殖，取代敏感菌株，導致細菌對于該種藥物耐藥率不斷提升，即為獲得耐藥性。因此，在對患者實施抗菌藥物治療前，應做好相關微生物檢驗工作，以免產生細菌耐藥性，或出現多重耐藥菌。

近年來，各種菌株耐藥性均存在一定程度的上升，為進一步改善患者的抗菌治療效果，有必要加強對各種細菌耐藥機制的了解[4]。本研究結果顯示，凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌在耐藥性細菌中所占比例最高，是引起臨床感染最主要的致病菌，其次是腸桿菌屬、非發酵類細菌。凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌的耐藥作用受其分泌的青霉素結合蛋白影響，在青霉素結合蛋白協助下，葡萄球菌對于內酰胺類抗菌藥物存在較低水平的親和力，導致其不受藥效影響，能夠在抗生素環境內正常生長[5]。腸桿菌屬可使患者受多類致病菌的不良影響。在大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌的共同影響下，腸桿菌屬可合成一種超廣譜的β-內酰胺酶，并可被其他細菌利用，增強其藥性。腸球菌能夠在抗生素環境內合成青霉素結合酶，且此種青霉素結合酶較為特別，會降低腸球菌、青霉素之間的親和力，提升耐藥性。本研究結果發現，銅綠假單胞菌在臨床耐藥菌中比例較高，僅次于凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌，這與銅綠假單胞菌的細胞膜通透性小、可隔離抗生素相關。銅綠假單胞菌的上述特性，導致其對臨床上許多抗菌藥物均存在較強的耐藥性。

此外，本研究結果提示，ICU的耐藥菌株所占比例最高，可見ICU病房是產生耐藥性細菌的高危科室，應加強對ICU患者院內感染的預防。既往研究發現，細菌所致感染是目前醫療領域內多種疾病的致病機制之一，國內醫療技術雖然處于不斷發展中，但各種細菌對于抗生素的抵抗作用也持續增強，且多種細菌的耐藥性呈不斷提高趨勢[6-7]。此外，結合實際情況發現，國內臨床微生物檢測的準確性有待進一步提升，為增強細菌防治效果，在醫療研究中納入微生物檢測技術十分必要。

綜上所述，醫院應進一步完善抗菌藥物應用原則，保證合理、科學應用，并不斷提高臨床微生物檢驗人員的專業技能，使其掌握最新的微生物檢驗成果，提升檢測準確性，為院內感染的防治工作提供理論依據。

[1] 盛毓芳.探析細菌耐藥性監測在臨床微生物檢驗中的應用價值[J].飲食保健,2016,3(11):220-221.

[2] 張春梅,董玲,楊建忠.根據2014年全年細菌耐藥監測結果分析石嘴山市第一人民醫院抗菌藥物使用情況[J].中國保健營養,2015,25(13):314-315.

[3] Skariyachan S,Mahajanakatti AB,Grandhi NJ,et al.Environmental monitoring of bacterial contamination and antibiotic resistance patterns of the fecal coliforms isolated from Cauvery River, a major drinking water source in Karnataka,India[J].Environmental Monitoring& Assessment,2015,187(5):4488.

[4] 施永新,宋衛青.某院2012年臨床常見病原菌耐藥性及與Mohnarin報告對比分析[J].中國感染控制雜志,2014,13(3):141-147.

[5] 曹麗軍,時東彥,李志榮,等.2013年河北省細菌耐藥監測網三級甲等醫院臨床分離大腸埃希菌耐藥性分析[J].臨床薈萃,2015,30(9):970-973.

[6] 李平,范會,金炎,等.2010—2014年燒傷患者感染病原菌及抗菌藥物敏感性分析[J].臨床軍醫雜志,2016,44(12):1285-1287.

[7] Ayyash S,Wu W,Selvaganapathy PR.Fast and inexpensive detection of bacterial viability and drug effectiveness through metabolic monitoring[J].Sensors,2016,16(11):22-25.

10.12010/j.issn.1673-5846.2017.07.050

沈陽市紅十字會醫院，遼寧沈陽 110013