血紅素氧化酶1啟動因子基因多態性與冠心病及其患者支架術后生存質量的相關性研究

張映喜++++++陳俊禹++++++陳榮松++++++陳宋明++++++楊寶軍

[摘要]目的 研究血紅素氧化酶1（HO-1）啟動因子基因多態性與冠心病患者支架術后生存質量的相關性。方法 臨床納入58例我院2015年8月～2016年8月收治的冠心病患者作為冠心病組，所有患者均行支架手術干預治療。另選取58例同期來我院進行健康體檢的志愿者作為對照組。對兩組研究對象進行HO-1啟動因子基因多態性檢測，觀察兩組HO-1啟動因子基因多態性分布情況。對兩組生存質量進行觀察，分析HO-1啟動因子基因多態性與冠心病患者的相關性。結果 冠心病組患者與對照組在SS、SL、LL基因型以及S、L等位基因分布上差異均有統計學意義（P<0.05）；而在長、短基因型上分布差異無統計學意義（P>0.05）。冠心病組患者生存質量評分（QOL）、日常生活質量評分（ADL）評分均明顯低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。SS、SL基因型及S等位基因與冠心病患者生存質量成明顯負相關，P<0.05；LL基因型及L等位基因與冠心病患者生存質量成正相關，P<0.05。結論 冠心病患者支架術后生存質量與患者HO-1啟動因子基因多態性密切相關，攜帶SS、SL基因型及S等位基因的患者一般生存質量較好，而LL基因型及L等位基因的患者生存質量較差。

[關鍵詞]血紅素氧化酶1；基因多態性；冠心病；生存質量；相關性

[中圖分類號] R541.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）07（a）-0033-03

Study on the correlation between the gene polymorphism of heme oxygenase-1 promoter and the coronary heart disease and the quality of life after stenting

ZHANG Ying-xi1 CHEN Jun-yu2 CHEN Rong-song2 CHEN Song-ming2 YANG Bao-jun2

1.Department of Critical Medicine，the First Affiliated Hospital of Shantou University Medical College，Shantou 515041，China；2.Department of Cardiology，the First Affiliated Hospital of Shantou University Medical College，Shantou 515041，China

[Abstract]Objective To study the correlation between the gene polymorphism of heme oxygenase-1（HO-1） promoter and the quality of life after stenting in the patients with coronary heart disease.Methods 58 patients with coronary heart disease who were admitted to our hospital from August 2015 to August 2016 were clinically enrolled.They were assigned to the coronary heart disease group.All patients were given the intervention of stenting.Another 58 volunteers who were given physical examination in our hospital during the same period of time were selected as the control group.The distribution of HO-1 promoter gene polymorphism was observed in the two groups of subjects.The quality of life was observed in both groups，and the correlation between gene polymorphism of HO-1 promoter and the patients with coronary heart disease was analyzed.Results There were significant differences in the distribution of SS，SL，LL genotypes and S，L alleles between the patients in the coronary heart disease group and the control group（P<0.05）；while the distribution of long and short genotypes was not different（P>0.05）.The scores of QOL and ADL in the coronary heart disease group were significantly lower than those in the control group（P<0.05）.SS，SL genotypes and S allele were significantly negatively correlated with the quality of life of patients with coronary heart disease（P<0.05）；LL genotype and L allele were positively correlated with the quality of life of patients with coronary heart disease（P<0.05）.Conclusion The quality of life of patients with coronary heart disease after stenting is closely correlated to the HO-1 promoter gene polymorphism.Patients carrying with SS，SL genotypes and S allele generally have a better quality of life，while the patients carrying with LL genotype and L allele have a poorer quality of life.

[Key words]Heme oxygenase-1；Gene polymorphism；Cor？鄄onary heart disease；Quality of life；Correlation

冠心病是臨床常見的心血管疾病之一，近年來隨著我國人口老齡化的加劇，人們飲食習慣和生活習慣的改變，冠心病發生率呈明顯上升趨勢[1]。冠心病的主要病理特征是冠狀動脈粥樣硬化，而引起冠狀動脈粥樣硬化的因素較多，其中基因表達的改變及促進作用是目前研究的熱點[2]。近年來研究顯示[3-4]，血紅素氧化酶1（HO-1）在抗氧化平衡方面具有重要作用，可催化游離血紅素降解，起到抗炎、抗氧化作用。有學者發現[5]，HO-1含量與冠心病發病率有密切關系，因此提出HO-1基因的表達可能對冠心病患者預后情況具有密切關系。本文對我院冠心病支架術后患者進行研究，探討HO-1啟動子區（GT）n基因多態性與冠心病支架術后患者生存質量的關系，為臨床預防性干預冠心病患者提供理論依據，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取58例我院2015年8月～2016年8月收治的冠心病患者作為冠心病組。納入標準：①經冠狀動脈造影檢查和診斷符合冠心病診斷標準的患者[6]；②符合支架術治療手術指征的患者；③自愿參加本研究并簽字同意的患者；④預計生存期超過1年的患者。排除標準：①介入治療（PCI）手術失敗的患者；②合并其他嚴重疾病（如先天性心臟病、心包疾病、腎功能不全等）對研究有影響的患者；③認知功能障礙、精神異常等無法配合研究的患者。另選取58例同期來我院進行健康體檢的志愿者作為對照組。冠心病組男性31例，女性27例；年齡38～86歲，平均（61.2±4.5）歲；合并癥：高血壓26例，糖尿病18例，高血脂9例。對照組男性30例，女性28例；年齡35～85歲，平均（61.4±4.2）歲；合并癥：高血壓25例，糖尿病16例，高血脂10例。兩組患者上述資料（性別、年齡以及合并癥等）差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1 HO-1啟動子區（GT）n基因多肽檢測

1.2.1.1單核細胞分離 取研究對象晨靜脈血5 ml，肝素抗凝，混合Hank′s稀釋液稀釋1倍，加5 ml單個核細胞分離液，離心機離心旋轉，重復3次稀釋、離心、洗滌后沉淀物為單核細胞，DMEM冰凍液-80℃保存備用。

1.2.1.2 DNA提取 采用Qiagen公司提供的基因組抽提試劑盒進行DNA提取，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，采用鹽析法對所分離出的單個核細胞進行基因組DNA提取。

1.2.1.3反應引物設計 下載HO-1基因啟動子全長序列，利用primer5.0軟件合成HO-1基因PCR反應產物，并校對引物。正向序列：5'-GGATTCCAGCAGGTGACATT-3'；反向序列：5'-ACAGCTGATGCCCACTTTCT-3'。

1.2.1.4熒光標記引物 采用PCR反應體系進行標記，4 μl體系進行PCR反應，反應條件：95℃預變5 min，分別在95℃、55℃以及72℃下各進行30 s預變，進行10個循環；在89℃、55℃以及72℃下各進行30 s預變，進行25個循環；72℃下延伸10 min。

1.2.1.5毛細管電泳 PCR純化后采用美國ABI公司生產的ABI 3730XL進行毛細管電泳，收集毛細管電泳熒光信號，將原始電泳信號變為峰圖文件進行分析。

1.2.1.6基因分型 對所得到的峰圖文件進行基因分型，根據每個樣本在HO-1啟動子區（GT）位點的重復次數進行基因型的劃分。

1.2.2生存質量評估方法

采用生存質量評分（QOL）[7]以及日常生活質量評分（ADL）[8]評估兩組對象生存質量情況，QOL滿分60分，ADL滿分100分，分值越高，兩組患者生存質量越高。

1.3觀察指標

觀察兩組患者HO-1啟動子區（GT）n基因型多態性分布情況，觀察兩組患者支架術后生存質量情況，分析HO-1啟動因子基因多態性與術后生存質量的相關性。

1.4統計學方法

采用SPSS 18.0統計軟件，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗，計數資料用百分比表示，采用χ2檢驗，采用Spearman進行相關性分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1 HO-1啟動子區（GT）n基因型多態性分布情況

冠心病組患者與對照組在SS、SL、LL基因型以及S、L等位基因分布上差異均有統計學意義（P<0.05）；而在長、短基因型上分布差異無統計學意義（P>0.05）（表1）。

2.2兩組生存質量的比較

冠心病組患者QOL、ADL評分均明顯低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）（表2）。

2.3 HO-1啟動子區（GT）n基因多態性與冠心病患者生存質量的相關性分析

SS、SL基因型及S等位基因與冠心病患者生存質量呈明顯負相關，P<0.05；LL基因型及L等位基因與冠心病患者生存質量呈正相關，P<0.05（表3）。

3討論

隨著醫學模式的轉變，醫學學者已經不僅僅關注患者生存、死亡等問題，更多學者開始關注患者的生存質量問題[9]。目前生存質量已經成為眾多疾病預后的重要指標，有效反映了疾病預后的治療效果[10]。既往研究顯示[11-13]，冠心病是由眾多因素引起的心血管疾病，而眾多因素對患者預后影響也較大。近年來人們不僅僅關注吸煙、飲酒等表面上的影響因素，對于基因對冠心病患者的影響成為當下研究的熱門話題。

HO-1是HO的一種同工酶，可有效起到抗氧化、抗應激以及抗炎的作用。目前研究發現[14]，先天性缺乏HO-1的人群容易發生冠狀動脈粥樣硬化，因此認為HO-1的表達對冠狀動脈發病率及預后有一定影響。HO-1基因啟動子區（GT）n存在基因多態性，因此不同基因型HO-1表達從而對冠心病患者預后的影響成為人們關注的重點[15]。本文結果顯示，HO-1基因型存在SS、SL以及LL三種，等位基因為S和L。在冠心病患者中SS、SL基因型以及S等位基因表達低于正常人群，而LL基因型以及L等位基因表達明顯高于正常人群。在生存質量上發現，冠心病患者QOL、ADL評分均低于正常人。分析HO-1基因多態性與生存質量的關系發現，SS、SL基因型及S等位基因與冠心病患者生存質量成明顯負相關，P<0.05；LL基因型及L等位基因與冠心病患者生存質量成正相關，P<0.05。提示S等位基因可能是冠心病患者支架術后生存質量的保護基因，而L可能為危險基因。

綜上所述，冠心病患者支架術后生存質量與患者HO-1啟動因子基因多態性密切相關，攜帶SS、SL基因型及S等位基因的患者一般生存質量較好，而LL基因型及L等位基因的患者生存質量較差。

[參考文獻]

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（收稿日期：2017-04-14 本文編輯：崔建中）