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紫外線C誘導的人晶狀體上皮細胞中CRYAA表達的上升△

2017-08-11 10:47:57李丹羅怡盧奕
中國眼耳鼻喉科雜志 2017年4期
關鍵詞:檢測

李丹 羅怡 盧奕

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·基礎研究·

紫外線C誘導的人晶狀體上皮細胞中CRYAA表達的上升△

李丹 羅怡*盧奕*

目的 研究在紫外線照射下人晶狀體上皮細胞(LEC)中晶狀體蛋白的表達變化。方法 用波長為254 nm的紫外線C(UVC)照射LEC(包括原代細胞和細胞系),一定時間后收集照射后的細胞進行如下實驗:①碘化丙啶(PI)染色和線粒體膜電位流式檢測對細胞進行凋亡評估;②實時熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)檢測CYRAA,CRYAB,CRYBB2基因的mRNA表達量;③免疫熒光染色檢測CRYAA的蛋白表達;④焦磷酸測序檢測CRYAA基因的啟動子區域甲基化。結果 LEC在強度為25 μW/cm2的UVC照射0、10、20、30 min后立即做PI染色,結果顯示:隨著照射時間的增加,細胞凋亡率遞增,分別為0、7%、33%和100%。LEC在UVC照射10 s并培養24 h后100%死亡;照射5 s并培養24 h后,部分凋亡,CRYAA基因表達量顯著上調(>4倍),但是細胞傳代后CRYAA基因表達量恢復正常水平。焦磷酸測序結果顯示,CRYAA基因的啟動子區甲基化水平無明顯變化。結論 LEC在受到強度為25 μW/cm2的UVC照射10 s并繼續培養24 h后死亡,照射5 s并繼續培養24 h后,CRYAA基因表達上調,提示其抗氧化作用,但該上調不是通過CRYAA基因啟動子甲基化改變來調控的。(中國眼耳鼻喉科雜志,2017,17:239-244)

白內障;紫外線;CRYAA;細胞凋亡

白內障被定義為晶狀體渾濁,在全球范圍內約有1 600萬患者,是主要的致盲眼病[1]。現在普遍認為白內障是隨著年齡老化自然發生的,平均在50歲開始發病。同時,若干其他因素也會影響、加速白內障的發生、發展,包括家族遺傳、眼外傷、糖尿病、眼部炎癥、長時間暴露在紫外線(ultraviolet,UV)下等因素。已經被普遍認同的是:長期在可接觸UV環境下工作的人(不論UV是來自于太陽光,還是消毒燈),患白內障的年齡會比平均年齡提前。這……

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